Avaliação da ativação do inflamassoma no contexto da infecção por HPV e do câncer cervical associado ao HPV 

• Autor(a) principal: Fernanda Pereira Fernandes
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://doi.org/10.11606/D.5.2020.tde-01072021-115731

Introdução: A contribuição do inflammasoma e das suas citocinas (IL-1beta, IL-18) na infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) e no Câncer Cervical(CC) associado ao HPV (HPV-CC) não esta ainda totalmente esclarecida. A infecção in vitro do HPV leva a inibição da produção de IL-1beta em queratinocitos primários. Por outro lado, estudos de associação genética e da produção de IL-1beta e/ou IL-18 mostram uma correlação positiva com à progressão do CC. A partir dos dados obtidos em um estudo de associação genética em uma coorte de mulheres com HPV-CC que apontava para IL- 1beta como fator de risco para o desenvolvimento do CC, propomos aqui aprofundar este achado. Objetivo: Investigar a contribuição do inflamassoma no microambiente tumoral do HPV-CC. Materiais e métodos: Um estudo de associação genética para as variantes do inflamassoma foi replicado em uma nova coorte de 107 mulheres com HPV-CC utilizando sondas alelo-espcificas e qPCR. Uma análise de expressão gênica foi realizada utilizando dados de tecido de cérvix uterino tumoral e normal procedentes de bancos públicos (TCGA, GTEX). Linhagens celulares de tumor cervical (C33-A, SiHa e HeLa) e monócitos derivados de sangue periférico de 39 doadores saudáveis foram cultivados isoladamente e em conjunto (ensaio de co-cultivo). A ativação do inflamassoma foi avaliada de modo indireto através da produção de IL-1beta e IL-18 medida no sobrenadante de cultura por ELISA. Inibidores específicos do inflamassoma foram utilizados em alguns ensaios. Resultados: A análise genética demonstrou mais uma vez a associação entre a variante rs16944 (que leva a aumento de IL-1beta) assim como uma maior expressão do gene IL1B e um maior risco de desenvolver HPV-CC e de um pior prognostico, respectivamente. Os dados obtidos nos ensaios de co-cultivo revelaram que, apenas no modelo de cultivo das linhagens celulares de CC em esferoides (não em monocamada), as células tumorais não produzem IL-1beta, mas induzem a ativação do inflamassoma e a liberação de IL-1beta em monócitos. Esta ativação é pelo menos parcialmente dependente do receptor do inflamassoma NLRP3. Conclusão: Pela primeira vez, ao nosso conhecimento, demonstramos que o aumento de IL-1beta observado na progressão do CC, é possivelmente devido a indução da ativação do NLRP3 inflamassoma das células tumorais nos monócitos do microambiente. Portanto, tanto NLRP3 quanto IL-1beta podem ser considerados como possíveis alvos para novas abordagens terapêuticas