Secrecao de hormonio de crescimento de camundongo por queratinocitos humanos primarios: perspectivas para um modelo animal de terapia genica cutanea

• Autor(a) principal: CECCHI, CLAUDIA R.
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/11725
• topic: gene therapy; proteins; keratin; mice; animal growth; animal cells; sth; epidermis

Queratin??citos s??o um ve??culo bastante atrativo para a transfer??ncia g??nica ex vivo e libera????o sist??mica uma vez que as prote??nas secretadas por estas c??lulas podem atingir a circula????o via um mecanismo similar ao processo natural. Um eficiente vetor retroviral (LXSN) contendo o gene do horm??nio de crescimento de camundongo (mGH) foi utilizado para transduzir queratin??citos humanos prim??rios. Os queratin??citos transduzidos apresentaram um n??vel de secre????o in vitro alto e est??vel atingindo at?? 11 g mGH/106 c??lulas/dia. Os epit??lios formados por estes queratin??citos geneticamente modificados apresentaram, por??m, uma queda na taxa de secre????o > 80 % quando foram retirados da placa de cultura utilizando um procedimento cl??ssico. A substitui????o desta metodologia cl??ssica por uma cultura organot??pica resolveu completamente este problema. Camundongos an??es imunodeficientes (lit/scid) implantados com estes enxertos organot??picos foram acompanhados durante 4 meses, e apresentaram um aumento de peso significativo (P<0,05) nos primeiros 40 dias. N??veis circulat??rios de mGH atingiram um pico de 21 ng/mL 1 h ap??s o implante, mas estes n??veis rapidamente atingiram n??veis basais (~2 ng/mL). Os queratin??citos humanos prim??rios apresentaram portanto altos n??veis de express??o in vitro e os maiores n??veis circulat??rios, por??m por um breve per??odo de tempo, reportados at?? o momento para GH neste tipo de c??lulas. Em conjunto com resultados que mostraram uma recupera????o consider??vel da efici??ncia de secre????o de mGH em cultura por enxertos organot??picos retirados dos animais, foram discutidos os fatores que ainda impedem a utiliza????o cl??nica deste modelo promissor de terapia g??nica cut??nea.