Estudos de susceptibilidade à artemisinina e derivados em Plasmodium falciparum

• Autor(a) principal: FERREIRA, Isabel Dinis
• Data de Publicação: 2008
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/61774
• topic: Parasitologia médica; Malária; Plasmodium falciparum; Terapêutica; Resistência a anti-maláricos; Artemisinina; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A resistência do Plasmodium falciparum à maioria dos antimaláricos em uso é um dos maiores obstáculos ao controlo eficaz da doença. Excepcionalmente, a resistência in vivo à artemisinina e seus derivados não foi ainda detectada. Contudo, é amplamente aceite que existe um risco real de aparecimento de resistência a esta classe de antimaláricos. Deste modo, este trabalho teve como finalidade investigar diversos aspectos do fenótipo e genótipo do perfil de fármaco-susceptibilidade à artemisinina e seus derivados no parasita Plasmodium falciparum, recorrendo a populações naturais de parasitas e a um modelo de laboratório. Neste contexto, foi efectuado um estudo multicêntrico, onde se avaliou a susceptibilidade in vitro a derivados da artemisinina em populações naturais de P. falciparum provenientes do Ruanda, da República Democrática de São Tomé e Príncipe (RDSTP) e do Brasil e se investigou o perfil genotípico de determinados genes candidatos nas mesmas amostras. No laboratório, utilizou-se o clone P. falciparum Dd2 para seleccionar clones resistentes à artemisinina in vitro. Em todos os parasitas efectuaram-se estudos de associação entre os níveis de susceptibilidade à artemisinina e derivados e mutações ou alteração no número de cópias de genes previamente apontados como potenciais moduladores da resposta a esta classe de antimaláricos tais como os genes pfcrt, pfmdr1, pfATPase6, pftctp e pfubp-1, bem como genes que codificam proteínas envolvidas nos mecanismos de defesa ao stress oxidativo, propostos no âmbito deste trabalho: pfsod1, pfgst, pfγgcs, pfgr, pfgpx, pftrx1, pftrx2 e pfprx. Os resultados obtidos para as populações naturais de P. falciparum Africanas e do Brasil em termos de susceptibilidade in vitro às artemisininas, parecem estar em conformidade com o descrito em outras áreas endémicas onde se observa que apesar de existir uma variação significativa na sua susceptibilidade, não existe evidência de resistência. No entanto, verificou-se existir uma correlação positiva entre as respostas aos derivados da artemisinina e a amodiaquina, antimalárico de diferente classe, o que indicia a existência de um fenótipo de tolerância cruzada entre compostos de classes diferentes. Apesar de não ter sido detectada uma associação estatisticamente significativa entre a resposta dos isolados às artemisininas e os genes analisados, esta componente dotrabalho permitiu que se avaliasse a estrutura populacional do parasita P. falciparum em termos de fenótipo bem como do perfil de genes apontados como moduladores das respostas a estes fármacos antes da aplicação em larga escala dos mesmos. Estes dados constituem assim uma ferramenta singular de fármaco-vigilância, dado poderem ser utilizados em futuros ensaios como termo de comparação que permite avaliar a evolução das populações parasitárias em termos fenotípicos e genotípicos. A selecção in vitro de clones resistentes à artemisinina partindo de progenitores sensíveis, P. falciparum Dd2, permitiu obter uma população de parasitas com susceptibilidade 100 vezes reduzida em relação ao seu progenitor, a qual se designou Dd2-ARTmut. No entanto, a resistência obtida demonstrou ser instável, tendo desaparecido na ausência de pressão de fármaco, dando origem a uma estirpe que se passou a denominar Dd2-ARTmutREV. A comparação entre os clones Dd2-ARTmut e o progenitor sensível Dd2 em relação a potenciais genes moduladores da susceptibilidade às artemisininas, revelou ter ocorrido amplificação do gene pfmdr1, bem como um aumento da sua expressão. Curiosamente, a amplificação do gene pfmdr1 foi mantida após a reversão da resistência, na estirpe Dd2-ARTmutREV, levantando novas questões sobre o efeito causal desta amplificação na modulação das respostas à artemisinina e seus derivados.