Tipificação de Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SC e detecção da sua aderência a células epiteliais pulmonares

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Varela, Filipa Alexandra Pereira Rosa
Data de Publicação: 2010
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/5092
Resumo: Dissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e Tecnologia
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spelling Tipificação de Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SC e detecção da sua aderência a células epiteliais pulmonaresPeripneumonia Contagiosa Bovina (PPCB)Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SCVNTR (Variable Number of Tandem Repeats)FISH (Fluorescence In Situ Hybridisation)Dissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e TecnologiaA Peripneumonia Contagiosa Bovina (PPCB) é uma doença respiratória infecciosa, de grande relevo no âmbito da produção de gado bovino, causada pela bactéria Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SC (MmmSC). Actualmente, a PPCB permanece endémica apenas em África, sendo aí responsável por perdas incontornáveis no sector pecuário. O último surto de PPCB detectado na Europa ocorreu em Portugal em 1999 mas, devido à sua natureza insidiosa, o risco de re-emergência é permanente. As estirpes de MmmSC associadas aos últimos surtos europeus de PPCB são tradicionalmente consideradas geneticamente muito homogéneas. No entanto, trabalhos recentes de tipificação molecular revelaram a existência de uma variabilidade genética intraspecífica superior ao que se esperava. A realização deste trabalho teve como base dois objectivos fundamentais: a tipificação de estirpes de MmmSC isoladas durante os últimos surtos de PPCB que ocorreram em Portugal entre 1993 e 1998, e a aplicação de um método alternativo e inovador para a detecção e quantificação de MmmSC, após a infecção de culturas celulares. Para a concretização do primeiro objectivo foi realizada uma análise da variabilidade polimórfica de três regiões VNTR (Variable Number of Tandem Repeats) existentes no genoma de estirpes de MmmSC. O locus VNTR4 comprovou ser o mais polimórfico, detectando-se quatro perfis distintos entre as estirpes portuguesas. O perfil VNTR4 do tipo “9” (numerado em função das repetições da sequência de consenso) revelou-se amplamente distribuído geograficamente e foi predominante entre os isolados. No entanto, observou-se uma segregação geográfica de perfis, dado que na região da Beira Litoral apenas foram encontradas estirpes com o perfil VNTR4 do tipo “8”. Estes resultados sugerem que podem ter ocorrido, pelo menos, dois eventos de re-emergência de PPCB em Portugal, entre 1993 e 1998. Para a realização do segundo objectivo deste trabalho foi optimizada uma técnica baseada na hibridação in situ com sondas de DNA fluorescentes (FISH) que permitiu visualizar micoplasmas aderidos a culturas celulares. Esta técnica, que nunca tinha sido usada previamente na detecção de MmmSC, comprovou ser adequada para futuras aplicações em estudos de citoaderência e para a detecção de micoplasmas em culturas celulares.Faculdade de Ciências e TecnologiaSilva, JoãoBotelho, AnaCorreia, IvoneRUNVarela, Filipa Alexandra Pereira Rosa2011-02-11T14:32:53Z20102010-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10362/5092porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-03-11T03:35:26Zoai:run.unl.pt:10362/5092Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T03:16:04.836978Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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