Produção de para-aminobenzoato a partir de Corynebacterium glutamicum
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/1822/79731 |
Resumo: | Dissertação de mestrado integrado em Engenharia Biológica (ramo de Tecnologia Química e Alimentar) |
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Produção de para-aminobenzoato a partir de Corynebacterium glutamicumProduction of para-aminobenzoate from Corynebacterium glutamicumCorynebacterium.glutamicumC. glutamicumPara-aminobenzoatopABAPiruvato quinase (pyk)Fosfoenolpiruvato carboxilase (ppc)Glicose-6-fosfato 1-desidrogenase (zwf)Mio-inositol desidrogenase (iol)Pyruvate kinase (pyk)Phosphoenolpyruvate carboxylase (ppc)Glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase (zwf)Myo-inositol dehydrogenase (iol)Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e TecnologiasDissertação de mestrado integrado em Engenharia Biológica (ramo de Tecnologia Química e Alimentar)A escassez de combustíveis fósseis associada à poluição que a sua extração implica conduziu à necessidade de criar alternativas mais sustentáveis na produção de energia e produtos. Uma das alternativas no combate a este problema é a produção de compostos a partir de microrganismos, recorrendo à biotecnologia. Nos últimos tempos, é de notar uma evolução crescente na quantidade e diversidade de compostos industrialmente obtidos a partir de processos biológicos. Este progresso está diretamente relacionado com o desenvolvimento de ferramentas computacionais e metodologias de engenharia metabólica que permitem desenvolver organismos otimizados para a produção de determinados compostos químicos. Os compostos aromáticos pertencem a um grupo de compostos químicos que são maioritariamente provenientes de derivados de petróleo. O ácido para-aminobenzóico (pABA), composto aromático, é produzido por síntese química e possui diversas aplicações ao nível industrial e comercial. Devido à escassez de soluções mais sustentáveis, a síntese por via biológica foi avaliada recorrendo a metodologias de engenharia metabólica de modo a desenvolver microrganismos capazes de produzir pABA a partir de diversas fontes de carbono, tais como açúcares. Neste estudo, o modelo metabólico de Corynebacterium glutamicum (C. glutamicum), bactéria que apresenta baixa toxicidade a compostos aromáticos, é otimizado, de forma a permitir a bioprodução deste composto ao nível industrial. Nesta dissertação, foi possível prever um fenótipo ótimo para a produção de pABA em C. glutamicum através da simulação matemática do metabolismo de um mutante com quatro alterações genéticas, resultado de um processo de otimização matemática do modelo metabólico da bactéria. A alteração do metabolismo que incluiu a eliminação conjunta de quatro atividades enzimáticas, tais como a piruvate quinase (codificada pelo gene pyk), fosfoenolpiruvate carboxilase (codificada pelo gene ppc), glicose-6-fosfato 1- desidrogenase (codificada pelo gene zwf) e mio-inositol desidrogenase (codificada pelo gene iol), permitiu redirecionar o fluxo de carbono para a produção de pABA e atingir um rendimento de 20% (mmol/mmol).The lack of supply of fossil fuels associated with the pollution that their extraction implies has led to the need to create more sustainable alternatives in the production of energy and products. One of the alternatives to combat this problem is the production of compounds from microorganisms, using biotechnology. In recent years, it is worth noting a growing evolution in the quantity and diversity of compounds industrially obtained from biological processes. This progress is directly related to the development of computational tools and metabolic engineering methodologies that allow the development of optimized organisms to produce certain chemical compounds. Aromatic compounds belong to a group of chemical compounds in which the respective obtainment comes mainly from petroleum derivatives. Para-aminobenzoic acid (pABA) is an aromatic compound produced by chemical synthesis and which has several applications at industrial and commercial level. Due to the scarcity of more sustainable solutions, biological synthesis was evaluated using metabolic engineering methodologies to develop microorganisms capable of producing pABA from different carbon sources, such as sugars. In this study, the metabolic model of Corynebacterium glutamicum (C. glutamicum), a bacterium that has low toxicity to aromatic compounds, is optimized to allow the bioproduction of this compound at an industrial level. In this dissertation study, it was possible to predict an optimal phenotype to produce pABA in C. glutamicum through the mathematical simulation of the metabolism of a mutant that may include four genetic alterations, resulting from a mathematical optimization process of the metabolic model of C. glutamicum. The change in metabolism that included the elimination of four enzyme activities, such as pyruvate kinase (encoded by the pyk gene), phosphoenolpyruvate carboxylase (encoded by the ppc gene), glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase (encoded by the zwf gene) and myo-inositol dehydrogenase (encoded by the iol gene) allowed to redirect the carbon flux to the production of pABA, reaching a yield of 20% (mmol/mmol).Ferreira, Eugénio C.Carneiro, SóniaUniversidade do MinhoFernandes, Ana Filipa Baptista2021-10-152021-10-15T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://hdl.handle.net/1822/79731por203015185info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-07-21T12:46:39Zoai:repositorium.sdum.uminho.pt:1822/79731Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T19:44:39.973512Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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