Padronização da reação de imuno-histoquímica, utilizando soro policlonal de coelho anti-Sporothrix schenckii, para o diagnóstico da esporotricose canina
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Data de Publicação: | 2009 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/29278 |
Resumo: | O aumento do número de casos de esporotricose em cães descrito desde 1998 no Rio de Janeiro, aliado à escassez de leveduras nas lesões nestes animais requerem métodos diagnósticos rápidos e sensíveis. A sobreposição de áreas endêmicas e a ocorrência de reação cruzada em testes sorológicos entre a esporotricose e a leishmaniose tegumentar americana (LTA) no Rio de Janeiro enfatizam a relevância do diagnóstico diferencial entre elas. A imuno-histoquímica (IHQ) é um método sensível e específico e pode ser uma alternativa ao diagnóstico. O presente estudo teve como objetivo descrever os achados histopatológicos das lesões cutâneas de esporotricose e LTA em cães, padronizar a técnica de IHQ utilizando soro anti-Sporothrix schenckii em lesões cutâneas de esporotricose canina, comparar esta técnica com as técnicas histológicas convencionais e investigar a ocorrência de reações cruzadas com Leishmania sp.. A análise histopatológica foi realizada em 94 casos de esporotricose e 35 casos de LTA. As lesões foram caracteristicamente granulomatosas supurativas nas duas doenças. Contudo, os granulomas supurativos bem formados e ricos em neutrófilos e o infiltrado inflamatório periférico perivascular, perifolicular e intersticial elevaram a chance do diagnóstico de esporotricose Os granulomas mal formados e o infiltrado inflamatório periférico difuso com presença de linfócitos e macrófagos favoreceram o diagnóstico da LTA. A pesquisa de leveduras foi realizada em 87 casos. A impregnação pela prata de Grocott e a IHQ detectaram leveduras em, respectivamente, 43,7% e 65,5% dos casos, e as duas técnicas associadas em 74,7% dos casos. A detecção de antígenos de S. schenckii pela IHQ elevou a sensibilidade do diagnóstico histológico a 80,5%. Nas lesões de LTA utilizadas como controle negativo para a IHQ, nenhum tipo de marcação ocorreu. Assim, diante de quadros histopatológicos compatíveis com o descrito para esporotricose, a IHQ é um método complementar ao diagnóstico histológico, garantindo maiores sensibilidade e especificidade aos resultados. |
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Miranda, Luisa Helena Monteiro dePacheco, Tânia Maria ValenteTortelly, Rogerio2018-10-03T14:17:36Z2018-10-03T14:17:36Z2009MIRANDA, Luisa Helena Monteiro de. Padronização da reação de imuno-histoquímica, utilizando soro policlonal de coelho anti-Sporothrix schenckii, para o diagnóstico da esporotricose canina. 2009. 84 f. Dissertação (Mestrado em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas)-Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2009.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/29278O aumento do número de casos de esporotricose em cães descrito desde 1998 no Rio de Janeiro, aliado à escassez de leveduras nas lesões nestes animais requerem métodos diagnósticos rápidos e sensíveis. A sobreposição de áreas endêmicas e a ocorrência de reação cruzada em testes sorológicos entre a esporotricose e a leishmaniose tegumentar americana (LTA) no Rio de Janeiro enfatizam a relevância do diagnóstico diferencial entre elas. A imuno-histoquímica (IHQ) é um método sensível e específico e pode ser uma alternativa ao diagnóstico. O presente estudo teve como objetivo descrever os achados histopatológicos das lesões cutâneas de esporotricose e LTA em cães, padronizar a técnica de IHQ utilizando soro anti-Sporothrix schenckii em lesões cutâneas de esporotricose canina, comparar esta técnica com as técnicas histológicas convencionais e investigar a ocorrência de reações cruzadas com Leishmania sp.. A análise histopatológica foi realizada em 94 casos de esporotricose e 35 casos de LTA. As lesões foram caracteristicamente granulomatosas supurativas nas duas doenças. Contudo, os granulomas supurativos bem formados e ricos em neutrófilos e o infiltrado inflamatório periférico perivascular, perifolicular e intersticial elevaram a chance do diagnóstico de esporotricose Os granulomas mal formados e o infiltrado inflamatório periférico difuso com presença de linfócitos e macrófagos favoreceram o diagnóstico da LTA. A pesquisa de leveduras foi realizada em 87 casos. A impregnação pela prata de Grocott e a IHQ detectaram leveduras em, respectivamente, 43,7% e 65,5% dos casos, e as duas técnicas associadas em 74,7% dos casos. A detecção de antígenos de S. schenckii pela IHQ elevou a sensibilidade do diagnóstico histológico a 80,5%. Nas lesões de LTA utilizadas como controle negativo para a IHQ, nenhum tipo de marcação ocorreu. Assim, diante de quadros histopatológicos compatíveis com o descrito para esporotricose, a IHQ é um método complementar ao diagnóstico histológico, garantindo maiores sensibilidade e especificidade aos resultados.The increase in the number of cases of canine sporotrichosis in Rio de Janeiro described since 1998, along with the scarcity of yeast cells in canine lesions demand fast and sensible diagnostic methods. The overlap of endemic areas in Rio de Janeiro and the ocorrence of cross-reaction between sporotrichosis and american tegumentary leishmaniasis (ATL) in serological tests emphasize the relevance of their differential diagnosis. Immunohistochemistry (IHC) is a sensible and specific method and can be an alternative for the diagnosis. The present study aims to describe the histolopathological findings of sporotrichosis and ATL cutaneous lesions in dogs, to standardize IHC technique using anti-Sporothrix schenckii serum in canine sporotrichosis cutaneous lesions, to compare this technique with histological conventional techniques and to investigate the ocorrence of cross-reactions with Leishmania sp.. Histopatological analysis was made in 94 cases of sporotrichosis and 35 cases of ATL. The lesions were typically suppurative granulomatous in both diseases However, the well organized and neutrophil-rich suppurative granulomas and the perivascular, perifollicular and intersticial periferic inflammatory infiltrate increased the chance for the sporotrichosis diagnosis. The poorly organized granulomas and diffuse periferic inflammatory infiltrate with lymphocytes and macrophages support the ATL diagnosis. The investigation of yeast cells was performed in 87 cases. Grocott\2019s silver stain and IHC detected yeast cells in 43,7% e 65,5% of cases respectively, and both techiques together in 74,7% of cases. The detection of S. schenckii antigens by IHC increased the sensibility of histologic diagnosis to 80,5%. In ATL lesions, which were used as negative control for IHC, no positive reaction was detected. Thus, in cases with histopathological presentation consistent with that described for sporotrichosis, IHC is an efficient complementar method for histologic diagnosis promoting increased sensibility and specificity to results.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porLeishmaniose CutâneaEsporotricoseCãesTécnicas HistológicasPadronização da reação de imuno-histoquímica, utilizando soro policlonal de coelho anti-Sporothrix schenckii, para o diagnóstico da esporotricose caninainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2009Instituto Nacional de Infectologia Evandro ChagasFundação Oswaldo CruzRio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosasinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/29278/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALluisa_miranda_ipec_mest_2009.pdfapplication/pdf14876511https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/29278/2/luisa_miranda_ipec_mest_2009.pdf745b30547412b0d02b9935f82a1881e7MD52TEXTluisa_miranda_ipec_mest_2009.pdf.txtluisa_miranda_ipec_mest_2009.pdf.txtExtracted texttext/plain112333https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/29278/3/luisa_miranda_ipec_mest_2009.pdf.txt152a329664cb008324c7d02c55dc0f69MD53icict/292782018-10-04 21:51:25.537oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352018-10-05T00:51:25Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
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