Painel molecular para detecção de microrganismos associados à sepse

• Autor(a) principal: Ferreira,Leslie Ecker
• Data de Publicação: 2011
• Outros Autores: Dalposso,Karilene, Hackbarth,Bruna Barbosa, Gonçalves,Anderson R., Westphal,Glauco Adrieno, França,Paulo Henrique Condeixa de, Pinho,Mauro de Souza Leite
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: por
• Título da fonte: Revista brasileira de terapia intensiva (Online)
• Texto Completo: http://old.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-507X2011000100007
• topic: Técnicas de diagnóstico molecular; Reação em cadeia da polimerase; Sepse; Primers de DNA/diagnóstico; Técnicas de amplificação de ácido nucleico

INTRODUÇÃO: A sepse é uma resposta inflamatória sistêmica relacionada com altas taxas de mortalidade no meio hospitalar. O diagnóstico etiológico tardio e terapia antimicrobiana inadequada se associam a falhas do tratamento. Exames moleculares baseados na reação em cadeia da polimerase são considerados métodos mais rápidos e precisos do que técnicas de hemocultura para identificação microbiana, proporcionando uma taxa mais elevada de sucesso terapêutico. OBJETIVO: Desenvolver um painel de seqüências iniciadoras (primers) para fragmentos de DNA de microrganismos associados à sepse. MÉTODOS: Seqüências iniciadoras para amplificação de Enterobacter spp., Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Candida spp. foram desenvolvidos e testados quanto a sensibilidade e especificidade com base em suas respectivas cepas padrão. RESULTADOS: A especificidade pretendida foi obtida para os primers de P. aeruginosa, S. aureus e Candida spp. O teste de sensibilidade mostrou um limite de detecção de 5 ng a 500 fg em amostras de sangue contaminado com DNA microbiano. CONCLUSÕES: O painel molecular apresentado oferece a vantagem de constituir um sistema flexível "aberto" em comparação a outros métodos de detecção múltipla.