Biodiversidade e hipovirulência de Cryphonectria parasitica na Região do Entre Douro e Minho : implicações para o controlo biológico do cancro do castanheiro

• Autor(a) principal: Martins, Ana Rita Pereira
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/20.500.11960/2322
• topic: Castanheiro; Cryphonectia Hypovirus 1 (CHV1); Cryphonectria parasitica; VCtypes; Chestnut tree

O cancro do castanheiro causado por Cryphonectria parasitica, afeta severamente o castanheiro europeu (Castanea sativa) provocando elevados prejuízos em todo o setor da castanha e do castanheiro em Portugal. O controlo desta doença tem sido difícil devido à ausência de tratamentos eficazes. A luta biológica por hipovirulência tem demonstrado bons resultados no tratamento da doença, através da disseminação de Cryphonectia Hypovirus 1 (CHV1), presente nas estirpes hipovirulentas. Contudo, é necessário que se conheça previamente a estrutura populacional de C. parasitica e que se identifiquem os grupos de compatibilidade vegetativa (VCtypes) presentes em cada souto. O objetivo deste trabalho foi isolar e estudar as características biológicas da população de C. parasitica e de possíveis estirpes hipovirulentas, presente em 4 soutos da região do Entre Douro e Minho, localizados em Ponte de Lima, Ponte da Barca e Arcos de Valdevez. O estudo da diversidade e da prevalência das populações de C. parasitica no Minho, e a deteção e identificação do vírus CHV1 será determinante para avaliar a possibilidade de aplicação de estirpes hipovirulentas como meio de luta preferencial contra a doença no Minho. Foi realizada uma amostragem para a recolha de material em cancros virulentos e em cancros curados e avaliado o grau de severidade da doença em 2018 e 2019. Todos os soutos apresentavam sintomas de cancro, mas também se observou a existência de muitos cancros curados. Os soutos mais afetados pela doença foram o de Oleiros (Ponte da Barca) e o de Cepões (Ponte de Lima). O souto de Cendufe (Arcos de Valdevez) apresentava metade das árvores amostradas com cancros curados por hipovirulência natural. Apesar de se terem observado muitos cancros curados, não se conseguiu em laboratório isolar estirpes hipovirulentas e a pesquisa de hipovírus (CHV1) não foi possível. Os isolados virulentos de C. parasitica obtidos foram caracterizados morfologicamente, demonstrando uma grande variabilidade quanto à forma de crescimento e coloração do micélio. A maioria dos isolados apresentava crescimento regular e coloração laranja do micélio. A determinação de VCtypes de C. parasitica dos isolados obtidos, por paramento com cinco isolados europeus de referência (EU01, EU02, EU11, EU12 e EU66) considerados os mais frequentes em Portugal, mostrou a existência dos 5 VCtypes. O VCtype mais representativo nos soutos do Minho estudados em 2018/2019 é o EU11 (48%), seguido do EU01 (11%). EU12, EU02 e EU 66 têm baixa representatividade, respetivamente de 6%, 5% e 3% dos isolados. Contudo, 27% do total dos isolados obtidos não foram incluídos em nenhum dos 5 grupos europeus testados. Depois do paramento entre estes isolados foram detetados pelo menos 12 VCtypes diferentes, o que indica que a diversidade de VCtypes é muito elevada no Minho, o que pode constituir um obstáculo à introdução da hipovirulência como meio de luta biológica para tratamento de cancros. Os soutos de Cendufe e Oleiros apresentam baixa diversidade populacional, sendo que, a maior percentagem dos isolados pertencem ao grupo EU11, 82% e 79% respetivamente. Nos soutos de Castro e Cepões verificou-se uma elevada percentagem de isolados que não foram incluídos em nenhum grupo de compatibilidade em estudo, 54% e 43% respetivamente. Em Castro, o grupo de compatibilidade mais significativo foi o EU01 (20%) e em Cepões foi o grupo EU11 (23%). A caracterização metabólica de isolados virulentos e hipovirulentos C. parasitica usando microplacas Biolog FF permitiu avaliar os perfis metabólicos da utilização de 95 fontes de carbono diferentes. Os resultados mostraram que à exceção do isolado virulento EU01 todos os restantes isolados virulentos apresentaram maior intensidade na utilização de compostos, relativamente aos isolados hipovirulentos. De uma maneira geral, os hidratos de carbono foram os compostos mais utilizados por todas as estirpes. O estudo da estrutura populacional de C. parasitica é fundamental para compreender os fatores que determinaram a sua presença e dispersão, bem como contribuir para tornar a hipovirulência um meio de luta biológica eficaz no controlo da doença noutras regiões. Os resultados obtidos indicam a necessidade de estudos mais aprofundados essenciais para a compreensão dos fatores e mecanismos associados à dispersão natural de hipovírus nos soutos, nas condições de produção do Minho.