Infeção de culturas primárias de monócitos humanos com a bactéria Legionella pneumophila

• Autor(a) principal: ANTÃO, Ana Catarina Ramos Batista
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/21860
• topic: Legionella pneumophila; Doença dos legionários,; Pneumonia grave; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

Legionella pneumophila é um bacilo gram-negativo capaz de invadir e de se multiplicar em células eucariotas, incluindo monócitos humanos e células epiteliais. Legionella pneumophila tem a capacidade de manipular os processos celulares sendo este, um dos mecanismos chave que a bactéria utiliza para proliferar dentro do hospedeiro. A infeção por Legionella pode apresentar-se sob duas formas clinicamente distintas, a Doença dos Legionários, causando uma pneumonia grave e a Febre de Pontiac, uma infeção brônquica autolimitada. As fases do ciclo de vida da bactéria e os fatores que promovem a sua replicação dentro da célula fagocítica e a sua transmissão para um novo hospedeiro têm sido objecto de numerosos estudos utilizando diferentes espécies de amibas e linhas contínuas, no entanto, em células monocíticas primárias são poucos os estudos realizados. O principal objectivo deste trabalho foi estudar o processo de replicação da Legionella pneumophila em linhas primárias de monócitos (obtidos partir de sangue periférico doado voluntariamente) e em macrófagos (obtidos por diferenciação de culturas primárias de monócitos humanos). Para se obter uma cultura primária é necessário obter uma grande quantidade de células polimorfonucleares de sangue periférico, sendo que cada isolamento é influenciado pela idade e sexo do dador. Após a infeção das linhas primárias de monócitos e macrófagos com Legionella pneumophila, verificou-se alterações na morfologia das células infetadas. Esta observação foi numa primeira fase corroborada pela quantificação das bactérias às 24h, isto é, a comparação dos valores obtidos no plaqueamento do sobrenadante e do lisado da monocamada apontavam para existência de fagocitose. No entanto, ao comparar o crescimento da bactéria às 24h e 48h depois da infeção, verifica-se que não existiu multiplicação intracelular.