Caracterização do transcritoma de Staphylococcus aureus ATCC® 25923™ exposto à clorexidina

• Autor(a) principal: ZACHARIAS, Paula Regina Aparecida
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/159189
• topic: Microbiologia médica; Staphylococcus aureus; Biocidas; RNA-seq; Clorexidina,; Brometo de etídeo; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

RESUMO A espécie Staphylococcus aureus é um agente patogénico relevante no Homem e em animais de companhia, em particular gatos e cães, sendo um agente frequente de infeções da pele e tecidos moles. A terapêutica destas infeções na medicina humana e veterinária envolve o recurso a biocidas de uso tópico (antissépticos). A resistência aos antimicrobianos em S. aureus é uma ameaça global com consequências devastadoras a nível da escassez de recursos terapêuticos para a população humana e animal. O uso intensivo de biocidas na prática clínica humana e veterinária pode também exercer uma pressão adicional para a emergência da resistência. No entanto, o modo de ação e mecanismos de resistência aos biocidas são ainda pouco conhecidos. De forma a compreender melhor o mecanismo de ação da clorexidina e de emergência de suscetibilidade reduzida a este biocida, o presente trabalho teve como objetivo identificar as vias metabólicas e os genes diferencialmente expressos em S. aureus exposto à clorexidina e ao brometo de etídeo, ambos substratos de bombas de efluxo em estafilococos. Para isso, os objetivos específicos foram: 1) Exposição, por ensaios time-kill, da estirpe S. aureus ATCC® 25923™ a diferentes concentrações de clorexidina e tempos de exposição, comparando a sua atividade com a de dois outros biocidas, iodopovidona e cloreto de benzalcónio; 2) Sequenciação de RNA total de S. aureus ATCC® 25923™ não exposto e exposto à clorexidina; 3) Análise do transcritoma usando ferramentas bioinformáticas e identificação de genes e vias metabólicas ativadas pela exposição à clorexidina e ao brometo de etídeo. A exposição à clorexidina e ao brometo de etídeo alterou a expressão de genes cujos produtos participam nas seguintes funções moleculares: a) atividade catalítica, b) ligação, c) transportador, d) regulador da transcrição, e) atividade dependente do ATP (Trifosfato de adenosina), f) atividade estrutural da molécula, e g) atividade de tradução molecular. Além disso, a exposição à clorexidina e ao brometo de etídeo favorece uma sobre-representação da via da biossíntese de purinas em S. aureus ATCC® 25923™, quando comparadas com o esperado para a estirpe homóloga S. aureus NCTC 8325. No caso específico da exposição ao brometo de etídeo, foi também possível identificar sobre representação das vias da biossíntese de pirimidinas e da biossíntese de triptofano, quando comparada com a estirpe homóloga. Este estudo traz novo conhecimento sobre as vias celulares alteradas após exposição de S. aureus ATCC® 25923™ à clorexidina, um biocida usado comummente em medicina humana e animal. Este conhecimento pode conduzir a uma melhor compreensão de como S. aureus responde e persiste na presença do estresse originado por clorexidina.