A tecnologia CRISPR/Cas9 aplicada ao modelo biológico Drosophila melanogaster / CRISPR/Cas9 technology applied to the Drosophila melanogaster biological model

• Autor(a) principal: Costa, Matheus Araujo
• Data de Publicação: 2022
• Outros Autores: de Araújo, Edson Freitas, den Berg, Cássio van, Bastos, Cláudia Araújo
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: por
• Título da fonte: Revista Veras
• Texto Completo: https://ojs.brazilianjournals.com.br/ojs/index.php/BRJD/article/view/46666
• topic: edição genômica; técnica molecular; modelo biológico.

O CRISPR/Cas9 é um mecanismo de memória adaptativa bacteriano que se apresenta como uma das plataformas mais eficazes de edição genética, permitindo manipular de forma precisa qualquer sequência genômica. Ao longo de uma década foram feitas inúmeras publicações utilizando esta técnica em diversos modelos biológicos, com diferentes finalidades. A Drosophila melanogaster é um modelo biológico utilizado massivamente nos trabalhos na área da Genética e também tem sido alvo de interesse nos experimentos realizados com CRISPR/Cas9, justamente pelas características inerentes ao sucesso desse modelo biológico que conta com ciclo de vida curto, fenótipos facilmente observáveis, genoma pequeno e numerosos descendentes ao longo das gerações, o que permite avaliar facilmente os resultados de edição genômica promovido pela técnica. É apresentada uma revisão sistemática das publicações em inglês e português, no recorte temporal de 2010 a 2020, nas plataformas on-line: Science Direct e Microsoft Academic Search, buscando analisar as metodologias, genes alvo e singularidades dos protocolos apresentados afim de descrever um protocolo inicial de execução da técnica CRISPR-Cas9 em D. melanogaster. Foram encontrados 4181 artigos e filtrados 48 a partir de critérios estabelecidos para inclusão e exclusão. Os principais resultados encontrados conferem aos genes mais utilizados, fase de aplicação de microinjeção nas drosófilas, montagem do plasmídeo para edição gênica e pH específico para a solução da injeção. Conclui-se que a técnica ainda precisa ser aprimorada em estudos que visam múltiplos genes, sendo necessário reduzir a perspectiva de cortes fora do alvo genético de interesse e simplificação da construção do vetor de edição. No entanto, a montagem da técnica associada a simplicidade de manuseio em Drosophila mostra-se de coerente aplicabilidade em centros de pesquisa nacionais desde que as instituições atentem ao rigor ético necessário à tal manipulação.