Mapeamento físico dos genes ribossomais 5S e 18S em diferentes populações de Astyanax bimaculatus (Characiformes, Characidae)
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT)) |
Texto Completo: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/15649 |
Resumo: | O mapeamento físico, por hibridização in situ fluorescente (FISH), dos genes ribossomais 5S e 18S vem sendo utilizado com grande frequência em estudos citogenéticos de peixes neotropicais por auxiliar na resolução de problemas de ordem taxonômica, biogeográfica e filogenética. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo realizar um mapeamento físico por FISH dos genes ribossomais 5S e 18S em populações de Astyanax bimaculatus oriundas de tributários e de pisciculturas da região de influência do Lago de Itaipú, região de Santa Helena - PR. Os espécimes foram coletados com auxílio de redes e tarrafas, e transportados vivos para o Laboratório de Ictiologia e Limnologia da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus Santa Helena, onde foram mantidos em aquários até serem eutanasiados para obtenção da suspensão celular. Para a preparação e obtenção de cromossomos mitóticos foi utilizada a técnica de tratamento “in vitro”, que consiste na obtenção de metáfases mitóticas a partir de fragmentos do rim cefálico, uma vez que este possui função hematopoiética. Os cístrons de rDNA 5S e de rDNA 18S nos cromossomos foram mapeados usando dupla hibridização in situ fluorescente (Double-FISH), sob estringência de 77%. Foram observadas marcações simples de rDNA 5S na população da Piscicultura Santa Helena, Córrego São Gabriel e Piscicultura Cerâmica na posição pericentromérica do par metacêntrico 3, na população do Córrego Sanepar foram evidenciadas marcações de rDNA 5S na posição pericentromérica do par metacêntrico 3 e na posição pericentromérica do par subtelocêntrico 18. As marcações por sonda de rDNA 18S revelaram marcações nas regiões terminais do braço curto do par subtelocêntrico 18 das populações Piscicultura Cerâmica, Córrego Sanepar e Córrego São Gabriel. Na população Piscicultura Santa Helena, os cístrons foram encontrados na região terminal do braço curto do par subtelocêntrico 15. Na População do Córrego Sanepar houve uma sobreposição dos cístrons na posição terminal do braço curto do par subtelocêntrico 18. Os resultados revelaram que o rDNA 5S, é um excelente marcador genético para Astyanax porém novas análises devem ser realizadas para confirmar se as variações encontradas referem-se à polimorfismos populacionais ou tratam-se de características de unidades biológicas distintas, visto que A. bimaculatus é considerado um complexo de espécies. |
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2020-11-19T11:53:30Z2020-11-19T11:53:30Z2019-06-26LIRA, Natália Lima. Mapeamento físico dos genes ribossomais 5S e 18S em diferentes populações de Astyanax bimaculatus (Characiformes, Characidae). 2019. Trabalho de Conclusão de Curso (Licenciatura em Ciências Biológicas) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Santa Helena, 2019.http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/15649O mapeamento físico, por hibridização in situ fluorescente (FISH), dos genes ribossomais 5S e 18S vem sendo utilizado com grande frequência em estudos citogenéticos de peixes neotropicais por auxiliar na resolução de problemas de ordem taxonômica, biogeográfica e filogenética. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo realizar um mapeamento físico por FISH dos genes ribossomais 5S e 18S em populações de Astyanax bimaculatus oriundas de tributários e de pisciculturas da região de influência do Lago de Itaipú, região de Santa Helena - PR. Os espécimes foram coletados com auxílio de redes e tarrafas, e transportados vivos para o Laboratório de Ictiologia e Limnologia da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus Santa Helena, onde foram mantidos em aquários até serem eutanasiados para obtenção da suspensão celular. Para a preparação e obtenção de cromossomos mitóticos foi utilizada a técnica de tratamento “in vitro”, que consiste na obtenção de metáfases mitóticas a partir de fragmentos do rim cefálico, uma vez que este possui função hematopoiética. Os cístrons de rDNA 5S e de rDNA 18S nos cromossomos foram mapeados usando dupla hibridização in situ fluorescente (Double-FISH), sob estringência de 77%. Foram observadas marcações simples de rDNA 5S na população da Piscicultura Santa Helena, Córrego São Gabriel e Piscicultura Cerâmica na posição pericentromérica do par metacêntrico 3, na população do Córrego Sanepar foram evidenciadas marcações de rDNA 5S na posição pericentromérica do par metacêntrico 3 e na posição pericentromérica do par subtelocêntrico 18. As marcações por sonda de rDNA 18S revelaram marcações nas regiões terminais do braço curto do par subtelocêntrico 18 das populações Piscicultura Cerâmica, Córrego Sanepar e Córrego São Gabriel. Na população Piscicultura Santa Helena, os cístrons foram encontrados na região terminal do braço curto do par subtelocêntrico 15. Na População do Córrego Sanepar houve uma sobreposição dos cístrons na posição terminal do braço curto do par subtelocêntrico 18. Os resultados revelaram que o rDNA 5S, é um excelente marcador genético para Astyanax porém novas análises devem ser realizadas para confirmar se as variações encontradas referem-se à polimorfismos populacionais ou tratam-se de características de unidades biológicas distintas, visto que A. bimaculatus é considerado um complexo de espécies.The physical mapping by fluorescent in situ hybridization (FISH) of 5S and 18S ribosomal genes has been used with great frequency in cytogenetic studies of Neotropical fishes, to assist in the resolution of taxonomic, biogeographic and phylogenetic problems. In this way, the present work aimed to carry out a physical mapping by FISH of 5S and 18S ribosomal genes in populations of Astyanax bimaculatus from tributaries and piscicultures of the region of influence of Itaipú Lake, region of Santa Helena - PR. The specimens were collected with the aid of nets and containers, and transported alive to the Laboratory of Ichthyology and Limnology of the Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Santa Helena Campus, where they were kept in aquariums until they were euthanized to obtain the cellular suspension. For the preparation and obtaining of mitotic chromosomes, the technique of "in vitro" treatment was used, which consists in obtaining mitotic metaphases from fragments of the cephalic kidney, since this one has hematopoietic function. The cistrons of 5S rDNA and 18S rDNA were mapped on chromosomes using double fluorescence in situ hybridization (Double-FISH), under 77% stringency. Simple 5S rDNA markings were observed in the population of Santa Helena, Córrego São Gabriel and Piscicultura Cerâmica, in the pericentromeric position of the metacentric pair 3. In the population of Córrego Sanepar 5S rDNA markings were evidenced in the pericentromeric position of metacentric pair 3 and subtelocentric pair 18. The 18S rDNA probe tags revealed markings in the terminal regions of the short arm of the subtelocentric pair 18 of the populations Piscicultura Cerâmica, Córrego Sanepar and Córrego São Gabriel. In the population Piscicultura Santa Helena, in the terminal region of the short arm of the subtelocentric pair 15. In the Córrego Sanepar population there was an overlap of the cistrons in the terminal position of the short arm of the subtelocentric pair 18. The results revealed that the 5S rDNA is an excellent genetic marker for Astyanax but new analyzes should be carried out to confirm if the variations found refer to the population polymorphisms or they are characteristics of distinct biological units, since A. bimaculatus is considered a complex of species.Conselho Nacional do Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)porUniversidade Tecnológica Federal do ParanáSanta HelenaLicenciatura em Ciências BiológicasUTFPRBrasilCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASPeixes de água doceCromossomosLagosFreshwater fishesChromosomesLakesMapeamento físico dos genes ribossomais 5S e 18S em diferentes populações de Astyanax bimaculatus (Characiformes, Characidae)Physical mapping of 5S and 18S ribosomal genes in different populations of Astyanax bimaculatus (Characiformes, Characidae)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisSanta HelenaBlanco, Daniel RodriguesBrandão, HelenoSilva, Vanessa Bueno daBlanco, Daniel RodriguesLira, Natália Limainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))instname:Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR)instacron:UTFPRORIGINALSH_COBIO_2019.1_05.pdfapplication/pdf2108828http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/15649/1/SH_COBIO_2019.1_05.pdf36f72926c25d760f8ca710b81da3a99bMD51LICENSElicense.txttext/plain1290http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/15649/2/license.txtb9d82215ab23456fa2d8b49c5df1b95bMD52TEXTSH_COBIO_2019.1_05.pdf.txtExtracted texttext/plain62246http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/15649/3/SH_COBIO_2019.1_05.pdf.txta7ea551dc529c9094c2ea594a756de65MD53THUMBNAILSH_COBIO_2019.1_05.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1310http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/15649/4/SH_COBIO_2019.1_05.pdf.jpg11ddc5eb263fe7d7d31e4f5fd8fb0e71MD541/156492020-11-19 09:53:30.556oai:repositorio.utfpr.edu.br:1/15649TmEgcXVhbGlkYWRlIGRlIHRpdHVsYXIgZG9zIGRpcmVpdG9zIGRlIGF1dG9yIGRhIHB1YmxpY2HDp8OjbywgYXV0b3Jpem8gYSBVVEZQUiBhIHZlaWN1bGFyLCAKYXRyYXbDqXMgZG8gUG9ydGFsIGRlIEluZm9ybWHDp8OjbyBlbSBBY2Vzc28gQWJlcnRvIChQSUFBKSBlIGRvcyBDYXTDoWxvZ29zIGRhcyBCaWJsaW90ZWNhcyAKZGVzdGEgSW5zdGl0dWnDp8Ojbywgc2VtIHJlc3NhcmNpbWVudG8gZG9zIGRpcmVpdG9zIGF1dG9yYWlzLCBkZSBhY29yZG8gY29tIGEgTGVpIG5vIDkuNjEwLzk4LCAKbyB0ZXh0byBkZXN0YSBvYnJhLCBvYnNlcnZhbmRvIGFzIGNvbmRpw6fDtWVzIGRlIGRpc3BvbmliaWxpemHDp8OjbyByZWdpc3RyYWRhcyBubyBpdGVtIDQgZG8gCuKAnFRlcm1vIGRlIEF1dG9yaXphw6fDo28gcGFyYSBQdWJsaWNhw6fDo28gZGUgVHJhYmFsaG9zIGRlIENvbmNsdXPDo28gZGUgQ3Vyc28gZGUgR3JhZHVhw6fDo28gZSAKRXNwZWNpYWxpemHDp8OjbywgRGlzc2VydGHDp8O1ZXMgZSBUZXNlcyBubyBQb3J0YWwgZGUgSW5mb3JtYcOnw6NvIGUgbm9zIENhdMOhbG9nb3MgRWxldHLDtG5pY29zIGRvIApTaXN0ZW1hIGRlIEJpYmxpb3RlY2FzIGRhIFVURlBS4oCdLCBwYXJhIGZpbnMgZGUgbGVpdHVyYSwgaW1wcmVzc8OjbyBlL291IGRvd25sb2FkLCB2aXNhbmRvIGEgCmRpdnVsZ2HDp8OjbyBkYSBwcm9kdcOnw6NvIGNpZW50w61maWNhIGJyYXNpbGVpcmEuCgogIEFzIHZpYXMgb3JpZ2luYWlzIGUgYXNzaW5hZGFzIHBlbG8ocykgYXV0b3IoZXMpIGRvIOKAnFRlcm1vIGRlIEF1dG9yaXphw6fDo28gcGFyYSBQdWJsaWNhw6fDo28gZGUgClRyYWJhbGhvcyBkZSBDb25jbHVzw6NvIGRlIEN1cnNvIGRlIEdyYWR1YcOnw6NvIGUgRXNwZWNpYWxpemHDp8OjbywgRGlzc2VydGHDp8O1ZXMgZSBUZXNlcyBubyBQb3J0YWwgCmRlIEluZm9ybWHDp8OjbyBlIG5vcyBDYXTDoWxvZ29zIEVsZXRyw7RuaWNvcyBkbyBTaXN0ZW1hIGRlIEJpYmxpb3RlY2FzIGRhIFVURlBS4oCdIGUgZGEg4oCcRGVjbGFyYcOnw6NvIApkZSBBdXRvcmlh4oCdIGVuY29udHJhbS1zZSBhcnF1aXZhZGFzIG5hIEJpYmxpb3RlY2EgZG8gQ8OibXB1cyBubyBxdWFsIG8gdHJhYmFsaG8gZm9pIGRlZmVuZGlkby4gCk5vIGNhc28gZGUgcHVibGljYcOnw7VlcyBkZSBhdXRvcmlhIGNvbGV0aXZhIGUgbXVsdGljw6JtcHVzLCBvcyBkb2N1bWVudG9zIGZpY2Fyw6NvIHNvYiBndWFyZGEgZGEgCkJpYmxpb3RlY2EgY29tIGEgcXVhbCBvIOKAnHByaW1laXJvIGF1dG9y4oCdIHBvc3N1YSB2w61uY3Vsby4KRepositório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.utfpr.edu.br:8080/oai/requestopendoar:2020-11-19T11:53:30Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT)) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR)false |
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