Estabelecimento de banco de linhagens celulares aplicadas a pesquisa científica e ensaios toxicológicos in vitro

• Autor(a) principal: Kuligovski, Crisciele
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/24680
• topic: CNPQ::ENGENHARIAS::ENGENHARIA BIOMEDICA; Cultura de células; Controle de qualidade; Micoplasma; Microbiologia - Cultura e meios de cultura; Células - Armazenamento; Cell culture; Quality control; Mycoplasma; Microbiology - Cultures and culture media; Cells - Storage; Engenharia Biomédica

O Instituto Carlos Chagas (ICC) é a unidade técnico-científica da FIOCRUZ que desenvolve pesquisa biomédica no Paraná. Dentre os diversos projetos de pesquisa e ensaios experimentais destacam-se aqueles que avaliam interação parasita-hospedeiro, produção de biomoléculas, ensaios de citotoxicidade incluindo o uso de métodos alternativos ao uso de animais, diferenciação de células-tronco, entre outros. Todas essas grandes áreas de conhecimento têm em comum o uso de cultivos celulares entre seus modelos de estudo. A fim de garantir a disponibilidade de cultivos celulares, treinamento de usuários e rastreabilidade do material biológico para os projetos de pesquisa, prestação de serviços e desenvolvimento tecnológico, o objetivo deste trabalho foi a implementação de um Banco de Linhagens Celulares do ICC – FIOCRUZ-PR seguindo um sistema de gestão e controle de qualidade. Para isso, foram aplicadas a ferramentas de gestão 5W2H e sistema 5S para fazer o diagnóstico inicial da estrutura e organização laboratorial e definir escopo de documentos e metodologias a serem implantadas. Seguiu-se a definição das linhagens celulares para estabelecimento dos Bancos de células Mestre e de trabalho de acordo com a demanda dos usuários. Foram estabelecidos bancos mestres e de trabalho para as linhagens celulares NHDF, V79-4, CHO K1, Balb/c 3T3, as quais foram submetidas aos ensaios de controle de qualidade, de viabilidade celular, teste para detecção de contaminação por micoplasma através da técnica Reação da Cadeia da Polimerase, coloração de DNA e por luminescência através de um kit comercial. Somente células com mais de 80% de viabilidade e que não apresentaram contaminação foram armazenadas no banco mestre e disponibilizadas aos pesquisadores através do banco de trabalho. Com esse trabalho foi possível rastrear as necessidades relativas à consolidação da estrutura laboratorial e documentação, elaborando e implementando o controle de procedimentos de segurança, treinamentos, registro e relatórios, entre outros documentos que garantam a rastreabilidade e confiabilidade dos dados. Desta forma, fortalecem-se os projetos de pesquisa e conferem maior reprodutibilidade aos resultados científicos.