Patogenicidade de bacillus thuringiensis sobre chrysodeixis includens Walker, 1857 (lepidoptera: noctuidae)

• Autor(a) principal: Sampaio, Amanda Roberta
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/10685
• topic: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIA; Insetos nocivos - Controle biológico; Lagartas; Bacillus thuringiensis; Insect pests - Biological control; Caterpillars

O controle biológico tem ganhado destaque em pesquisas por ser um meio natural de diminuir populações de insetos-praga, sobretudo com a utilização da bactéria Bacillus thuringiensis (Bt). Logo, é considerado uma estratégia ecologicamente correta por controlar as espécies alvo, na maioria das vezes com eficácia, não agredindo a natureza e sendo mais seletiva às populações não alvo. Uma das pragas de grande importância na cultura da soja e hortaliças é Chrysodeixis includens Walker, 1857 (Lepidoptera: Noctuidae), popularmente conhecida como lagarta falsa-medideira, considerada de difícil controle. Nesse contexto, a pesquisa por estratégias de controle para C. includens, se faz necessário, assim como a condução de estudos de base para o desenvolvimento de novos produtos. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi identificar molecularmente e avaliar a patogenicidadede linhagens de B.thuringiensis, isoladas do solo, sobre C. includens. As amostras de solo para o isolamento de Bt foram coletados em diferentes pontos da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus Dois Vizinhos/PR. Estas linhagens foram mantidas refrigeradas em placas de Petri com meio de cultura ágar-nutriente e repicadas periodicamente. Antes da avaliação de patogenicidade foi feita uma pré-seleção das linhagens por meio de análise molecular, identificando a presença dos genes cry1 e cry2, utilizando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction - Reação da Polimerase em Cadeia), onde foi possível selecionar cinco amostras que possuem os dois genes, sendo essas as testadas nos bioensaios com C. includens. As cinco linhagens foram quantificadas e posteriormente foi realizada a contagem de esporos viáveis pela técnica da “microgota”, para a determinação dos esporos viáveis ajustando a concentração de UFC utilizada nos bioensaios, que ficou na ordem de 108 ou 107. Foram micropipetados 50 μL do cultivo de cada linhagem de B. thuringiensis, sobre superfície da dieta artificial para C. includens, previamente distribuída em placas de cultivo de células com 12 poços, onde colocou-se um inseto por poço, utilizando cinco placas por tratamento (n= 60 insetos). A avaliação foi realizada com 12, 24, 48 e 72 horas após o início do bioensaio, quantificando-se o número de lagartas mortas. Quatorze linhagens de Bt já isoladas das amostras de solo da UTFPR foram submetidas as análises molecular, das quais apenas cinco apresentaram os genes cry1 e cry2 (EM41P, PR31P, FR31P, RR14P e PR11P). As cinco linhagens selecionadas causaram mortalidade que variou de 85% a 100% em larvas de segundo ínstar de C. includens, ao final de 72 horas de avaliação, não diferindo significativamente da testemunha positiva. Tais resultados indicam um elevado potencial bioinseticida das novas linhagens identificadas.Durante todo o período de avaliação as linhagens causaram mortalidades semelhantes as Dipel WP, não diferindo estatisticamente deste, com exceção da linhagem PR11P, que na avaliação de mortalidade realizada com 12 horas obteve diferença significativa quando comparada ao Dipel WP. Onze das quatorze linhagens isoladas do solo da UTFPR - Câmpus Dois Vizinhos possuem o gene cry2. Cinco delas também tiveram resultado positivo para a amplificação do gene cry1 e estas, testadas em bioensaios mostraram elevado potencial no controle de Chrysodeixis includens.