Perfil das células T Natural Killer (NKT) de indivíduos asmáticos desafiadas com antígeno solúvel do ovo de Schistosoma mansoni

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Yuri Tabajara Pereira Costa dos
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/18648
Resumo: INTRODUÇÃO: A asma é uma doença inflamatória crônica, caracterizada por hiper-reatividade das vias aéreas inferiores e por limitação variável e reversível ao fluxo aéreo. Apresenta manifestações clínicas na forma de sibilância, dispneia, sensação de aperto no peito e tosse, podendo ser considerada como atópica ou não atópica, de acordo com seus aspectos imunopatogênicos. Células do sistema imune, como neutrófilos, macrófagos, células dendríticas e as células T Natural Killer (NKT), apresentam importante papel no desenvolvimento ou regulação da resposta inflamatória da asma. Desta forma é possível que antígenos com propriedades regulatórias, como no caso dos antígenos de ovo do Schistosoma mansoni (SEA), sejam capazes de alterar o perfil destas células e regular a resposta imune da asma. OBJETIVOS: Avaliar a frequência de NKT e expressão de moléculas de ativação e coestimulação, além de citocinas nestas células, em indivíduos com asma. METODOLOGIA: Trata-se de um estudo de corte transversal realizado com 24 voluntários, sendo 14 indivíduos asmáticos e 10 voluntários não asmáticos. Células mononucleares de sangue periférico (PNMC) foram separadas e incubadas por 14 horas com tetrâmeros de CD1d conjugados com αGalCer ou SEA. A expressão de marcadores de superfície e intracelulares foi analisada por citometria de fluxo. RESULTADOS: Não foi observada diferença na frequência de células NKT em culturas de PBMC não estimuladas, estimuladas com αGalCer ou SEA, nos grupos estudados, ou na expressão de CD69, CD28 e CD25 na superfície de células NKT nos diferentes grupos e em todas as condições testadas. Entretanto, a expressão de CD25 foi inferior nas células NKT de indivíduos com asma grave quando comparado com asma intermitente, em todas as condições testadas. A frequência de células NKT expressando CD279 após estímulo com αGalCer foi superior em indivíduos com asma intermitente, na comparação com controles sadios. Não foram observadas diferenças na expressão de IL-4, IL-13 e IL-17 em células NKT nos diferentes estímulos e grupos avaliados. A expressão de IFN-γ após estímulo com αGalCer ou SEA foi inferior em células NKT de indivíduos com asma intermitente quando comparados com controles sadio. Entretanto, a expressão de IFN-γ e IL-10 foi superior em células NKT de indivíduos com asma grave, após estímulo com SEA, quando comparado com asma intermitente. CONCLUSÃO: Nossos ensaios sugerem que as células NKT constituem uma população celular de difícil controle, haja vista sua capacidade de produzir tipos de citocina com efeitos teoricamente distintos. Este e outros estudos que contribuem para elucidar a resposta imunológica na asma auxiliam no desenvolvimento de estratégias terapêuticas, que visem tanto o controle como as manifestações clínicas da doença.
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spelling Santos, Yuri Tabajara Pereira Costa dosTorres, Alex José LeiteTavares, Natalia MachadoOliveira, Ricardo RiccioOliveira, Ricardo Riccio2017-04-25T13:22:13Z2017-04-25T13:22:13Z2016SANTOS, Y. T. P. C. dos Perfil das células T Natural Killer (NKT) de indivíduos asmáticos desafiadas com antígeno solúvel do ovo de Schistosoma mansoni. 2016. 111 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) – Universidade Federal da Bahia. Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Gonçalo Moniz, Salvador, 2016.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/18648INTRODUÇÃO: A asma é uma doença inflamatória crônica, caracterizada por hiper-reatividade das vias aéreas inferiores e por limitação variável e reversível ao fluxo aéreo. Apresenta manifestações clínicas na forma de sibilância, dispneia, sensação de aperto no peito e tosse, podendo ser considerada como atópica ou não atópica, de acordo com seus aspectos imunopatogênicos. Células do sistema imune, como neutrófilos, macrófagos, células dendríticas e as células T Natural Killer (NKT), apresentam importante papel no desenvolvimento ou regulação da resposta inflamatória da asma. Desta forma é possível que antígenos com propriedades regulatórias, como no caso dos antígenos de ovo do Schistosoma mansoni (SEA), sejam capazes de alterar o perfil destas células e regular a resposta imune da asma. OBJETIVOS: Avaliar a frequência de NKT e expressão de moléculas de ativação e coestimulação, além de citocinas nestas células, em indivíduos com asma. METODOLOGIA: Trata-se de um estudo de corte transversal realizado com 24 voluntários, sendo 14 indivíduos asmáticos e 10 voluntários não asmáticos. Células mononucleares de sangue periférico (PNMC) foram separadas e incubadas por 14 horas com tetrâmeros de CD1d conjugados com αGalCer ou SEA. A expressão de marcadores de superfície e intracelulares foi analisada por citometria de fluxo. RESULTADOS: Não foi observada diferença na frequência de células NKT em culturas de PBMC não estimuladas, estimuladas com αGalCer ou SEA, nos grupos estudados, ou na expressão de CD69, CD28 e CD25 na superfície de células NKT nos diferentes grupos e em todas as condições testadas. Entretanto, a expressão de CD25 foi inferior nas células NKT de indivíduos com asma grave quando comparado com asma intermitente, em todas as condições testadas. A frequência de células NKT expressando CD279 após estímulo com αGalCer foi superior em indivíduos com asma intermitente, na comparação com controles sadios. Não foram observadas diferenças na expressão de IL-4, IL-13 e IL-17 em células NKT nos diferentes estímulos e grupos avaliados. A expressão de IFN-γ após estímulo com αGalCer ou SEA foi inferior em células NKT de indivíduos com asma intermitente quando comparados com controles sadio. 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Immune cells, such as neutrophils, macrophages, dendritic cells and Natural Killer T cells (NKT) play an important role in the regulation or development of inflammatory response of asthma. Thus, it is possible that antigens with regulatory properties, such as Schistosoma mansoni soluble egg antigen (SEA), are able to alter the profile of these cells and regulate the immune response of asthma. AIM: To evaluate the frequency of NKT cells, expression of activation and costimulatory markers, as well as cytokine expression in NKT cells from individuals with asthma. METHODOLOGY: This is a cross-sectional study of 24 volunteers, of which 14 were asthmatic and 10 nonasthmatic volunteers. Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were separated and incubated for 14 hours with CD1d tetramers conjugated with αGalCer or SEA. The expression of surface and intracellular molecules was analyzed by flow cytometry. RESULTS: No significant difference was observed in the frequency of NKT cells in unstimulated PBMC cultures or stimulated with αGalCer or SEA, in all groups, as well as in expression of CD69, CD28 and CD25 on surface of NKT cells in the different groups and in all tested conditions. However, CD25 expression was lower in NKT cells from individuals with severe asthma when compared with intermittent asthma in all tested conditions. The frequency of NKT cells expressing CD279 after stimulation with αGalCer was higher in subjects with intermittent asthma, compared to healthy controls. Regarding expression of cytokines, no significant differences were observed in expression of IL-4, IL-13 and IL-17 in NKT cells in different stimuli and groups. However, expression of IFN- y following stimulation with αGalCer or SEA was lower in NKT cells of individuals with intermittent asthma compared to healthy controls. Moreover, IFN-γ and IL-10 expression was higher in NKT cells of patients with severe asthma, after stimulation with SEA, compared with intermittent asthma. CONCLUSION: Our data suggests that NKT cells are a cell population of difficult control, given its capacity to produce cytokines with, in theory, distinct effects. This and other studies that contribute to elucidate the immune response in asthma support the development of new therapeutic strategies targeting both the control and the clinical manifestations of the disease.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, BrasilporCentro de Pesquisas Gonçalo MonizNKTAsmaSchistosoma mansoniCD1dNKTAsthmaSchistosoma mansoniCD1dPerfil das células T Natural Killer (NKT) de indivíduos asmáticos desafiadas com antígeno solúvel do ovo de Schistosoma mansoniinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2016-04-29Coordenação de EnsinoFundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo MonizMestrado AcadêmicoSalvador/BaPós-Graduação em Patologiainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82991https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/18648/1/license.txt5a560609d32a3863062d77ff32785d58MD51ORIGINALYuri Tabajara Pereira Costa dos Santos Perfil das células...2016.pdfYuri Tabajara Pereira Costa dos Santos Perfil das células...2016.pdfapplication/pdf1553832https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/18648/2/Yuri%20Tabajara%20Pereira%20Costa%20dos%20Santos%20%20Perfil%20das%20c%c3%a9lulas...2016.pdfe434c3fe1f8504ae80c0bb68190c9062MD52TEXTYuri Tabajara Pereira Costa dos Santos Perfil das células...2016.pdf.txtYuri Tabajara Pereira Costa dos Santos Perfil das células...2016.pdf.txtExtracted 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