Determina????o de endotoxina bacteriana (pirog??nio) em radiof??rmacos pelo m??todo de forma????o de gel. Valida????o

• Autor(a) principal: FUKUMORI, NEUZA T.O.
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/11606
• topic: pyrogens; radiopharmaceuticals; validation

Antes do Ensaio do Lisado de Ameb??citos do Limulus (LAL), a ??nica forma de se avaliar a pirogenicidade em drogas parenterais e dispositivos m??dicos era o ensaio de pirog??nio em coelhos da Farmacop??ia Americana (USP). Especialmente para radiof??rmacos, o ensaio LAL ?? a escolha para a determina????o de endotoxina bacteriana (pirog??nio). O objetivo deste trabalho foi validar o m??todo de forma????o de gel para alguns radiof??rmacos sem uma interfer??ncia mensur??vel. O guia do m??todo LAL do Food and Drug Administration (FDA) define interfer??ncia como uma condi????o que causa uma diferen??a significativa entre os pontos finais de gelifica????o das s??ries de controle positivo da ??gua e controle positivo do produto utilizando-se um endotoxina padr??o. Os experimentos foram realizados de acordo com o teste de endotoxinas bacterianas da USP na m-iodobenzilguanidina-131I, nos radiois??topos G??lio-67 e T??lio-201, nos reagentes liofilizados DTPA, Fitato, GHA, SAH e Sn Coloidal. A M??xima Dilui????o V??lida (MDV) foi calculada para cada produto com base na sua dose cl??nica e dilui????es seriadas abaixo da MDV foram avaliadas em duplicata para a detec????o de interfer??ncias. A sensibilidade declarada do reagente de LAL foi de 0,125 UE mL-1 (Unidades de Endotoxina por mililitro). Para a valida????o, uma s??rie de dilui????es foi feita utilizando-se padr??o de endotoxina (PE) nas concentra????es de 0,5 a 0,03 UE mL-1 para a confirma????o da sensibilidade do reagente de LAL, em quadruplicata. A mesma s??rie de dilui????es foi feita com o PE e o produto dilu??do 100 vezes em tr??s lotes consecutivos de cada radiof??rmaco. Os produtos m-iodobenzilguanidina-131I, G??lio-67, T??lio-201, DTPA, SAH e Sn Coloidal foram compat??veis com o m??todo no fator de dilui????o 1:100. Fitato e GHA apresentaram interfer??ncia no ensaio de forma????o de gel. Outras t??cnicas para determinar endotoxinas como o ensaio cromog??nico (desenvolvimento de cor) e o turbidim??trico (desenvolvimento de turbidez) foram avaliadas para obter informa????es qualitativas e quantitativas sobre as concentra????es de endotoxinas nas amostras.