Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Fukuda, Daniel Akio
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08022018-143046/
Resumo: Fosfolipases D (FLD) do veneno das aranhas do gênero Loxosceles são capazes de causar entre outros efeitos, uma forte agregação plaquetária cujo mecanismo ainda não foi elucidado. Portanto, para estudar o papel das FLDs nesta atividade, uma FLD recombinante de L. gaucho (LgRec1) foi fusionada com a proteína fluorescente verde (EGFP) e utilizada como uma sonda para detectar a interação de LgRec1 com plaquetas. Essa quimera, denominada EGFP-LgRec1, manteve as principais características da LgRec1. A microscopia confocal das plaquetas mostrou que LgRec1 não requer componentes plasmáticos para se ligar às plaquetas, embora estes sejam necessários para que a LgRec1 induza agregação. Além disso, foi observado que a ação da LgRec1 leva à exposição de fosfatidilserina. Contudo, esta exposição não está relacionada à morte celular. Portanto, este trabalho mostrou que uma FLD de Loxosceles se liga a plaquetas, promovendo a exposição de fosfatidilserina, possibilitando a ligação de fatores de coagulação e resultando na agregação plaquetária.
id USP_cf41d0b15dc8b9734e7147f5e67597e2
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-08022018-143046
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str 2721
spelling Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.Identification of direct binding of a Phospholipase D from Loxosceles gaucho to platelets.Loxosceles gauchoLoxosceles gauchoAranhasBindingChimeric toxinCitometria de fluxoEGFPEGFPFlow cytometryFluorescent microscopyFosfolipase DGreen fluorecent proteinLigaçãoMicroscopia de fluorescênciaPhospholipase DPlaquetasPlateletsProteína verde fluorescenteSpidersToxina quiméricaToxinasToxinsFosfolipases D (FLD) do veneno das aranhas do gênero Loxosceles são capazes de causar entre outros efeitos, uma forte agregação plaquetária cujo mecanismo ainda não foi elucidado. Portanto, para estudar o papel das FLDs nesta atividade, uma FLD recombinante de L. gaucho (LgRec1) foi fusionada com a proteína fluorescente verde (EGFP) e utilizada como uma sonda para detectar a interação de LgRec1 com plaquetas. Essa quimera, denominada EGFP-LgRec1, manteve as principais características da LgRec1. A microscopia confocal das plaquetas mostrou que LgRec1 não requer componentes plasmáticos para se ligar às plaquetas, embora estes sejam necessários para que a LgRec1 induza agregação. Além disso, foi observado que a ação da LgRec1 leva à exposição de fosfatidilserina. Contudo, esta exposição não está relacionada à morte celular. Portanto, este trabalho mostrou que uma FLD de Loxosceles se liga a plaquetas, promovendo a exposição de fosfatidilserina, possibilitando a ligação de fatores de coagulação e resultando na agregação plaquetária.Phospholipases D (PLD) from spider venom of the genus Loxosceles are capable of causing, among other effects, a strong aggregation of platelets and its mechanism has not yet been elucidated. Therefore, to study the role of PLDs in this activity, a recombinant L. gaucho PLD (LgRec1) was fused with a green fluorescent protein (EGFP) and used as a probe to detect the interaction of LgRec1 with platelets. This chimera, named EGFP-LgRec1, remained the main activities of LgRec1. Platelet confocal microscopy has shown that LgRec1 does not require plasma components to bind to platelets, although these are required for LgRec1 to induce aggregation. In addition, it has been observed that the action of LgRec1 leads to exposures of phosphatidylserine. However, this exposure is not related to cell death. Therefore, this work showed that a Loxosceles PLD binds to platelets, promoting an exposure of phosphatidylserine, that may act as a scaffold for coagulation factors, resulting in platelet aggregation.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPMagalhães, Geraldo SantanaFukuda, Daniel Akio2017-08-10info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08022018-143046/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2018-07-19T20:50:39Zoai:teses.usp.br:tde-08022018-143046Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212018-07-19T20:50:39Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
Identification of direct binding of a Phospholipase D from Loxosceles gaucho to platelets.
title Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
spellingShingle Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
Fukuda, Daniel Akio
Loxosceles gaucho
Loxosceles gaucho
Aranhas
Binding
Chimeric toxin
Citometria de fluxo
EGFP
EGFP
Flow cytometry
Fluorescent microscopy
Fosfolipase D
Green fluorecent protein
Ligação
Microscopia de fluorescência
Phospholipase D
Plaquetas
Platelets
Proteína verde fluorescente
Spiders
Toxina quimérica
Toxinas
Toxins
title_short Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
title_full Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
title_fullStr Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
title_full_unstemmed Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
title_sort Identificação da ligação direta de uma Fosfolipase D de Loxosceles gaucho às plaquetas.
author Fukuda, Daniel Akio
author_facet Fukuda, Daniel Akio
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Magalhães, Geraldo Santana
dc.contributor.author.fl_str_mv Fukuda, Daniel Akio
dc.subject.por.fl_str_mv Loxosceles gaucho
Loxosceles gaucho
Aranhas
Binding
Chimeric toxin
Citometria de fluxo
EGFP
EGFP
Flow cytometry
Fluorescent microscopy
Fosfolipase D
Green fluorecent protein
Ligação
Microscopia de fluorescência
Phospholipase D
Plaquetas
Platelets
Proteína verde fluorescente
Spiders
Toxina quimérica
Toxinas
Toxins
topic Loxosceles gaucho
Loxosceles gaucho
Aranhas
Binding
Chimeric toxin
Citometria de fluxo
EGFP
EGFP
Flow cytometry
Fluorescent microscopy
Fosfolipase D
Green fluorecent protein
Ligação
Microscopia de fluorescência
Phospholipase D
Plaquetas
Platelets
Proteína verde fluorescente
Spiders
Toxina quimérica
Toxinas
Toxins
description Fosfolipases D (FLD) do veneno das aranhas do gênero Loxosceles são capazes de causar entre outros efeitos, uma forte agregação plaquetária cujo mecanismo ainda não foi elucidado. Portanto, para estudar o papel das FLDs nesta atividade, uma FLD recombinante de L. gaucho (LgRec1) foi fusionada com a proteína fluorescente verde (EGFP) e utilizada como uma sonda para detectar a interação de LgRec1 com plaquetas. Essa quimera, denominada EGFP-LgRec1, manteve as principais características da LgRec1. A microscopia confocal das plaquetas mostrou que LgRec1 não requer componentes plasmáticos para se ligar às plaquetas, embora estes sejam necessários para que a LgRec1 induza agregação. Além disso, foi observado que a ação da LgRec1 leva à exposição de fosfatidilserina. Contudo, esta exposição não está relacionada à morte celular. Portanto, este trabalho mostrou que uma FLD de Loxosceles se liga a plaquetas, promovendo a exposição de fosfatidilserina, possibilitando a ligação de fatores de coagulação e resultando na agregação plaquetária.
publishDate 2017
dc.date.none.fl_str_mv 2017-08-10
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08022018-143046/
url http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08022018-143046/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1815256792206147584

Registros relacionados