Express??o e caracteriza????o do horm??nio fol??culo estimulante (FSH) de pirarucu (Arapaima gigas)

• Autor(a) principal: SEVILHANO, THAIS C. dos A.
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/30182
• topic: fishes; fsh; gonadotropins; glycoproteins; polypeptides; hormones; pituitary gland; dna sequencers; dna repair; thermal utilization; high-performance liquid chromatography; computerized simulation

O Arapaima gigas, conhecido popularmente no Brasil como pirarucu, pertence ao grupo mais primitivo dos tele??steos, sendo um dos maiores peixes de ??gua doce da Am??rica do Sul. Desde os anos 40 informa????es divergentes t??m sido dadas em rela????o ao seu tamanho e peso m??ximo, por??m todas concordam com o fato de que se trata de uma esp??cie de grande porte, com exemplares pesando de 125 a 200 quilos e um comprimento de 2 a 3 metros. Sua carne ?? desprovida de espinhas e apresenta baixo teor de gordura. Os n??veis de rendimento da carca??a s??o elevados e o crescimento juvenil da esp??cie ?? consideravelmente r??pido. Por isso, o pirarucu, apresenta um atraente valor de mercado e grande import??ncia para o com??rcio de pescado amaz??nico. A pesca predat??ria tem reduzido significativamente a popula????o dessa esp??cie nas regi??es amaz??nicas ao longo dos anos. Sendo assim, desde os anos 2000, o pirarucu foi inclu??do na lista de animais sobre explorados ou em perigo de extin????o do IBAMA. A aus??ncia de um empreendimento de aquicultura capaz de produzir o pirarucu a pre??os competitivos, de forma previs??vel e em larga escala deve-se principalmente ao fato de que essa esp??cie, de um modo geral, apresenta dificuldades no processo reprodutivo em cativeiro, apresentando uma ovula????o, espermia????o e/ou matura????o final gonadal insatisfat??ria. O horm??nio fol??culo estimulante (FSH) ?? um horm??nio gonadotr??fico que exerce um papel importante na matura????o folicular inicial das g??nodas. Assim como os mam??feros, os peixes tamb??m apresentam horm??nios gonadotr??ficos (GTHs) heterodim??ricos, onde a subunidade ?? ?? comum entre os horm??nios pertencentes a essa fam??lia e a subunidade ?? determina a atividade hormonal espec??fica. As subunidades ?? e ?? do horm??nio fol??culo estimulante de Arapaima gigas (ag-FSH) foram previamente isoladas pelo nosso grupo de pesquisa ao longo dos anos e possibilitaram um estudo de modelagem tridimensional baseada nas sequ??ncias de amino??cidos obtidas. Paralelamente, foi realizada a express??o do ag-FSH recombinante com n??veis de rendimento satisfat??rios (28 mg/L) atrav??s da express??o em c??lulas de embri??o de rim humano (HEK 293), purificando-o e caracterizando-o a partir de t??cnicas cromatogr??ficas padronizadas pelo nosso grupo de pesquisa.