Tolerância à vancomicina em Enterococcus faecalis: papel de proteínas hipotéticas

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Sofia Alexandra Muchacho
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/2527
Resumo: Dissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e Tecnologia
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spelling Tolerância à vancomicina em Enterococcus faecalis: papel de proteínas hipotéticasDissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e TecnologiaEnterococcus faecalis é um agente patogénico oportunista e um dos principais responsáveis por infecções nosocomiais. A sua virulência é multifactorial e ainda pouco compreendida. 36 % do genoma de E. faecalis V583 está anotado como genes que codificam proteínas hipotéticas ou de função desconhecida (PHFD). Estudos de transcriptómica têm sugerido a implicação destes genes na resposta a vários stresses em E. faecalis. No entanto, não têm existido muitas tentativas para atribuir uma função a estes genes. Num estudo efectuado anteriormente com V583 submetido a uma dose terapêutica de vancomicina (10 μg.mL-1) observou-se que 50 % dos genes cuja transcrição foi afectada codificam para PHFD. No presente estudo, seleccionaram-se alguns destes genes (EF0802, EF1231, EF1813, EF2292 e EF2896) que apresentaram um aumento mais marcante nos níveis de expressão. Os resultados dos microarrays para os genes referidos foram confirmados por RT-PCR semi-quantitativo, mais uma vez sugerindo um papel para estes genes na resposta de E. faecalis à vancomicina. Procedeu-se à expressão das proteínas hipotéticas codificadas por aqueles genes em E. coli e à construção de mutantes. Estes mutantes encontram-se em fases diferentes de construção e até ao momento foi possível obter o mutante do EF2292. Este não revelou alterações no fenótipo de resistência à vancomicina, comportando-se de forma idêntica à estirpe selvagem. Quanto à expressão das proteínas hipotéticas EF1231 e EF2292, está em curso a optimização das condições para purificação e obtenção da sua estrutura. Este trabalho constitui um passo no sentido de tornar conhecido o que é ainda desconhecido no genoma e comportamento de E. faecalis.FCT - UNLLopes, Maria de FátimaMarujo, PauloLudovice, AnaRUNSantos, Sofia Alexandra Muchacho2010-01-26T11:38:00Z20092009-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10362/2527porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-03-11T03:32:45Zoai:run.unl.pt:10362/2527Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T03:15:11.443387Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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