Estudo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912)(Diptera:Phlebotominae) e o efeito de seus extratos utilizando o modelo do bolsão inflamatório

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Prates, Deboraci Brito
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34278
Resumo: O conteúdo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) foi estudado. Este flebotomíneo é o principal vetor da Leishmaniose Visceral Americana em várias regiões do Brasil. A saliva de vetores desempenha um importante papel na obtenção do alimento sanguíneo, na lubrificação das peças bucais e na transmissão dos parasitos. O conteúdo e o perfil protéico da glândula salivar de fêmeas de Lu. longipalpis em jejum sanguíneo e alimentadas com sangue foram analisados em diferentes dias. O conteúdo protéico da glândula salivar de fêmeas em jejum aumentou de 1,955 µg/mL no primeiro dia após emergência do inseto adulto para 7,457 µg/mL no terceiro dia de vida, não variando muito até o sétimo dia. Um dia após a alimentação sanguínea, o conteúdo protéico diminuiu para 5,046 µg/mL, porém essa concentração aumentou nos dias subseqüentes, atingindo 8,172 µg/mL no sétimo dia. O conteúdo de proteínas em machos foi menor que em fêmeas. O perfil eletroforético das proteínas da saliva de fêmeas foi analisado por SDS-PAGE. Bandas correspondentes a 45 KDa foram mais intensas. A maioria dos polipeptídeos presente na saliva das fêmeas em jejum estava também presente em fêmeas alimentadas. Contudo, em fêmeas com um dia de vida não foi possível observar as bandas de 6, 24, 27 e 130 KDa e em fêmeas com um dia após a alimentação sanguínea, não foi possível observar as bandas de 6, 16, 27, 32, 37, 49, 61 e 130 KDa. O perfil eletroforético bidimensional (20) de proteínas da saliva de fêmeas com 3, 5 e 7 dias de vida revelou um predomínio de peptídeos entre 14 e 45 KDa. O gel 20 de proteínas da saliva de fêmeas com 3 dias revelou 82 spots, o gel de 5 dias revelou 30 spots e o gel de 7 dias, 48 spots; todos os spots foram correspondentes. Além disso, o efeito da saliva e de 6 frações suas, obtidas por HPLC, no recrutamento de leucócitos foi estudado utilizando o modelo do bolsão de ar inflamatório em camundongos BALB/c. Os neutrófilos foram as células predominantes no exsudato. Porém, o recrutamento de macrófagos foi diferencial entre os grupos. O SGS induziu maior recrutamento de macrófagos e os extratos 5, 9 e 10 tiveram uma capacidade de recrutamento de macrófagos acima de 50% com relação ao SGS. Eosinófilos também estiveram presentes no exsudato inflamatório, principalmente quando utilizado o SGS e os extratos 5 e 9 como estímulos.
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spelling Prates, Deboraci BritoAyres, Constância Flávia JunqueiradosSantos, Washington Luis ConradoBarral, Aldina Maria PradoBarral, Aldina Maria Prado2019-07-19T12:45:48Z2019-07-19T12:45:48Z2005PRATES, Deboraci Brito. Estudo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera:Phlebotominae) e o efeito de seus extratos utilizando o modelo do bolsão inflamatório. 2005. 85 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal da Bahia; Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz., Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2005.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34278O conteúdo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) foi estudado. Este flebotomíneo é o principal vetor da Leishmaniose Visceral Americana em várias regiões do Brasil. A saliva de vetores desempenha um importante papel na obtenção do alimento sanguíneo, na lubrificação das peças bucais e na transmissão dos parasitos. O conteúdo e o perfil protéico da glândula salivar de fêmeas de Lu. longipalpis em jejum sanguíneo e alimentadas com sangue foram analisados em diferentes dias. O conteúdo protéico da glândula salivar de fêmeas em jejum aumentou de 1,955 µg/mL no primeiro dia após emergência do inseto adulto para 7,457 µg/mL no terceiro dia de vida, não variando muito até o sétimo dia. Um dia após a alimentação sanguínea, o conteúdo protéico diminuiu para 5,046 µg/mL, porém essa concentração aumentou nos dias subseqüentes, atingindo 8,172 µg/mL no sétimo dia. O conteúdo de proteínas em machos foi menor que em fêmeas. O perfil eletroforético das proteínas da saliva de fêmeas foi analisado por SDS-PAGE. Bandas correspondentes a 45 KDa foram mais intensas. A maioria dos polipeptídeos presente na saliva das fêmeas em jejum estava também presente em fêmeas alimentadas. Contudo, em fêmeas com um dia de vida não foi possível observar as bandas de 6, 24, 27 e 130 KDa e em fêmeas com um dia após a alimentação sanguínea, não foi possível observar as bandas de 6, 16, 27, 32, 37, 49, 61 e 130 KDa. O perfil eletroforético bidimensional (20) de proteínas da saliva de fêmeas com 3, 5 e 7 dias de vida revelou um predomínio de peptídeos entre 14 e 45 KDa. O gel 20 de proteínas da saliva de fêmeas com 3 dias revelou 82 spots, o gel de 5 dias revelou 30 spots e o gel de 7 dias, 48 spots; todos os spots foram correspondentes. Além disso, o efeito da saliva e de 6 frações suas, obtidas por HPLC, no recrutamento de leucócitos foi estudado utilizando o modelo do bolsão de ar inflamatório em camundongos BALB/c. Os neutrófilos foram as células predominantes no exsudato. Porém, o recrutamento de macrófagos foi diferencial entre os grupos. O SGS induziu maior recrutamento de macrófagos e os extratos 5, 9 e 10 tiveram uma capacidade de recrutamento de macrófagos acima de 50% com relação ao SGS. Eosinófilos também estiveram presentes no exsudato inflamatório, principalmente quando utilizado o SGS e os extratos 5 e 9 como estímulos.The amount of salivary gland protein in Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) was studied. This phletotomine is the main vector of the American Visceral Leishmaniasis in many Brazilian areas. The saliva of vector plays an important role in the taking of blood meal, in the lubrication of the mouthparts and in the parasite transmission. The salivary gland protein content and profile from unfed and blood fed female of Lu. longipalpis were analyzed at different times. The amount of salivary gland protein from sugar-fed female increased from 1.955 |ag/mL in the first day after adult emergence to 7.457 |ag/mL in the third day, without change until the seventh day. One day after blood feeding, the protein content decreased to 5.046 ^g/mL, however this concentration increased at following days to reach 8.172 ).ig/mL. The male protein content was lower than female protein content. The electrophoretic profile of the saliva proteins from female insects was analyzed by SDS-PAGE. Bands correspondents to 45 KDa were more intense. The most of polypeptides present in the saliva of sugar fed female also were present in the saliva of blood fed females. However, in female with one day after emergence was not possible to observe the bands 6, 24, 27 and 130 KDa and in female with one day after blood feeding was not possible to observe the bands 6, 16, 27, 32, 37, 49, 61 and 130 KDa. The bidimensional electrophoretic (2D) profile of the saliva proteins from female with 3, 5 and 7 days after emergence revealed a predominance of peptides between 14 and 45 KDa. The saliva protein 2D gel from female with 3 days revealed 82 spots, the 2D gel from 5 days revealed 30 spots and the 2D gel from 7 days revealed 48 spots; all spots were correspondent. Moreover, the effect of the saliva and six of its fractions, obtained by HPLC, in the leukocyte recruitment was studied using the inflammatory air pouch model in BALB/c mice. The neutrophils were the predominant cells in the exsudate. But, the macrophage recnjitment was different between groups. The SGS induced major macrophage recruitment and the extracts 5, 9 e 10 had a capacity of macrophage recruitment above 50% regarding the SGS. Eosinophils were also present in the inflammatory exsudate, mainly when the SGS and the extracts 5 and 9 were used as stimuli.CAPES, CNPq e INSTITUTO DO MILÊNIO.Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.porCentro de Pesquisas Gonçalo MonizProteínas SalivaresPsychodidaeDípterosLeishmaniose VisceralLutzomyia longipalpisSalivaBidimensional electrophoresisInflammatory air pouchEstudo protéico da saliva de Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912)(Diptera:Phlebotominae) e o efeito de seus extratos utilizando o modelo do bolsão inflamatórioinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2005Coordenação de EnsinoUniversidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisas Gonçalo MonizMestrado AcadêmicoSalvador/BAPós-Graduação em Patologiainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34278/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALDeboraci Brito Prates Estudo...2005.pdfDeboraci Brito Prates Estudo...2005.pdfapplication/pdf29648134https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34278/2/Deboraci%20Brito%20Prates%20%20Estudo...2005.pdf3d7ec65618760ab28757b7ec5a99f542MD52TEXTDeboraci Brito Prates Estudo...2005.pdf.txtDeboraci Brito Prates Estudo...2005.pdf.txtExtracted texttext/plain102360https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34278/3/Deboraci%20Brito%20Prates%20%20Estudo...2005.pdf.txtd0199eeae0daa738bcdd0b5af349acbcMD53icict/342782019-07-20 16:32:22.854oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352019-07-20T19:32:22Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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