Induction of osteogenic and chondrogenic differentiation in adipose derived stem cells (ASCs) using magnetic stimuli

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lima, João Miguel Aguiar Furtado Pinto
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.14/20129
Resumo: O osso e a cartilagem são dois tecidos de grande importância no corpo humano, sendo a sua funcionalidade comprometida por lesões ou doenças relacionadas com o envelhecimento, afetando milhares de pacientes em todo o mundo. Impulsionadas por uma urgente necessidade médica para melhorar a reabilitação e regeneração destes tecidos, têm sido desenvolvidas estratégias alternativas que visam promover a regeneração do osso e da cartilagem. Como os tratamentos tradicionais para o osso e para a cartilagem apresentam pouca eficácia em fornecer uma solução a longo prazo, não restaurando completamente as funções do tecido e/ou com graves efeitos secundários, a engenharia de tecidos (ET) apresenta estratégias alternativas que vão ao encontro de soluções regenerativas. As células estaminais são um mecanismo endógeno de reparação e regeneração tecidular, tendo a capacidade de se diferenciar em fenótipos celulares de várias linhagens. Assim, apresentam grande interesse e desempenham um importante papel nas abordagens de ET e medicina regenerativa. As células estaminais humanas derivadas do tecido adiposo (hASCs) demonstram características promissoras para ET, uma vez que são relativamente fáceis de recolher, têm uma elevada taxa de proliferação e a capacidade de se diferenciar em linhagens de osso e cartilagem. O crescente interesse na aplicação de nano partículas magnéticas (MNPs) através da atuação remota de um campo magnético externo para influenciar o comportamento celular, revela-se em estratégias capazes de estimular os processos intracelulares segundo um nível à escala celular, como a proliferação e a diferenciação. Esta tese foca-se no estudo de nano partículas magnéticas de óxido de ferro no processo de diferenciação das hASCs nas linhagens de osso e cartilagem. Foram realizados ensaios de viabilidade e proliferação até 28 dias em cultura e utilizaram-se corantes específicos de osso e cartilagem para verificar a diferenciação celular nos fenótipos osteogénico e condrogénico. As MNPs selecionadas e sobre a influência de um campo magnético não afetaram negativamente a viabilidade ou proliferação celulares. Apesar da presença destas partículas ativadas com o campo magnético influenciarem a diferenciação das hASCs, a maior influência foi verificada ao nível da diferenciação osteogénica, ao nível da produção de uma matriz mineralizada. Assim sendo, os resultados obtidos sugerem que a aplicação de MNPs sob a influência de um campo magnético externo revelam potencial para serem utilizadas em terapias celulares direcionadas para o osso e a cartilagem.
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As células estaminais são um mecanismo endógeno de reparação e regeneração tecidular, tendo a capacidade de se diferenciar em fenótipos celulares de várias linhagens. Assim, apresentam grande interesse e desempenham um importante papel nas abordagens de ET e medicina regenerativa. As células estaminais humanas derivadas do tecido adiposo (hASCs) demonstram características promissoras para ET, uma vez que são relativamente fáceis de recolher, têm uma elevada taxa de proliferação e a capacidade de se diferenciar em linhagens de osso e cartilagem. O crescente interesse na aplicação de nano partículas magnéticas (MNPs) através da atuação remota de um campo magnético externo para influenciar o comportamento celular, revela-se em estratégias capazes de estimular os processos intracelulares segundo um nível à escala celular, como a proliferação e a diferenciação. Esta tese foca-se no estudo de nano partículas magnéticas de óxido de ferro no processo de diferenciação das hASCs nas linhagens de osso e cartilagem. Foram realizados ensaios de viabilidade e proliferação até 28 dias em cultura e utilizaram-se corantes específicos de osso e cartilagem para verificar a diferenciação celular nos fenótipos osteogénico e condrogénico. As MNPs selecionadas e sobre a influência de um campo magnético não afetaram negativamente a viabilidade ou proliferação celulares. Apesar da presença destas partículas ativadas com o campo magnético influenciarem a diferenciação das hASCs, a maior influência foi verificada ao nível da diferenciação osteogénica, ao nível da produção de uma matriz mineralizada. Assim sendo, os resultados obtidos sugerem que a aplicação de MNPs sob a influência de um campo magnético externo revelam potencial para serem utilizadas em terapias celulares direcionadas para o osso e a cartilagem.Bone and cartilage are two crucial tissues of the human body. Their functionality impairment caused by injuries or age-related diseases affects a multitude of people worldwide. Driven by the urgent medical necessities to improve these tissues rehabilitation and regeneration, extensive efforts have been dedicated in strategies to promote bone and cartilage tissue regeneration. As traditional treatments for bone and cartilage healing fail to provide an effective long-term solution, without restoring the tissue functions and/or with severe side effects, tissue engineering (TE) arises as a promising alternative approach. As stem cells are an endogenous mechanism of tissue repair and regeneration, having the capacity to differentiate into cell phenotypes of a particular lineage, they have great interest and play an important role in TE and regenerative medicine approaches. Among them, human Adipose Derived Stem Cells (hASCs) demonstrate promising characteristics for TE as they are relatively easy to harvest, are highly proliferative and can differentiate towards bone and cartilage lineages. Growing interest on the use of magnetic nanoparticles (MNPs) through the application of a remote magnetic field to influence cell behavior, as these strategies can stimulate intracellular processes at a cellular level, such as proliferation and differentiation. This thesis focuses on the study of iron oxide magnetic nanoparticles in the differentiation process of hASCs towards bone and cartilage lineages. Proliferative and viability assays were assessed for up to 28 days and selective stainings of bone and cartilage tissues were performed to infer on the commitment of hASCs to bone and cartilage phenotypes. The selected MNPs under a MF do not negatively affect cellular viability and proliferation, as expected. Although MNPs and MF has influences hASCs differentiation, MNPs under the MF have a greater impact in osteogenic differentiation, especially in terms of mineralized ECM production. Thereby, the attained results suggests that the application of MNPs under an external MF stimulation show the potential in cell based therapies for bone and cartilage tissues.Gomes, Manuela E.Veritati - Repositório Institucional da Universidade Católica PortuguesaLima, João Miguel Aguiar Furtado Pinto2017-01-13T01:30:17Z2015-01-1320152015-01-13T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.14/20129TID:202729850enginfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-01-09T01:35:53Zoai:repositorio.ucp.pt:10400.14/20129Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T18:16:37.825136Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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