Propagação in vitro e produção de cepa transgênica de Mycobacterium leprae em linhagem IDE8 de Ixodes scapularis

• Autor(a) principal: Oliveira, Diego Augusto Souza
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/52526
• topic: Células de carrapato; Hanseníase; IDE-8; Carrapato; Tick cell lines; Leprosys; IDE-8; Tick; Ixodes; Hanseníase; Animais Geneticamente Modificados; Mycobacterium leprae

A hanseníase é uma doença infecciosa crônica, causada pelo Mycobacterium leprae, bacilo intracelular que infecta principalmente macrófagos da pele e células de Schwann nos nervos periféricos. A Hanseníase representa um problema de saúde pública no Brasil, por apresentar uma alta prevalência. A impossibilidade do seu cultivo in vitro até o momento torna análises fundamentais como a determinação da sensibilidade do bacilo a novos antibióticos em tarefas árduas, pois o método atual de cultivo baseia-se na infecção de camundongos atímicos estéreis, consistindo em um procedimento caro, demorado, impreciso, que demanda grandes quantidades de moléculas candidatas, realizado através do custo de vidas animais e não aplicável em protocolos de transformação. Nosso grupo demonstrou que carrapatos da espécie Amblyomma cajennense, em condições controladas, podem atuar na transmissão do M. leprae, indicando potencialidade em linhagens de células de carrapato no cultivo desse bacilo in vitro. Nossos dados demonstram que o M. leprae não só é capaz de infectar com sucesso inúmeras linhagens de células de carrapatos, como de se multiplicar in vitro no interior de ao menos uma delas, a linhagem IDE8, originária de embriões de Ixodes scapularis Através dessa linhagem de células foi possível transformar um isolado clínico do bacilo, tornando-o fluorescente através da expressão da proteína fluorescente Cherry. Através da criação de cepas de M. leprae transformadas seremos capazes de monitorar a viabilidade e a taxa metabólica do patógeno in vivo. Este trabalho aponta para o grande potencial do uso das linhagens de células de carrapatos como método de cultivo in vitro do M. leprae e a partir dessa nova metodologia a possibilidade de desenvolvimento de novas abordagens e ferramentas para estudo da hanseníase como testes mais econômicos, rápidos e precisos para a identificação de novas drogas para o controle da doença