Comparison of PCR protocols for detecting Histoplasma capsulatum DNA through a multicenter study

• Autor(a) principal: Buitrago, María José
• Data de Publicação: 2013
• Outros Autores: Canteros, Cristina Elena, Frías de León, Guadalupe, González, Ángel, Marques-Evangelista de Oliveira, Manoel, Muñoz, César O., Ramirez, José Antonio, Toranzo, Adriana Isabel, Zancope-Oliveira, Rosely, Cuenca-Estrella, Manuel
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/35830
• topic: Histoplasmosis; Multicenter; PCR; Diagnosis; Histoplasmosis; Multicéntrico; PCR; Diagnóstico

Antecedentes: Se realizó un estudio multicéntrico en el que participaron cinco laboratorios miembros de la red MICOMOL a partir del programa CYTED. Los participantes recibieron un panel que contenía muestras de ADN de Histoplasma capsulatum, al igual que paneles con muestras de control negativas y de reacciones cruzadas. Objetivos: El objetivo del presente estudio fue examinar la precisión de los diferentes protocolos de PCR para la detección de ADN de H. capsulatum. Métodos: Se examinaron siete protocolos, todos ellos basados en técnicas de PCR, que empleaban como diana plásmidos unicopia o multicopia. Resultados: la mayoría de estos protocolos (4/7) pudieron detectar las cantidades más pequenas de ADN (10x10 fg/μl). La sensibilidad global fue del 86% y la especificidad del 100%. El protocolo basado en el plásmido unicopia SCAR220 se asoció a la menor sensibilidad (43%) pero a una especificidad del 100%. Los protocolos de PCR en tiempo real fueron muy reproducibles, sensibles y específicos. En ningún caso se detectaron resultados falsos positivos ni reacciones cruzadas.