Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Borgonove, Camila Motta
Data de Publicação: 2008
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20200111-153501/
Resumo: O motivo de dupla arginina na região amino-terminal é uma característica das proteínas direcionadas pela via Tat. O direcionamento das proteases cloroplastidiais do tipo FtsH (cpFtsH) que contém motivo característico mostrou ser dependente de componentes da maquinaria de translocação T at. Contudo, análises genômicas mostraram que as proteínas FtsHs de plantas e cianobactérias podem ser separadas em três clados distintos. O primeiro grupo contém o motivo RR na região N-terminal, próximo ao primeiro segmento transmembrana. Os outros dois grupos não apresentam um motivo de dupla arginima apesar de terem duas argininas consecutivas encontradas na região lumenal que liga os dois domínios transmembranas. A FtsH5, uma protease que pertence ao terceiro grupo e uma série de construções envolvendo deleções na região e-terminal deste gene foram fusionados à GFP e usadas para avaliar os determinantes estruturais responsáveis pelo direcionamento da proteína para os tilacóides. Nossos resultados mostram que a proteína FtsH5 completa fusionada à GFP é corretamente direcionada para a membrana dos tilacóides, porém a região N-terminal não é suficiente para transportar a proteína GFP corretamente. Estes resultados são contrastantes com os dados obtidos para a proteína FtsH2, que apresenta o motivo clássico de dupla arginina, no qual o direcionamento pode ser mediado apenas pela região N-terminal. Nossos dados indicam que os determinantes para o direcionamento das FtsHs variam nos diferentes grupos. O requerimento da região e-terminal para o direcionamento da FtsH5 sugere a existência de um mecanismo de transporte alternativo.
id USP_df152bd19480868c8cd4ab7b24585014
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-20200111-153501
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str 2721
spelling Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóidesCharacterization of the mechanisms the targeting of FtsH to the thylakoids membraneARGININACIANOBACTÉRIASCLOROPLASTOSGENÔMICAPROTEÍNAS DA MEMBRANATILACOIDESO motivo de dupla arginina na região amino-terminal é uma característica das proteínas direcionadas pela via Tat. O direcionamento das proteases cloroplastidiais do tipo FtsH (cpFtsH) que contém motivo característico mostrou ser dependente de componentes da maquinaria de translocação T at. Contudo, análises genômicas mostraram que as proteínas FtsHs de plantas e cianobactérias podem ser separadas em três clados distintos. O primeiro grupo contém o motivo RR na região N-terminal, próximo ao primeiro segmento transmembrana. Os outros dois grupos não apresentam um motivo de dupla arginima apesar de terem duas argininas consecutivas encontradas na região lumenal que liga os dois domínios transmembranas. A FtsH5, uma protease que pertence ao terceiro grupo e uma série de construções envolvendo deleções na região e-terminal deste gene foram fusionados à GFP e usadas para avaliar os determinantes estruturais responsáveis pelo direcionamento da proteína para os tilacóides. Nossos resultados mostram que a proteína FtsH5 completa fusionada à GFP é corretamente direcionada para a membrana dos tilacóides, porém a região N-terminal não é suficiente para transportar a proteína GFP corretamente. Estes resultados são contrastantes com os dados obtidos para a proteína FtsH2, que apresenta o motivo clássico de dupla arginina, no qual o direcionamento pode ser mediado apenas pela região N-terminal. Nossos dados indicam que os determinantes para o direcionamento das FtsHs variam nos diferentes grupos. O requerimento da região e-terminal para o direcionamento da FtsH5 sugere a existência de um mecanismo de transporte alternativo.A twin-arginine-containing N-terminal sequence motif is characteristic for proteins that are targeted by the Tat-pathway. Targeting of a chloroplast FtsH protease (cp-FtsH) that contains such a motif has been shown to depend on components of the twin-arginine translocation (Tat)-pathway. However, phylogenetic and sequence comparison analyses showed that FtsH proteins of plants and cyanobacteria could be separated into three distinct clades. The first group contains a stroma-facing RR-motif near the N-terminus upstream of the first hydrophobic domain. The other two groups lack an obvious twin- arginine motif, albeit two consecutive arginines are found in a conserved lumenal region that links the trans-membrane domains. FtsH5, a group 3-belonging protease, and a series of e-terminal deletions of FtsH5 were fused to GFP and used to reveal structural determinants for the targeting to thylakoids. Our results show that only the full-length fusion protein was correctly targeted to thylakoid membranas, whereas the N-terminal region was not sufficient to correctly deliver GFP to thylakoids. In contrast, for FtsH2, which carries the classical twin-arginine motif, we found that targeting can be mediated by the N-terminal region alone. Our data indicate that the targeting determinants for FtsH vary in the different classes. The requirement of the e-terminal domain for the targeting of FtsH5 suggests the existence of an unusual targeting pathway.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSilva Filho, M´rcio de CastroBorgonove, Camila Motta2008-08-29info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20200111-153501/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2020-01-12T04:04:02Zoai:teses.usp.br:tde-20200111-153501Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212020-01-12T04:04:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
Characterization of the mechanisms the targeting of FtsH to the thylakoids membrane
title Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
spellingShingle Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
Borgonove, Camila Motta
ARGININA
CIANOBACTÉRIAS
CLOROPLASTOS
GENÔMICA
PROTEÍNAS DA MEMBRANA
TILACOIDES
title_short Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
title_full Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
title_fullStr Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
title_full_unstemmed Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
title_sort Caracterização dos mecanismos de direcionamento das FtsHs às membranas dos tilacóides
author Borgonove, Camila Motta
author_facet Borgonove, Camila Motta
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Silva Filho, M´rcio de Castro
dc.contributor.author.fl_str_mv Borgonove, Camila Motta
dc.subject.por.fl_str_mv ARGININA
CIANOBACTÉRIAS
CLOROPLASTOS
GENÔMICA
PROTEÍNAS DA MEMBRANA
TILACOIDES
topic ARGININA
CIANOBACTÉRIAS
CLOROPLASTOS
GENÔMICA
PROTEÍNAS DA MEMBRANA
TILACOIDES
description O motivo de dupla arginina na região amino-terminal é uma característica das proteínas direcionadas pela via Tat. O direcionamento das proteases cloroplastidiais do tipo FtsH (cpFtsH) que contém motivo característico mostrou ser dependente de componentes da maquinaria de translocação T at. Contudo, análises genômicas mostraram que as proteínas FtsHs de plantas e cianobactérias podem ser separadas em três clados distintos. O primeiro grupo contém o motivo RR na região N-terminal, próximo ao primeiro segmento transmembrana. Os outros dois grupos não apresentam um motivo de dupla arginima apesar de terem duas argininas consecutivas encontradas na região lumenal que liga os dois domínios transmembranas. A FtsH5, uma protease que pertence ao terceiro grupo e uma série de construções envolvendo deleções na região e-terminal deste gene foram fusionados à GFP e usadas para avaliar os determinantes estruturais responsáveis pelo direcionamento da proteína para os tilacóides. Nossos resultados mostram que a proteína FtsH5 completa fusionada à GFP é corretamente direcionada para a membrana dos tilacóides, porém a região N-terminal não é suficiente para transportar a proteína GFP corretamente. Estes resultados são contrastantes com os dados obtidos para a proteína FtsH2, que apresenta o motivo clássico de dupla arginina, no qual o direcionamento pode ser mediado apenas pela região N-terminal. Nossos dados indicam que os determinantes para o direcionamento das FtsHs variam nos diferentes grupos. O requerimento da região e-terminal para o direcionamento da FtsH5 sugere a existência de um mecanismo de transporte alternativo.
publishDate 2008
dc.date.none.fl_str_mv 2008-08-29
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20200111-153501/
url https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20200111-153501/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1809090921729359872