Imunolocalização de proteínas das vias de apoptose em gónadas de peixe-zebra (Danio rerio) durante o período de diferenciação sexual
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2015 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10348/5564 |
Resumo: | O peixe-zebra é considerado uma espécie gonocórica indiferenciada em que os juvenis, independentemente do sexo genotípico, apresentam durante o desenvolvimento inicial da gónada uma estrutura denominada por ovário juvenil que, posteriormente, passa por um processo de diferenciação sexual. Nas fêmeas, os oócitos iniciam o processo de maturação a partir dessa estrutura inicial. Nos machos, a diferenciação em testículo começa entre os 20 a 25 dias pós-eclosão e a maioria dos oócitos desaparecem da gónada por volta dos 35 dias pós-fertilização (dpf), iniciando-se a diferenciação testicular. Até ao momento não se conhece bem o mecanismo que afeta a determinação sexual no peixe-zebra, mas sabe-se que a degradação dos oócitos ocorre por apoptose, também designado por morte celular programada. A apoptose pode ser desencadeada por diversos estímulos fisiológicos internos e externos sendo influenciada pela expressão de vários genes que codificam proteínas com diversas funções, entre elas encontram-se a Bcl-2, Mdm2 e Birc5. Bcl-2 é uma proteína anti-apoptótica envolvida na via intrínseca. A Mdm2 é um regulador negativo da p53 que, através de feedback negativo, pode inibir ou não a atividade da p53. O Birc5 pertence a família das proteínas inibidoras da apoptose que desempenha um papel importante tanto na inibição da apoptose como na proliferação celular. No presente estudo foi efetuada a análise histológica, assim como a análise de imuno-histoquímica da Bcl-2, Mdm2 e Birc5. Aos 35 dpf, os peixe-zebra apresentavam as gónadas em diferenciação sexual. A análise das características morfológicas da gónada permitiu identificar 4 tipos de desenvolvimento. Assim, os indivíduos observados foram classificados como fêmeas, machos tipo III, machos tipo II e machos tipo I. De um modo geral foi observada marcação das três proteínas nas gónadas. Contudo, apresentando expressão diferencial, essencialmente entre fêmeas e machos. O composto fadrozole influenciou o processo de diferenciação sexual direcionando para o sexo masculino. Em conclusão, as três proteínas em estudo estão presentes nas gónadas durante a diferenciação sexual. |
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Imunolocalização de proteínas das vias de apoptose em gónadas de peixe-zebra (Danio rerio) durante o período de diferenciação sexualPeixe-Zebra (Danio rerio)ApoptoseDiferenciação sexualO peixe-zebra é considerado uma espécie gonocórica indiferenciada em que os juvenis, independentemente do sexo genotípico, apresentam durante o desenvolvimento inicial da gónada uma estrutura denominada por ovário juvenil que, posteriormente, passa por um processo de diferenciação sexual. Nas fêmeas, os oócitos iniciam o processo de maturação a partir dessa estrutura inicial. Nos machos, a diferenciação em testículo começa entre os 20 a 25 dias pós-eclosão e a maioria dos oócitos desaparecem da gónada por volta dos 35 dias pós-fertilização (dpf), iniciando-se a diferenciação testicular. Até ao momento não se conhece bem o mecanismo que afeta a determinação sexual no peixe-zebra, mas sabe-se que a degradação dos oócitos ocorre por apoptose, também designado por morte celular programada. A apoptose pode ser desencadeada por diversos estímulos fisiológicos internos e externos sendo influenciada pela expressão de vários genes que codificam proteínas com diversas funções, entre elas encontram-se a Bcl-2, Mdm2 e Birc5. Bcl-2 é uma proteína anti-apoptótica envolvida na via intrínseca. A Mdm2 é um regulador negativo da p53 que, através de feedback negativo, pode inibir ou não a atividade da p53. O Birc5 pertence a família das proteínas inibidoras da apoptose que desempenha um papel importante tanto na inibição da apoptose como na proliferação celular. No presente estudo foi efetuada a análise histológica, assim como a análise de imuno-histoquímica da Bcl-2, Mdm2 e Birc5. Aos 35 dpf, os peixe-zebra apresentavam as gónadas em diferenciação sexual. A análise das características morfológicas da gónada permitiu identificar 4 tipos de desenvolvimento. Assim, os indivíduos observados foram classificados como fêmeas, machos tipo III, machos tipo II e machos tipo I. De um modo geral foi observada marcação das três proteínas nas gónadas. Contudo, apresentando expressão diferencial, essencialmente entre fêmeas e machos. O composto fadrozole influenciou o processo de diferenciação sexual direcionando para o sexo masculino. Em conclusão, as três proteínas em estudo estão presentes nas gónadas durante a diferenciação sexual.The zebrafish is considered an undifferentiated gonochoric species, in which the juveniles, regardless of the genotypic sex present during the early development of the gonads by a structure termed juvenile ovarian, which subsequently undergoes a sexual differentiation process. In females, the oocytes begin the maturation process from that initial structure. In males, the testicle differentiation begins between 20 and 25 days post-hatching and most oocytes disappear from gonads by around 35 days post fertilization (dpf), starting testicular differentiation. So far no knows the mechanism affecting sex determination in zebrafish, but it is known that the degradation of the oocytes occurs by apoptosis, also known as programmed cell death. Apoptosis can be triggered by various internal and external physiological stimuli being influenced by the expression of several genes encoding proteins with diverse functions, among them are the Bcl-2, Mdm2 and Birc5. Bcl-2 is an anti-apoptotic protein that influences the intrinsic pathway. Mdm2 p53 is a negative regulator via a negative feedback or not can inhibit p53 activity. The Birc5 belongs to the family of inhibitors of apoptosis proteins that play an important role in both apoptosis and inhibition of cell proliferation. In the present study was conducted histological analysis by hematoxylin-eosin, and immunohistochemistry analysis of Bcl-2, Birc5 and Mdm2. At 35 dpf the gonad was in sexual differentiation, through the analysis of their morphological characteristics, it was possible to split our sample into 4 types of designated female development, males type III, type II males and males type I. In general the three proteins were imunolocated in the gonads. However, a differential staining intensity was observed between females and males. Fadrozole exposure interfered with the gonad differentiation process towards males. In conclusion, the three studied proteins are present in the zebrafish gonads during the sexual differentiation period.2016-02-24T14:04:37Z2015-01-01T00:00:00Z2015info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10348/5564pormetadata only accessinfo:eu-repo/semantics/openAccessMendonça, Marisa Alexandra da Silvareponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-02-02T12:56:12Zoai:repositorio.utad.pt:10348/5564Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T02:06:19.001367Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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