Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória.
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2008 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
Texto Completo: | http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-07012009-172622/ |
Resumo: | A transformação de Aspergillus nidulans, com RNA de macrófagos de ratos, resultou na linhagem RT2, produtora de uma glicoproteína antiinflamatória. Nosso objetivo foi avaliar esta linhagem genenomicamente e caracterizar esta glicoproteína quanto à natureza bioquímica e sua atividade. Para tal, foi realizado RAPD e análise fenotípica desta linhagem. A Nandina foi purificada e submetida à espectrometria de massa para sequenciamento e identificação dos carboidratos. Testes da atividade antiinflamatória in vivo foram realizados em peritonite e edema de pata e inibição dos receptores de glicocorticóides. Os testes in vitro, sobre a produção das COXs e de PGE2, foram realizados em cultura de macrófagos. Os resultados mostraram que a linhagem RT2 é resultante da UT448, mas contém diferenças em seu genoma. A proteína purificada possui 40KDa. A espectrometria de massa caracterizou dois fragmentos da proteína e sua glicosilação. Os testes in vivo mostraram que a proteína inibe o edema e o influxo leucocitário e que esta atividade não é dependente de glicocorticóides, mas sim da inibição in vitro de COX-2, mas não de COX-1 e nem de PGE2. |
id |
USP_f8e1fae8193e79f7fcae541ea97cec33 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:teses.usp.br:tde-07012009-172622 |
network_acronym_str |
USP |
network_name_str |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
repository_id_str |
2721 |
spelling |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória.Genotypic analysis of Aspergillus nidulans RT2 strain and characterization of its antiinflammatory glycoprotein.Aspergillus nidulansAspergillus nidulansAntiinflamatórioAntiinflammatoryCOX-2COX-2GlicoproteínaGlycoproteinNandinNandinaA transformação de Aspergillus nidulans, com RNA de macrófagos de ratos, resultou na linhagem RT2, produtora de uma glicoproteína antiinflamatória. Nosso objetivo foi avaliar esta linhagem genenomicamente e caracterizar esta glicoproteína quanto à natureza bioquímica e sua atividade. Para tal, foi realizado RAPD e análise fenotípica desta linhagem. A Nandina foi purificada e submetida à espectrometria de massa para sequenciamento e identificação dos carboidratos. Testes da atividade antiinflamatória in vivo foram realizados em peritonite e edema de pata e inibição dos receptores de glicocorticóides. Os testes in vitro, sobre a produção das COXs e de PGE2, foram realizados em cultura de macrófagos. Os resultados mostraram que a linhagem RT2 é resultante da UT448, mas contém diferenças em seu genoma. A proteína purificada possui 40KDa. A espectrometria de massa caracterizou dois fragmentos da proteína e sua glicosilação. Os testes in vivo mostraram que a proteína inibe o edema e o influxo leucocitário e que esta atividade não é dependente de glicocorticóides, mas sim da inibição in vitro de COX-2, mas não de COX-1 e nem de PGE2.Aspergillus nidulans transformation with rat macrophage RNA results on RT2 strain, producer of an antiinflammatory glycoprotein. Our objective was to evaluate this strain genomically and characterize biochemically and activity of its glycoprotein. To this, RAPD and fenotipical analysis were performed. The Nandin was purified and mass spectrometry analyzed to sequencing and carbohydrates analysis. Antiinflammatory activity testes in vivo in peritonitis and edema, and glucocorticoid receptors inhibition were performed. The in vitro testes, over expression and activity of COXs and PGE2, were performed in macrophage culture. The results show that RT2 strain came from UT448, but have genomics differences. The purified glycoprotein has been 40KDa. The mass spectrometry sequenced two protein fragments and showed that glycosylation. The in vivo testes showed that the glycoprotein has antiinflammatory activity inhibiting the edema and leukocyte influx. The RU38486 experiments evidenced that activity is not glucocorticoid receptors dependent, but in vivo inhibition of COX-2, but not COX-1 neither its product PGE2.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPZucchi, Tania Maria Araujo DominguesQueiroz, Jean Cesar Farias de2008-02-22info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-07012009-172622/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2016-07-28T16:09:57Zoai:teses.usp.br:tde-07012009-172622Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212016-07-28T16:09:57Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
dc.title.none.fl_str_mv |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. Genotypic analysis of Aspergillus nidulans RT2 strain and characterization of its antiinflammatory glycoprotein. |
title |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. |
spellingShingle |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. Queiroz, Jean Cesar Farias de Aspergillus nidulans Aspergillus nidulans Antiinflamatório Antiinflammatory COX-2 COX-2 Glicoproteína Glycoprotein Nandin Nandina |
title_short |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. |
title_full |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. |
title_fullStr |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. |
title_full_unstemmed |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. |
title_sort |
Análise genotípica da linhagem RT2 de Aspergillus nidulans e caracterização de sua glicoproteína antiinflamatória. |
author |
Queiroz, Jean Cesar Farias de |
author_facet |
Queiroz, Jean Cesar Farias de |
author_role |
author |
dc.contributor.none.fl_str_mv |
Zucchi, Tania Maria Araujo Domingues |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Queiroz, Jean Cesar Farias de |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Aspergillus nidulans Aspergillus nidulans Antiinflamatório Antiinflammatory COX-2 COX-2 Glicoproteína Glycoprotein Nandin Nandina |
topic |
Aspergillus nidulans Aspergillus nidulans Antiinflamatório Antiinflammatory COX-2 COX-2 Glicoproteína Glycoprotein Nandin Nandina |
description |
A transformação de Aspergillus nidulans, com RNA de macrófagos de ratos, resultou na linhagem RT2, produtora de uma glicoproteína antiinflamatória. Nosso objetivo foi avaliar esta linhagem genenomicamente e caracterizar esta glicoproteína quanto à natureza bioquímica e sua atividade. Para tal, foi realizado RAPD e análise fenotípica desta linhagem. A Nandina foi purificada e submetida à espectrometria de massa para sequenciamento e identificação dos carboidratos. Testes da atividade antiinflamatória in vivo foram realizados em peritonite e edema de pata e inibição dos receptores de glicocorticóides. Os testes in vitro, sobre a produção das COXs e de PGE2, foram realizados em cultura de macrófagos. Os resultados mostraram que a linhagem RT2 é resultante da UT448, mas contém diferenças em seu genoma. A proteína purificada possui 40KDa. A espectrometria de massa caracterizou dois fragmentos da proteína e sua glicosilação. Os testes in vivo mostraram que a proteína inibe o edema e o influxo leucocitário e que esta atividade não é dependente de glicocorticóides, mas sim da inibição in vitro de COX-2, mas não de COX-1 e nem de PGE2. |
publishDate |
2008 |
dc.date.none.fl_str_mv |
2008-02-22 |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
format |
doctoralThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-07012009-172622/ |
url |
http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-07012009-172622/ |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.relation.none.fl_str_mv |
|
dc.rights.driver.fl_str_mv |
Liberar o conteúdo para acesso público. info:eu-repo/semantics/openAccess |
rights_invalid_str_mv |
Liberar o conteúdo para acesso público. |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.coverage.none.fl_str_mv |
|
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP |
publisher.none.fl_str_mv |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP instname:Universidade de São Paulo (USP) instacron:USP |
instname_str |
Universidade de São Paulo (USP) |
instacron_str |
USP |
institution |
USP |
reponame_str |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
collection |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
repository.name.fl_str_mv |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP) |
repository.mail.fl_str_mv |
virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br |
_version_ |
1815256736363184128 |