Influ??ncia da fase de crescimento celular na a????o fotodin??mica: avalia????o morfol??gica, mec??nica e bioqu??mica, em c??lulas de Candida albicans

• Autor(a) principal: BAPTISTA, ALESSANDRA
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Tese
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/27880
• topic: photochemistry; toxicity; animal cells; morphological changes; histological techniques; biochemistry; candida; yeasts; antimicrobial agents; therapy; scanning electron microscopy; fourier transformation; infrared spectra; atomic force microscopy; dna; carbohydrates; lipids; carboxylic acids; comparative evaluations

Estudos t??m demonstrado o potencial da terapia fotodin??mica antimicrobiana (aPDT) na inativa????o de diferentes c??lulas microbianas. No geral, s??o tr??s as fases de crescimento dos microrganismos: fase lag, exponencial e estacion??ria. Os objetivos deste estudo foram avaliar a susceptibilidade de c??lulas de Candida albicans em diferentes fases de crescimento, submetidas ?? aPDT, associando azul de metileno (50 μM) e luz de emiss??o vermelha (λ= 660 nm) e investigar altera????es morfol??gicas, mec??nicas e bioqu??micas, antes e depois da aPDT, por microscopia eletr??nica de varredura, de for??a at??mica e por espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier. Os resultados obtidos sugerem que, em par??metros letais, c??lulas em fase estacion??ria de crescimento (48 h) s??o menos suscept??veis ?? aPDT, quando comparadas ??quelas em fases lag (6 h) e ex-ponencial (24 h) de crescimento. Entretanto, em par??metros subletais, c??lulas de 6 h e 48 h mostraram a mesma susceptibilidade ?? aPDT. Em sequ??ncia, os experimentos foram realizados em par??metros considerados subletais para c??lulas crescidas por 6 e 48 h. A avalia????o morfol??gica mostrou menor quantidade de matriz extracelular em c??lulas de 6 h comparada ??quelas de 48 h. A espectroscopia de for??a at??mica mostrou que c??lulas em fase lag perderam a rigidez ap??s a aPDT, enquanto que c??lulas em fase estacion??ria mostraram comportamento in-verso. Ainda, c??lulas de 48 h diminu??ram sua adesividade ap??s a aPDT, enquanto que c??lulas de 6 h e 24 h tornaram-se mais adesivas. Os resultados bioqu??micos revelaram que as diferen??as mais significativas entre as c??lulas f??ngicas de 6 h e 48 h ocorreram na regi??o de DNA e carboidratos. A aPDT promoveu mais altera????es bioqu??micas na regi??o de DNA e carboidratos em c??lulas de 6 h e em lip??dios e ??cidos graxos em c??lulas de 48 h. Nossos resultados indicam que a fase de crescimento celular desempenha papel importante no s??tio de a????o da aPDT em c??lulas de C. albicans.