Otimização de diagnóstico molecular para soja geneticamente modificada

• Autor(a) principal: Miranda, Robson Rodrigo
• Data de Publicação: 2011
• Outros Autores: Boreiko, Sheila
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/16658
• topic: Tecnologia em Alimentos; Soja - Melhoramento genético; Reação em cadeia de polimerase; Soybean - Breeding; Polymerase chain reaction

Segundo a legislação brasileira, todo produto com mais de 1% de matéria-prima geneticamente modificada deve informar sua condição de produto transgênico no rótulo (Decreto-Lei nº 4.680 de 2003). Atualmente a soja transgênica é a semente de soja mais comercializada no mundo, e seus grãos podem ser utilizados como matéria-prima para uma série de alimentos destinados ao consumo humano, que vão desde o óleo vegetal obtido na moagem inicial das sementes, até a posterior utilização destes mesmos grãos como fontes protéicas em alimentos processados. O objetivo deste estudo foi adaptar uma tecnologia de detecção molecular de soja geneticamente modificada, para utilização em trabalhos de verificação da presença de seus resíduos em produtos alimentícios empregando técnicas moleculares baseadas em PCR. A extração de DNA das amostras do tecido foliar e de farinha de soja transgênica foi realizada seguindo protocolo publicado por Mazza e Bittencourt (2000), com ligeiras modificações, sendo realizada a avaliação de duas réplicas independentes de cada um dos materiais analisados. As reações de PCR foram conduzidas seguindo as recomendações de Tsai et al., (2010), que recomenda a adição de alguns ciclos de PCR no modo “touch-down” para reduzir o efeito da especificidade da temperatura de anelamento entre equipamentos e reagentes de diferentes fabricantes. Foram utilizadas nas reações de PCR primers capazes de identificar a presença do promotor 35S que corresponde a um fragmento de 195 pb específico do transgene existente na em soja e milho. A verificação de soja GM em farinha de soja foi realizada a partir da comparação com um padrão de identificação positivo, estabelecido a partir do tecido foliar de soja transgênica. O fragmento do gene obtido pela técnica de PCR foi de 195 pb tanto para as amostras de DNA isolado a partir do tecido foliar de soja quanto para as amostras de DNA isoladas a partir de farinha de soja, indicando que as duas réplicas dos dois tipos de amostras avaliadas são de origem transgênica. Estes resultados indicam que apesar dos diferentes tratamentos e condições adversas pelos quais os grãos de soja são submetidos até transformação do grão em farinha de soja, é possível realizar a verificação de soja transgênica na cadeia produtiva.