Biotransformação do inseticida Flubendiamida por fungos de solo e Lacase: análise dos metabólitos por espectrometria de massas (LC-MS/MS)

• Autor(a) principal: Yada Junior, George Mitsuo
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/1903
• topic: CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA SANITARIA; Pesticidas - Aspectos ambientais; Espectrometria de massa; Fungos; Biodegradação; Pesticides - Environmental aspects; Mass spectrometry; Fungi; Biodegradation

O alto consumo de pesticidas no Brasil tem levado à preocupação pública sobre sua disposição, contaminação e acúmulo no ambiente. A flubendiamida, N2 - [1,1- dimethyl-2- (methylsulfonyl) ethyl] - 3- iodo-N1-[2-methyl- 4- [1,2,2,2-tetrafluoro-1-(trifluoromethyl) ethyl]phenyl]-1,2- benzenedicarboxamide, é um inseticida persistente ao meio ambiente (classe III) e também tóxico para os microcrustáceos. Diante disto, este trabalho teve como principais objetivos: selecionar fungos isolados de solo pelo teste de inibição de crescimento com inseticidas Actara e Belt; analisar os produtos da biotransformação do inseticida flubendiamida por fungos isolados do solo, pelo Botryosphaeria rhodina MAMB-05 e pela enzima lacase; e avaliar se os inseticidas Belt®, Actara® e o padrão flubendiamida da Bayer® atuam como indutores de lacase. O teste de inibição de crescimento foi realizado em meio sólido BDA com os fungos isolados de solo e com o B. rhodina. Este fungo e os que demonstraram melhores resultados de crescimento foram conduzidos ao experimento de biotransformação da flubendiamida, junto com o extrato de lacase do fungo B.rhodina. Os metabólitos foram avaliados por LC-MS/MS. A atividade lacase foi quantificada utilizando o ABTS como substrato. O resultado do teste de inibição destacou o crescimento dos fungos JUSOLCL039 e JUANT070, além do fungo B. rhodina MAMB-05. No experimento de biotransformação, foram detectados 47 metabólitos. Entre eles, a rota metabólica do íon m/z 587 obtida pelo fungo MAMB-05 foi proposta, através da perda do iodo e uma reação de hidroxilação. O metabólito m/z 663 foi encontrado no extrato do fungo JUANT070 e no extrato da enzima lacase. Sua rota metabólica foi proposta, indicando uma reação de desalogenação do flúor, confirmada pela espectrometria de massas em Tandem. O metabólito de íon m/z 697 foi formado pela reação de hidroxilação e identificado no extrato da enzima lacase. Os resultados do experimento de biotransformação apresentaram metabólitos formados pela enzima lacase e por outras enzimas presentes nos fungos JUANT070, JUSOLCL039 e B.rhodina. Estes fungos mostraram-se produtores constitutivos de lacase, na presença dos inseticidas Actara, Belt e no padrão analítico de flubendiamida. Entretanto, não demonstraram atuarem como indutores de lacase para os três fungos.