Application of optimization methods to the 2D liquid chromatography

• Autor(a) principal: Paula, Andreia Santos
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/12050
• topic: Química analítica - Teses de mestrado; Cromatografia líquida; Quimiometria; Separação cromatográfica; Vinho

Esta dissertação teve como principal objectivo a aplicação de metodologias quimiométricas de otimização em cromatografia líquida bidimensional abrangente (LC×LC) por forma a determinar as condições ótimas para a separação de amostras de vinho tinto português. Para este estudo, foi utilizada, na primeira dimensão, uma fase estacionária de modo misto de fase reversa/troca aniónica (Acclaim® Mixed-Mode WAX-1, denominação em inglês) e, na segunda dimensão, uma fase reversa de octadecilsílica (C18). O LC×LC foi acoplado a um detector de fotodíodos, a operar na gama de comprimentos de onda de 221 a 400 nm. O modo de eluição por gradiente foi adotado para ambas as dimensões cromatográficas. O planeamento experimental D-Optimal foi considerado o mais adequado para a otimização na primeira dimensão, tendo permitido identificar entre um conjunto de 6 variáveis experimentais (% MeoHi, [Buffer]i, ti, % MeOHf, [Buffer]f, and tf), quais as mais importantes que afetam a qualidade de separação cromatográfica, em termos unidimensionais, de uma amostra composta de vinhos tintos portugueses. A qualidade de separação cromatográfica foi avaliada utilizando uma função de resposta cromatográfica (CRF, sigla inglesa para “chromatographic response function”) previamente desenvolvida por Duarte & Duarte (2010) (DCRF), concluindo-se que as variáveis mais importantes são % MeOHi and % MeOHf. A otimização da separação na segunda dimensão foi efectuada utilizando já o sistema LC×LC, e recorrendo ao método Simplex para o estudo das duas variáveis mais importantes que afectam a eluição por gradiente numa coluna de fase reversa C18: % MeOHi and % MeOHf na fase móvel. A qualidade de separação cromatográfica bidimensional foi avaliada utilizando uma CRF previamente desenvolvida por Duarte et al. (2010) (DCRFf,2D). Nas condições ótimas estimadas para a aplicação da técnica de Mixed-Mode WAX-1×C18, para a separação de uma amostra representativa dos vinhos tintos portugueses seleccionados, foram registados 59 picos no espaço cromatográfico, em 150 minutos de tempo total de análise. Utilizando as condições de separação cromatográfica previamente otimizadas, efectuou-se a análise de 4 amostras de vinho tinto português a fim de se verificar a existência, para posterior comparação, de perfis cromatográficos diferentes.