Otimização do fracionamento do efluente da cortiça recorrendo a tecnologia de membranas e estudo dos seus potenciais biológicos
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2018 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10400.21/10157 |
Resumo: | Trabalho final de mestrado para obtenção do grau de mestre em Engenharia Química e Biológica |
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Otimização do fracionamento do efluente da cortiça recorrendo a tecnologia de membranas e estudo dos seus potenciais biológicosMembranasMembranesUltrafiltraçãoUltrafiltrationEfluente da cortiçaCork wastewaterFrações do efluenteWastewater fractionsCompostos fenólicosPhenolic compoundsAtividade antioxidanteAntioxidant activityAcetilcolinesteraseAcetylcholinesteraseFotoproteçãoPhotoprotectionTrabalho final de mestrado para obtenção do grau de mestre em Engenharia Química e BiológicaA incidência de doenças oncológicas e degenerativas do sistema nervoso tem vindo ao aumentar com os anos, devido ao crescente contacto com produtos tóxicos, com isto em mente muitos processos têm sido desenvolvidos de forma a combatê-las. Um dos processos consiste na utilização de efluente proveniente da indústria corticeira, sendo este rico em compostos orgânicos mais propriamente compostos fenólicos, conhecidos por apresentarem elevadas capacidade antioxidantes e protetoras. De modo a melhorar os potenciais biológicos do efluente, este foi fracionado em várias frações de tamanhos moleculares diferentes: fração leve, fração pesada e fração média, constituídas por compostos com dimensões inferiores a 9,56 kDa, superiores a 65,48 kDa e dimensões entre os 9,52 kDa e os 65,48 kDa, respetivamente. Para tal, recorreu-se à tecnologia de membranas de ultrafiltração, operando em modo de diafiltração e concentração. As diferentes membranas foram preparadas recorrendo ao método de inversão de fases, usando soluções poliméricas com diferentes conteúdos de acetato de celulose (polímero), formamida (promotor de poros) e acetona (solvente). Onde foram produzidas duas membranas com limites de exclusão molecular de 65,48 kDa e 9,52 kDa. O efluente e as frações obtidas foram caracterizados utilizando o método da cromatografia líquida de elevada resolução (HPLC-DAD), o do Folin-Ciocalteu (quantificação dos fenóis), o do DPPH (atividade antioxidante), o do TBARS (inibição da peroxidação lipídica) e ainda se analisou a capacidade de inibição da acetilcolinesterase. Sendo que na sua maioria a fração pesada apresentou melhores valores, 0,176 ± 0,065 mg/mg de extrato de fenóis totais, 0,085 ± 0,009 mg/mg de extrato de taninos, um EC50 de 21,97 ± 6,38 μg/mL e um AC50 0,342 ± 3,449 mg/mL. Os compostos identificados e caracterizados através do HPLC-DAD foram o ácido quinico, gálico, carboxílico de brevifolina, protocatecuico, vanílico, siríngico e elágico. Foram realizados ensaios em linhas celulares do cancro do fígado (HEP-G2) e do Melanoma da pele (A375). Determinando a citotoxicidade dos compostos e o potencial de proteção da fração pesada contra agentes oxidantes (H2O2 e TBHP) e físicos (radiação UV) nas células A375. Por fim, as células A375 foram visualizadas através da microscopia eletrónica de varrimento (SEM) e de fluorescência, na presença e ausência da fração.The occurrence of oncological diseases and degenerative diseases has been increasing over the years due to increasing contact with toxic products. Due to this, many processes have been developed to combat them. One of the processes consists in the use of effluent from the cork industry, which are rich in organic compounds like phenolic compounds, known to have high antioxidant and anticancer properties. To improve the biological potentials of the effluent, it was fractionated into several fractions of different molecular sizes: light fraction, heavy fraction and average fraction, composed of compounds smaller than 9.56 kDa, higher than 65.48 kDa and dimensions between the 9.52 kDa and 65.48 kDa, respectively. For this, the technology of ultrafiltration membranes composed of cellulose acetate, formamide and acetone was used. Where two CA36.5 and CA28 membranes were produced with molecular exclusion limits of 65.48 kDa and 9.52 kDa. Ultrafiltration membrane technology was used, operating in diafiltration and concentration mode. The different membranes were prepared using the phase inversion method, using polymer solutions with different quantities of cellulose acetate (polymer), formamide (pore promoter) and acetone (solvent). Where were produced two membranes with molecular weight cut-off of 65.48 kDa and 9.52 kDa The effluent and fractions obtained were quantified using the high-performance liquid chromatography (HPLC-DAD), Folin-Ciocalteu (quantification of phenols), DPPH (antioxidant activity), TBARS (inhibition of lipid peroxidation) and the ability to inhibit acetylcholinesterase was also analyzed. The results of the heavy fraction were the ones that obtained better values, 0.176 ± 0.065 mg/mg de extract of total phenols, 0.085 ± 0.009 mg/mg de extract of tannins, an EC50 of 21.97 ± 6.38 μg/mL and an AC50 of 0.342 ± 3.449 mg/mL. The compounds identified by HPLC-DAD were quinic, gallic, protocatechuic, carboxylic acid of brevifolia, vanillic, siringic, ellagic acid. The cytotoxicity of the compounds and the potential protection against oxidizing agents (H2O2 e TBHP) and physical (UV radiation) in cell lines of skin melanoma (A375), and the cytotoxicity of effluent and fractions on liver cancer cell lines, were analysed. Finally, the A375 cells were visualized by scanning electron microscopy (SEM) and fluorescence.Instituto Superior de Engenharia de LisboaPacheco, RitaMinhalma, Luís MiguelRCIPLSilva, Daniela Filipa Pereira2019-06-14T13:40:40Z2018-12-142018-12-14T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.21/10157TID:202254666porSILVA, Daniela Filipa Pereira - Otimização do fracionamento do efluente da cortiça recorrendo a tecnologia de membranas e estudo dos seus potenciais biológicos. Lisboa: Instituto Superior de Engenharia de Lisboa, 2018. Dissertação de mestrado.info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-08-03T09:59:46Zoai:repositorio.ipl.pt:10400.21/10157Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T20:18:37.900188Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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