Deficiência eritrocitária em piruvato cinase por suplementação de fluoreto de sódio (NaF), consequente aumento de difosfoglicerato (2,3-DPG) e a associação com a malária.

• Autor(a) principal: FRANCISCO, Maria de Lurdes Agostinho
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/20472
• topic: Malária; Plasmodium; Anopheles; Plasmodium falciparum; Deficiência em piruvato cinase (PK); Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A malária é uma doença provocada por um parasita protozoário do género Plasmodium, transmitido por mosquitos fêmea do género Anopheles que pode provocar diversas complicações, e em inúmeros casos levar mesmo a morte. Constata-se maior prevalência nos continentes Africano, Asiático e Sul-americano, chegando mesmo a atingir cerca de 216 milhões de casos e 655 mil mortes a nível mundial. Entre as cinco espécies de Plasmodium que causam malária humana, a mais mortal é a espécie Plasmodium falciparum. O impacto desta doença e a elevada mortalidade, fazem com que seja considerada uma das maiores forças seletivas da evolução da história recente da humanidade. Por este motivo, as variantes de determinados genes conferem ao seu portador uma resistência à malária ou sintomas atenuados; e isto tem sido conservado ao longo dos tempos. Foram encontrados vários genes que aparentam desempenhar esta função, dos quais encontram-se alguns que regulam a produção de enzimas como no caso da PKLR (pyruvate kinase liver red cells). O presente trabalho tem como objetivo estudar o efeito da deficiência em piruvato cinase (PK) no desenvolvimento parasitário, medindo a invasão e maturação do parasita em culturas in vitro de P. falciparum em eritrócitos normais e com adição de Fluoreto de Sódio (NaF) e 2,3-Difosfoglicerato (2,3-DPG), assim como a suscetibilidade dos parasitas na presença destes compostos. O parasita durante o seu desenvolvimento intraeritrocitário depende única e exclusivamente dos nutrientes fornecidos pelos eritrócitos, fazendo deste a sua principal fonte de nutrientes e a realização do metabolismo. Segundo os resultados obtidos neste trabalho, pela adição do NaF e consequente diminuição de ATP, necessária para o seu desenvolvimento, verificou-se redução principalmente na invasão. Os ensaios de suscetibilidade permitiram determinar a concentração necessária do composto para inibir 50% dos parasitas (IC50), sendo que para a estirpe sensível (3D7) foi necessária uma concentração de pelo menos 1mM e para a estirpe resistente (Dd2) 2mM. Em relação ao ensaio de invasão e maturação verificamos novamente que o NaF tem influência sobre o desenvolvimento parasitário, visto que as hemácias parasitadas sem adição do composto (controlo), tiveram um pico de parasitémia maior quando comparadas com as hemácias suplementadas com o NaF. Este aumento na parasitémia do controlo reflete a invasão das hemácias por novos parasitas, a diminuição demonstra o período de maturação, e como há maior consumo de hemácias sem reposição de novas, os parasitas morrem no ciclo seguinte.