Avaliação da pureza, viabilidade e autenticação de dois acervos depositados na Coleção de Fungos de Referência em Vigilância Sanitária

• Autor(a) principal: Resende, Gabriela Rocha Mello de
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/58611
• topic: Fungos; Classificação; Preservação Biológica; Fungos; Classificação; Preservação Biológica

Atualmente, existem 33 Coleções Biológicas institucionalizadas na Fiocruz, sendo uma delas a Coleção de Fungos de Referência em Vigilância Sanitária (Fiocruz/CFRVS) localizada no INCQS, que é a primeira Coleção a ser acreditada nos ensaios de viabilidade, pureza e autenticação de leveduras e fungos filamentosos pela Norma ABNT ISO/IEC 17025:2017 no Brasil. A CFRVS é uma Coleção de serviços e desta forma o serviço de depósito é uma maneira de incrementar seu acervo. A CFRVS realiza também serviços de preservação, caracterização e distribuição de cepas. As Coleções Biológicas são responsáveis por manterem um acervo de materiais de forma estável e organizada, podendo fornecer informações sobre a coleta, identificação e a procedência das amostras. Dois importantes acervos foram enviados para depósito na CFRVS, totalizando 202 cepas provenientes de diferentes fontes, sendo necessária a avaliação da viabilidade e pureza, bem como a autenticação das cepas para que o depósito destas possa ser formalizado e incluído na CFRVS. Um dos acervos era constituído de 104 cepas de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii provenientes da Região do Norte do Brasil que estavam preservadas em glicerol 15% a -20ºC; o outro acervo era constituído especialmente de cepas históricas preservadas em óleo mineral, totalizando 98 cepas de Candida spp. e Cryptococcus spp. Para todas as cepas foram realizadas etapas de recuperação para verificar a viabilidade e pureza. Para as cepas de Cryptococcus spp. a autenticação foi realizada por cultivo em ágar Semente de Níger, e a diferenciação das espécies C. gattii e C. neoformans pelo crescimento em meio Canavanina Glicina Azul de Bromotimol. Já para as cepas de Candida spp. a diferenciação em espécies foi realizada utilizando-se o meio CHROMagar Candida. Do total de cepas avaliadas 158 apresentaram crescimento e puderam ser recuperadas, enquanto 44 não apresentaram crescimento. Dentre as cepas viáveis, 73 isolados foram classificados como Candida spp. e 85 como Cryptococcus spp. As espécies previamente identificadas com o CHROMagar Candida foram: C. albicans (n=37), C. tropicalis (n=20), C. krusei (n=11). C. gattii (n=52) e C. neoformans (n=28) foram autenticadas com o meio Canavanina-Glicina-Azul de Bromotimol