Otimização da produção de lacase pelo Pleurotus ostreatus na presença de lignina e análise de metabólitos por CLAE

• Autor(a) principal: Franco, Paula Consoli Ireno
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/4722
• topic: CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA SANITARIA; Lacase; Fungos; Pleurotus ostreatus; Lignina; Biodegradação; Compostos aromáticos; Laccase; Fungi; Lignin; Biodegradation; Aromatic compounds; Engenharia/Tecnologia/Gestão

O desenvolvimento de novos processos biotecnológicos se faz necessário para agregar valor à lignina, que é um biopolímero natural e renovável, presente na parede celular das plantas, e constituído por resíduos de compostos aromáticos e fenólicos. Fungos decompositores de madeira, tanto basidiomicetos como ascomicetos são produtores de enzimas ligninolíticas, que catalisam a degradação da lignina através de despolimerização oxidativa. A biodegradação da lignina em seus compostos constituintes agrega valor a ela, porque diferentes produtos são úteis para várias indústrias. Neste trabalho os fungos Botryosphaeria. ribis, Ganoderma lucidum e uma cepa de Pleurotus ostreatus Florida foram avaliados como produtores de lacase, visando selecionar o melhor produtor desta polifenol oxidase, a qual é uma enzima ligninolítica, que colabora na biodegradação da lignina. O P. ostreatus produziu os maiores títulos de lacase, e foi selecionado para otimizar a produção desta enzima por um planejamento estatístico fatorial 3 3, avaliando-se as variáveis: concentração de lignina (0 a 0,25 % m/v); concentração de extrato de levedura (0 a 4 % m/v) e tempo de cultivo (4 a 10 dias). A lignina foi a principal variável que estimulou a produção de lacase, quando a atividade foi determinada com 2,6-dimetoxifenol (DMP) como substrato. O ótimo da produção de lacase (5,73 U/mL) foi obtido utilizando-se 0,87 g% m/v de lignina e 4,5 g% m/v de extrato de levedura, em 10 dias de cultivo. O extrato livre de células (ELC), obtido após o cultivo do fungo, nas condições otimizadas foi tratado por partição líquidolíquido com acetato de etila, para a determinação dos produtos de degradação da lignina por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O procedimento de extração líquido-líquido foi validado usando padrões analíticos. Os produtos de degradação da lignina foram analisados por CLAE e mostrou picos desconhecidos. As analises nos comprimentos de onda na faixa do UV (220, 272 e 309 nm) avaliados, mostraram a presença de vários picos e as amostras estão sendo identificadas.