Mecanismos moleculares associados à citocina FAM3B/PANDER nos processos de invasão e migração no câncer de mama

• Autor(a) principal: Caldeira, Izabela Daniel Sardinha
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/100/100142/tde-07122022-120837/
• topic: Breast cancer; Câncer de mama; FAM3B/PANDER; FAM3B/PANDER; Metástase; Metastasis

FAM3B/PANDER (PANcreatic-DERived factor) é uma proteína secretada que foi amplamente estudada em diferentes condições patológicas, como diabetes tipo 2, síndrome metabólica e vários tipos de câncer. No câncer de cólon, próstata e esôfago, o FAM3B inibe a morte celular, aumenta as taxas de migração celular in vitro e promove o crescimento tumoral e a indução de metástases in vivo. Nossos resultados anteriores mostraram que FAM3B inibe a morte em células de câncer de mama e promove aumento da massa tumoral e indução de metástase in vivo. Neste trabalho avaliamos o papel da proteína FAM3B nos processos de invasão e migração no câncer de mama, através de análises in silico usando ferramentas de bioinformática e ensaios in vitro mediante a superexpressão do gene nas linhagens tumorais de mama MDA-MB-231 e MCF-7. Os dados de expressão de pacientes com câncer de mama foram acessados do Atlas do Genoma do Câncer (TAGC) e analisados usando ferramentas de bioinformática de forma remota pelo portal AUCAN e de forma local usando o FirebrowseR. As células MDA-MB-231 e MCF-7 foram transfectadas com vetor plasmidial contendo o cDNA de FAM3B. Ensaios de cicatrização da ferida foram usados para avaliar a migração celular in vitro. A expressão de genes envolvidos na migração e na invasão tumoral foi avaliada por qPCR em tempo real e western blot nos níveis de mRNA e proteína, respectivamente. Na análise por bioinformática observamos que não há diferenças de expressão de FAM3B entre os diversos estágios e subtipos de tumores de mama disponíveis no TACG. Por outro lado, as análises de correlação apontam que a expressão de FAM3B estaria associada a padrões antitumorais nos subtipos menos agressivos (hormônio-responsivos) e nos primeiros estágios da doença e a padrões mais metastáticos nos estágios mais avançados e subtipos mais agressivos (triplo negativo/basal-like). Nos ensaios experimentais, células que superexpressam FAM3B apresentaram uma taxa de migração celular aumentada, quando comparadas ao controle, sugerindo um possível mecanismo responsável pela invasão tumoral. Esse processo foi acompanhado pela expressão aumentada de genes envolvidos na EMT e metástases, como Slug, Snail, TGFBR2, vimentina, N-caderina, MMP-2, MMP-9 e MMP-14 em níveis de mRNA e proteína. Nossos resultados apresentam novas evidências sobre o papel do FAM3B na progressão tumoral e sugerem que o FAM3B pode ser um possível marcador de diagnóstico e um alvo molecular promissor para o tratamento do câncer de mama