Estudo e caracteriza????o de marcadores ??pticos para a aterosclerose

• Autor(a) principal: SICCHIERI, LETICIA B.
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/26949
• topic: rats; in vivo; bioassay; labelled compounds; biological markers; europium; tetracyclines; collagen; plasma; diagnosis; radiotherapy; arteriosclerosis; vascular diseases; arteries; emission; fluorescence; fluorescence spectroscopy; microscopy; comparative evaluations

O presente trabalho buscou investigar a forma????o da placa de aterosclerose atrav??s de caracteriza????o da autofluoresc??ncia do tecido e do plasma na presen??a de marcadores fluorescentes. Para realizar o estudo, coelhos foram divididos em dois grupos: um grupo controle onde os animais foram submetidos a uma dieta normal e um grupo experimental onde os animais foram submetidos a uma dieta hipercolesterol??mica. Foram realizadas duas experimenta????es animais: na primeira os animais foram sendo eutanasiados ao longo do experimento e suas art??rias foram coletadas. Na segunda os animais foram acompanhados por no m??ximo 80 dias. Durante o experimento apenas o sangue foi coletado e os animais foram eutanasiados no final do experimento. Dois marcadores fluorescentes foram utilizados no trabalho: o complexo eur??pio-clorotetraciclina (EuCTc) e o corante tioflavina T (ThT). Analisouse inicialmente a fluoresc??ncia dos marcadores na presen??a do plasma dos coelhos tanto para o grupo controle, quanto para o grupo experimental em fun????o dos tempos de dieta. Para o complexo EuCTc observou-se duas bandas de emiss??o, com excita????o em 400 nm, uma caracter??stica da clorotetraciclina, em 515 nm e uma em 617 nm caracter??stica do ??on eur??pio. A an??lise da banda do ??on eur??pio indicou um incremento da banda de emiss??o do complexo na presen??a do plasma do grupo experimental em rela????o ao grupo controle. Para o corante ThT tamb??m foi observado um aumento na banda de emiss??o em 480 nm, com excita????o em 413 nm, para o grupo experimental em compara????o com o grupo controle. A potencialidade de utiliza????o do complexo EuCTc e EuCTcMg (EuCTc na presen??a do ??on magn??sio) para marca????o da placa de aterosclerose nas art??rias, foi estudada atrav??s da an??lise de microscopia de fluoresc??ncia. Observou-se que a emiss??o do complexo melhora muito a visualiza????o da placa quando comparada com a autofluoresc??ncia. Observou-se, atrav??s de microscopia de tempo de vida de fluoresc??ncia, que h?? uma transfer??ncia de energia entre os fluor??foros presentes na placa e os complexos EuCTc e EuCTcMg. Essa transfer??ncia de energia ocasionou em uma diminui????o dr??stica no tempo de vida de fluoresc??ncia dos fluor??foros nessa regi??o. Por fim, estudou-se a gera????o de segundo harm??nico do col??geno na placa de aterosclerose, sendo obtidas diferen??as na quantidade e organiza????o do col??geno para os diferentes grupos experimentais.