Avaliação das alterações imunopatológicas das lesões cutâneas por Leishmania (Viannia) braziliensis no modelo hamster dourado (Mesocricetus auratus)

• Autor(a) principal: Vieira, Larissa Resende
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/29285
• topic: Leishmania Braziliensis; Mesocricetus; Análise Parasitológica

A Leishmania (Viannia) braziliensis é a principal espécie associada à leishmaniose tegumentar Americana (LTA), mas é relativamente pouco estudada em modelos experimentais. Nosso grupo vem estudando o hamster (Mesocricetus auratus) que se mostrou ser um bom modelo para estudo da LTA. A história natural da infecção demonstrou que o tempo de surgimento das lesões era proporcional ao número de parasitos do inoculo, influenciando também a gravidade da evolução clínica e das alterações histopatológicas. O presente trabalho propõe avaliar momentos precoces da infecção pelos referidos inóculos, com a hipótese de que a modulação da resposta imune que ocorre em fases mais iniciais da infecção poderá influenciar o curso clinico da doença. Para tal, 72 hamster (dois experimentos) foram inoculados na pata com 104, 105 e 106 promastigotas de L. braziliensis e a mensuração da espessura da pata foi realizada semanalmente. Grupos de animais foram eutanasiados com 15, 30 e 50 dias pós-infecção. As alterações histopatológicas da pele foram quantificadas por pontuação atribuída a características do infiltrado e a quantificação de IgG anti-Leishmana foi realizada por ELISA. .A expressão gênica de IFN \0263, IL-10, TGF-\03B2, TNF, IL-4, IL-6, arginase e iNOS, e a carga parasitária foram avaliadas na pele por PCR em tempo real. O tempo de surgimento das lesões foi inversamente proporcional à concentração do inóculo A maioria dos animais infectados por 104 desenvolveram lesões mais benignas com menor comprometimento inflamatório em comparação aos animais infectados com 105 e 106, que apresentaram lesões de evolução similar, mais graves, com maior dano tecidual. Houve relação direta dos níveis de IgG total com a concentração de parasitos do inóculo e com o tempo de infecção, só havendo produção de IgG aos 30 dias. Houve correlação positiva dos níveis de IgG com o tamanho das lesões, dano tecidual e carga parasitária final, sugerindo que os anticorpos não protegem contra o parasito e que estão relacionados à gravidade da infecção. Aos 15 dias a maioria dos animais não expressou iNOS, havendo grande aumento de expressão dessa enzima nos animais infectados por 106 aos 30 dias e aumento substancial nos três inóculos, aos 50 dias. Entretanto, só ocorreu aumento mais pronunciado da expressão de arginase aos 50 dias. No geral, houve um controle mais eficiente da replicação parasitária pelos animais infectados por 104 parasitos, havendo correlação da CP com o tamanho das lesões e o dano tecidual. Em todos os tempos estudados observou-se um perfil misto de expressão de citocinas. Aos 15 e 30 dias, os inóculos 104 e 105 apresentaram perfis de expressão semelhantes com medianas menores que as do inóculo 106 Aos 50 dias, o menor inóculo teve um comportamento mais disperso para a maioria das citocinas, o que pode ser atribuído ao caráter outbread do modelo. Observamos uma baixa modulação de IL-4 e TGF-\03B2 nos animais infectados por 104 parasitos, fato que pode ter contribuído para o controle mais efetivo da infecção, ao contrário do que ocorreu com o inóculo 106. Nos inóculos 105 e 106, houve uma aparente desregulação da resposta imune, com alta expressão de citocinas, provavelmente relacionada ao elevado estimulo antigênico. Nossos resultados sugerem que a baixa indução de IL-4 e TGF-\03B2 é consequência da carga infectiva, tendo importante papel no controle da doença.