Aplicação de antigénio larvar de Toxocara canis no imunodiagnóstico da toxocarose humana

• Autor(a) principal: PEIXOTO, Cristiana Filipa Costa
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/53899
• topic: Parasitologia médica; Toxocarose humana; Larva migrante visceral; Imunodiagnóstico; Antigénio deslipidizado; micro- ELISA; Portugal; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A toxocarose humana é uma zoonose helmíntica de distribuição mundial, causada pela infeção de larvas no segundo estádio (L2) de Toxocara spp. e outros nemátodes da ordem Ascaridida, podendo desencadear, entre várias síndromes clínicas, a toxocarose visceral ou larva migrante visceral (LMV). O Homem, hospedeiro paraténico destes nemátodes, não elimina qualquer forma parasitária, tornando o diagnóstico desta zoonose dependente de uma combinação de sintomas suportados por uma serologia positiva e história epidemiológica. O método de referência no imunodiagnóstico da toxocarose baseia-se no uso de kits comerciais de micro-ELISA, que utilizam antigénios de excreção/secreção de larvas L2 de T. canis (Ag E/S) na deteção de anticorpos IgG anti-Toxocara spp. no soro humano. Embora de elevada sensibilidade, este método apresenta como desvantagens a ocorrência de reações cruzadas com anticorpos induzidos por outras infeções helmínticas, bem como o custo associado à sua aquisição. O objetivo deste estudo foi a obtenção de um método serológico sensível, específico e de custo reduzido, facilmente aplicável em rotina. Considerando que, à semelhança do que acontece com outros parasitas, a componente lipídica presente no antigénio de larvas L2 de T. canis poderá estar na origem das reações cruzadas entre helmintas, procedeu-se à obtenção de antigénio deslipidizado (AgDs). Avaliou-se a sensibilidade e especificidade do AgDs produzido in house de larvas L2 de T. canis no imunodiagnóstico da LMV pelo método de micro-ELISA, através da deteção de anticorpos IgG e IgG4, em comparação com o método de referência utilizado no laboratório de Helmintologia do Instituto de Higiene e Medicina Tropical, o kit Toxocara canis IgG-ELISA, Bioactiva Diagnostica (kit ELISA-IgG®). Foram testados 142 soros de indivíduos com suspeita de LMV, 25 de indivíduos com outras helmintoses e 6 de indivíduos normais. Os resultados demonstraram uma concordância significativa do AgDs com o kit ELISAIgG ®, apenas na deteção de anticorpos IgG anti-Toxocara spp. (Kappa=0,168; pvalue< 0,05). A sensibilidade do AgDs foi inferior à do kit ELISA-IgG®, sendo de 42,9% e de 22,6% na deteção de anticorpos IgG e IgG4, respetivamente. A especificidade foi inferior à do kit ELISA-IgG® na deteção de anticorpos IgG (72% e 76%, respetivamente), no entanto foi superior na deteção de IgG4 (80%) em relação ao kit. O menor número de resultados falsos positivos verificados com este isótipo, em comparação com a IgG, corrobora estudos publicados acerca do seu valor no imunodiagnóstico desta e de outras helmintoses. A infeção foi predominante no sexo masculino (60,7%), verificando-se diferenças estatisticamente significativas apenas com o kit ELISA-IgG® (χ2, p≈0,008 <0,05) em relação ao género. Quanto ao grupo etário, a distribuição da infeção foi predominante nos indivíduos com idade inferior a 10 anos (em todos os testes de micro- ELISA), mas as diferenças não apresentaram significado estatístico relativamente aos grupos de idade superior. Neste estudo, a especificidade do kit ELISA-IgG® foi inferior à descrita pelo fabricante, registando reações cruzadas com soros de indivíduos com filariose, schistosomose e fasciolose, realçando a fragilidade dos métodos aplicados em rotina bem como a necessidade de investigação, sobretudo com vista à obtenção de preparações antigénicas de maior especificidade.