Avaliação da função mitocondrial em idosos institucionalizados com e sem doença de Alzheimer
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10348/7587 |
Resumo: | A longevidade dos países desenvolvidos aumentou e com isso a frequência de doenças degenerativas. A doença de Alzheimer (DA) tem uma incidência elevada (60 a 70%) e é caracterizada por uma deterioração progressiva do cérebro associada à acumulação de placas amilóides e emaranhados neurofibrilares (Oddo, 2012). A DA causa deterioração progressiva e irreversível de diversas funções cognitivas, incluindo a memória, atenção, concentração, linguagem, pensamento e comportamento (Queimaduras & Iliffe, 2009). A perda de autonomia do idoso é agravada nos casos de DA, que muitas vezes culmina em institucionalização. Embora o principal fator de risco para a DA seja a idade, o processo distingue-se do envelhecimento normal. Apesar de existirem alterações e manifestações comuns, provavelmente apoiadas por alterações moleculares e celulares semelhantes, no processo de envelhecimento do cérebro do estas são agravadas. A literatura tem atribuído um papel importante ao stress oxidativo e às alterações mitocondriais seja no processo de envelhecimento ou na DA. Assim, este estudo tem como objetivo compreender as mudanças na função mitocondrial associadas ao processo de envelhecimento normal e na DA. A amostra foi composta por 14 indivíduos sem demência (80,5±7,7 anos de idade) e 11 DA (83,2±7,7 anos de idade). Todos os sujeitos eram institucionalizados e o diagnóstico da DA foi confirmado por um médico Neurologista. Após 9 horas de jejum, 10 ml de sangue foram recolhidos por punção venosa em tubos com K3EDTA e sistema de vácuo e em seguida centrifugou-se para separar o soro, e para obter linfócitos e plasma. A função mitocondrial [respiração em estado 3 e em estado 4, e taxa de controle respiratório (RCR = estado 3 / estado 4)] foram medidos em linfócitos no OROBOROS, de acordo com os procedimentos do equipamento. A peroxidação lipídica foi determinada no plasma pela concentração de produtos de reação ao ácido tiobarbiturico (TBARs) por método espetrofotométrico. O teor de proteína foi determinado pelo método de biureto. Para comparar os valores médios de ambos os grupos, foi utilizado o t-teste para amostras independentes. O nível de significância foi fixado em 0,05. Os resultados obtidos não permitiram encontrar diferenças significativas entre os grupos na respiração mitocôndrias nos estados 3 (1.77±0.67 e 1.80 ±1.07 nmolO2/min/10 6 para normal e DA, respetivamente) e 4 (0.56±0.33 e 1,55 ±0.77 nmolO2/min/10 6 para indivíduos normais e DA, respetivamente). Foram encontradas alterações significativas entre os grupos na RCR (3.76±1.54 e 2.33±1.36 para o normal e DA, respetivamente) (t = 2,553; p = 0,017) e na concentração de TBARs no plasma (15.796±4.098 e 11.169±4.459 nmol/mg de proteína para os idosos sem demência e DA, respetivamente ) (t = 2,230; p = 0,041). Estes resultados revelaram que, comparativamente com DA, os indivíduos sem demência evidenciam mitocôndrias mais "saudáveis", uma vez que apresentam alta taxa de controle respiratório (RCR). No entanto, a quantidade de danos por stress oxidativo (TBARS) foi maior nos idosos sem demência, possivelmente devido à influência de outras variáveis que não foram consideradas (medicação, dieta e atividade física diária). |
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Apesar de existirem alterações e manifestações comuns, provavelmente apoiadas por alterações moleculares e celulares semelhantes, no processo de envelhecimento do cérebro do estas são agravadas. A literatura tem atribuído um papel importante ao stress oxidativo e às alterações mitocondriais seja no processo de envelhecimento ou na DA. Assim, este estudo tem como objetivo compreender as mudanças na função mitocondrial associadas ao processo de envelhecimento normal e na DA. A amostra foi composta por 14 indivíduos sem demência (80,5±7,7 anos de idade) e 11 DA (83,2±7,7 anos de idade). Todos os sujeitos eram institucionalizados e o diagnóstico da DA foi confirmado por um médico Neurologista. Após 9 horas de jejum, 10 ml de sangue foram recolhidos por punção venosa em tubos com K3EDTA e sistema de vácuo e em seguida centrifugou-se para separar o soro, e para obter linfócitos e plasma. A função mitocondrial [respiração em estado 3 e em estado 4, e taxa de controle respiratório (RCR = estado 3 / estado 4)] foram medidos em linfócitos no OROBOROS, de acordo com os procedimentos do equipamento. A peroxidação lipídica foi determinada no plasma pela concentração de produtos de reação ao ácido tiobarbiturico (TBARs) por método espetrofotométrico. O teor de proteína foi determinado pelo método de biureto. Para comparar os valores médios de ambos os grupos, foi utilizado o t-teste para amostras independentes. O nível de significância foi fixado em 0,05. Os resultados obtidos não permitiram encontrar diferenças significativas entre os grupos na respiração mitocôndrias nos estados 3 (1.77±0.67 e 1.80 ±1.07 nmolO2/min/10 6 para normal e DA, respetivamente) e 4 (0.56±0.33 e 1,55 ±0.77 nmolO2/min/10 6 para indivíduos normais e DA, respetivamente). Foram encontradas alterações significativas entre os grupos na RCR (3.76±1.54 e 2.33±1.36 para o normal e DA, respetivamente) (t = 2,553; p = 0,017) e na concentração de TBARs no plasma (15.796±4.098 e 11.169±4.459 nmol/mg de proteína para os idosos sem demência e DA, respetivamente ) (t = 2,230; p = 0,041). Estes resultados revelaram que, comparativamente com DA, os indivíduos sem demência evidenciam mitocôndrias mais "saudáveis", uma vez que apresentam alta taxa de controle respiratório (RCR). No entanto, a quantidade de danos por stress oxidativo (TBARS) foi maior nos idosos sem demência, possivelmente devido à influência de outras variáveis que não foram consideradas (medicação, dieta e atividade física diária).The longevity of the developed countries has increased and with it the frequency of degenerative diseases. Alzheimer's disease (AD) has a high incidence (60 to 70%) and is characterized by a progressive deterioration of the brain associated with the accumulation of amyloid plaques and neurofibrillary tangles (Oddo, 2012). AD causes progressive and irreversible deterioration of various cognitive functions, including memory, attention, concentration, language, thinking and behaviour (Burns & Iliffe, 2009). The loss of autonomy of the elderly is aggravated in the cases of AD, which often culminates in institutionalization. While the major risk factor for AD is age, the process is distinguished from normal aging. Although there are common changes and manifestations, probably supported by similar molecular and cellular changes, in AD brain aging process is aggravated. Literature have attributed an important role to oxidative stress and mitochondrial alterations either in the aging process or the AD. Thus, this study aims to understand the changes associated with normal aging process in mitochondria function and to identify some of the key differences in individuals with AD. MethodsThe sample was composed by 14 normal old subjects (80.57.7 years) and 11 AD (83.27.7 years) participated in this study. All the subjects were institutionalized and the diagnose of AD was in charge of a clinical Neurologist. After 9 hours of fasting condition, 10ml of of blood were collected by venous puncture into the vacuum K3EDTA tubes and then centrifuged to separate serum, and to obtain lymphocytes. Mitochondria function [respiration in state 3 and state 4, and respiratory control ratio (RCR=state 3/state 4)] were measured in lymphocytes cells in OROBOROS, according to the equipment procedures. Malondialdehyde Lipid peroxidation (Thiobarbituric reaction products, TBARs) was assayed in plasma samples by spectrophotometic method. Protein content was determined by Biureto method. To compare average values of both groups, a t-test for independent samples was used. Significance level was set a 0.05. The obtained results failed to found significant differences between groups in mitochondria respiration in states 3 (1.770.67 and 1.80 1.07 nmolO2/min/10 6 for normal and AD, respectively) and 4 (0.560.33 and 1.55 0.77 nmolO2/min/10 6 for normal and AD subjects, respectively). Significant changes between groups were found in RCR (3.761.54 and 2.331.36 for normal and AD, respectively) (t=2.553; p=0.017) and in plasma TBARS (15.7964.098 and 11.1694.459 nmol/mg of protein for normal and AD, respectively) (t=2.230; p=0.041). These results revealed that comparatively with AD, normal aged subjects evidence “healthy” mitochondria once they show high respiratory control (RCR). Nevertheless, the amount of oxidative stress damage (MDA) was higher in normal old subjects, possibly due to the influence of other unconsidered variables (medication, diet and daily physical activity).2017-05-05T18:08:47Z2017-05-05T00:00:00Z2017-05-05info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10348/7587TID:202031446porGabriel, Cecíliainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-03-24T04:37:43Zoai:repositorio.utad.pt:10348/7587Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openairemluisa.alvim@gmail.comopendoar:71602024-03-24T04:37:43Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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A longevidade dos países desenvolvidos aumentou e com isso a frequência de doenças degenerativas. A doença de Alzheimer (DA) tem uma incidência elevada (60 a 70%) e é caracterizada por uma deterioração progressiva do cérebro associada à acumulação de placas amilóides e emaranhados neurofibrilares (Oddo, 2012). A DA causa deterioração progressiva e irreversível de diversas funções cognitivas, incluindo a memória, atenção, concentração, linguagem, pensamento e comportamento (Queimaduras & Iliffe, 2009). A perda de autonomia do idoso é agravada nos casos de DA, que muitas vezes culmina em institucionalização. Embora o principal fator de risco para a DA seja a idade, o processo distingue-se do envelhecimento normal. Apesar de existirem alterações e manifestações comuns, provavelmente apoiadas por alterações moleculares e celulares semelhantes, no processo de envelhecimento do cérebro do estas são agravadas. A literatura tem atribuído um papel importante ao stress oxidativo e às alterações mitocondriais seja no processo de envelhecimento ou na DA. Assim, este estudo tem como objetivo compreender as mudanças na função mitocondrial associadas ao processo de envelhecimento normal e na DA. A amostra foi composta por 14 indivíduos sem demência (80,5±7,7 anos de idade) e 11 DA (83,2±7,7 anos de idade). Todos os sujeitos eram institucionalizados e o diagnóstico da DA foi confirmado por um médico Neurologista. Após 9 horas de jejum, 10 ml de sangue foram recolhidos por punção venosa em tubos com K3EDTA e sistema de vácuo e em seguida centrifugou-se para separar o soro, e para obter linfócitos e plasma. A função mitocondrial [respiração em estado 3 e em estado 4, e taxa de controle respiratório (RCR = estado 3 / estado 4)] foram medidos em linfócitos no OROBOROS, de acordo com os procedimentos do equipamento. A peroxidação lipídica foi determinada no plasma pela concentração de produtos de reação ao ácido tiobarbiturico (TBARs) por método espetrofotométrico. O teor de proteína foi determinado pelo método de biureto. Para comparar os valores médios de ambos os grupos, foi utilizado o t-teste para amostras independentes. O nível de significância foi fixado em 0,05. Os resultados obtidos não permitiram encontrar diferenças significativas entre os grupos na respiração mitocôndrias nos estados 3 (1.77±0.67 e 1.80 ±1.07 nmolO2/min/10 6 para normal e DA, respetivamente) e 4 (0.56±0.33 e 1,55 ±0.77 nmolO2/min/10 6 para indivíduos normais e DA, respetivamente). Foram encontradas alterações significativas entre os grupos na RCR (3.76±1.54 e 2.33±1.36 para o normal e DA, respetivamente) (t = 2,553; p = 0,017) e na concentração de TBARs no plasma (15.796±4.098 e 11.169±4.459 nmol/mg de proteína para os idosos sem demência e DA, respetivamente ) (t = 2,230; p = 0,041). Estes resultados revelaram que, comparativamente com DA, os indivíduos sem demência evidenciam mitocôndrias mais "saudáveis", uma vez que apresentam alta taxa de controle respiratório (RCR). No entanto, a quantidade de danos por stress oxidativo (TBARS) foi maior nos idosos sem demência, possivelmente devido à influência de outras variáveis que não foram consideradas (medicação, dieta e atividade física diária). |
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