Análise in vitro da infecção de macrófagos murinos iNOS-KO por Purpureocillium lilacinum, agente causal da hialohifomicose
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/20656 |
Resumo: | Purpureocillium lilacinum é um fungo filamentoso, assexuado e hialino. Sendo cosmopolita, é encontrado em solo como saprófita e patógeno de insetos e nematódeos. P. lilacinum é considerado um importante patógeno oportunista causador da hialohifomicose, que afeta crianças e adultos, sejam imunocompetentes ou imunocomprometidos. Os dados sobre os mecanismos imunológicos relacionados na interação patógeno-hospedeiro são escassos. Neste estudo, foram utilizados três isolados distintos de P. lilacinum, obtidos a partir de casos clínicos humanos, interagindo in vitro com macrófagos de camundongos selvagens e nocautes (iNOS-KO). Após 14h de incubação, foram visualizados tubos germinativos fúngicos, sugerindo metabolismo ativo do patógeno, bem como o desenvolvimento de hifas septadas, ramificadas dentro dos macrófagos. Em última análise às 24h, os macrófagos foram completamente destruídos. Diferentes resultados em relação à interação e velocidade de destruição dos macrófagos foram encontrados e confirmados entre as três isolados utilizadas. No entanto, foram observados níveis normais de MMP-9 e IFN-\F061\F02E\F020 O P. lilacinum foi capaz de induzir modulações nos perfiis de marcadores CD11b, CD14, CD18, CD38 e CD80 nos macrófagos peritoneais da linhagem iNOS-KO. Os resultados desse trabalho nos permitem sugerir que o fungo P. lilacinum é capaz de infectar, modular e destruir macrófagos, que são uma das primeiras células de defesa a interagir com o patógeno, em camundongos imunodeficientes |
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Ponte, Carlos Germano Garrido deDe Luca, Paula MelloBorba, Cintia de MoraesFreitas, Dayvison Francis SaraivaNogueira, Ana Cristina Martins de AlmeidaSantiago, Marta de AlmeidaAntas, Paulo Renato Zuquim2017-08-17T13:44:51Z2017-08-17T13:44:51Z2017PONTE, C. G. G. de. Análise in vitro da infecção de macrófagos murinos iNOS-KO por Purpureocillium lilacinum, agente causal da hialohifomicose. 2017. 97f. Dissertação (Mestrado em Medicina Tropical) - Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de janeiro, RJ, 2017https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/20656Purpureocillium lilacinum é um fungo filamentoso, assexuado e hialino. Sendo cosmopolita, é encontrado em solo como saprófita e patógeno de insetos e nematódeos. P. lilacinum é considerado um importante patógeno oportunista causador da hialohifomicose, que afeta crianças e adultos, sejam imunocompetentes ou imunocomprometidos. Os dados sobre os mecanismos imunológicos relacionados na interação patógeno-hospedeiro são escassos. Neste estudo, foram utilizados três isolados distintos de P. lilacinum, obtidos a partir de casos clínicos humanos, interagindo in vitro com macrófagos de camundongos selvagens e nocautes (iNOS-KO). Após 14h de incubação, foram visualizados tubos germinativos fúngicos, sugerindo metabolismo ativo do patógeno, bem como o desenvolvimento de hifas septadas, ramificadas dentro dos macrófagos. Em última análise às 24h, os macrófagos foram completamente destruídos. Diferentes resultados em relação à interação e velocidade de destruição dos macrófagos foram encontrados e confirmados entre as três isolados utilizadas. No entanto, foram observados níveis normais de MMP-9 e IFN-\F061\F02E\F020 O P. lilacinum foi capaz de induzir modulações nos perfiis de marcadores CD11b, CD14, CD18, CD38 e CD80 nos macrófagos peritoneais da linhagem iNOS-KO. Os resultados desse trabalho nos permitem sugerir que o fungo P. lilacinum é capaz de infectar, modular e destruir macrófagos, que são uma das primeiras células de defesa a interagir com o patógeno, em camundongos imunodeficientesPurpureocillium lilacinum is a filamentous, asexual and hyaline fungus. As cosmopolitan, it is found in soil as saprophyte and pathogen of insects and nematodes. P. lilacinum is considered an important opportunistic pathogen causing hyalohyphomycosis, which affects children and adults, whether immunocompetent or immunocompromised. Data on immunological mechanisms related to host-pathogen interactions are unusual. In this study, three distinct isolates of P. lilacinum, obtained from human clinical cases, were put to interact in vitro with both wild-type and transgenic (iNOS-KO) mice macrophages. After 14h of incubation, fungal germ tubes were observed, suggesting active metabolism of the pathogen, as well as the development of septate, branched hyphae within the macrophages. Ultimately, at 24h, the macrophages were entirely destroyed. Different results regarding the interaction and macrophages destruction rate were found and corroborated among the three strains used. Nevertheless, similar levels of MMP-9 and IFN-\F061\F020 were observed. P. lilacinum was able to induce significant modulation of CD11b, CD14, CD18, CD38 and CD80 surface markers in the peritoneal macrophages of the iNOS-KO lineage. The results of this study allow us to conclude that P. lilacinum is able to infect, modulate and destroy macrophages in vitro, the first cells to interact with the pathogen in immunodeficient miceFundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, BrasilporAnálise in vitro da infecção de macrófagos murinos iNOS-KO por Purpureocillium lilacinum, agente causal da hialohifomicoseinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2017-02-09Pós-Graduação em Medicina TropicalFundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo CruzRio de Janeiro/RJPrograma de Pós-Graduação em Medicina TropicalHypocrealesHialoifomicoseÓxido Nítrico SintaseMuridaeMacrófagosinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/20656/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALcarlos_ponte_ioc_mest_2017.pdfapplication/pdf2432423https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/20656/2/carlos_ponte_ioc_mest_2017.pdf758a53996af07fdaa48d048dadf2fb72MD52TEXTcarlos_ponte_ioc_mest_2017.pdf.txtcarlos_ponte_ioc_mest_2017.pdf.txtExtracted texttext/plain151051https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/20656/3/carlos_ponte_ioc_mest_2017.pdf.txt1423b93ed7947af85bbf5c750323f7ebMD53icict/206562018-08-15 03:14:50.31oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352018-08-15T06:14:50Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
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