Avaliação in vitro da entrega do microRNA-29 em células de Cancro do Pulmão

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marques, Maria Carolina Martins
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.6/13714
Resumo: Esta dissertação, constituída por três capítulos, reúne três experiências integrantes da unidade curricular de “Estágio” do curso de Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas. O primeiro capítulo, corresponde à vertente de investigação, descreve o desenvolvimento de um ensaio para a avaliação in vitro da entrega do microRNA-29 em células de cancro do pulmão. Sendo o cancro uma das principais causas de morte em todo o mundo, ao longo dos anos têm sido realizados estudos para compreender o mecanismo envolvido na tumorigénese do cancro com o objetivo de encontrar estratégias terapêuticas inovadoras para o tratamento desta patologia. O trabalho realizado teve como principal objetivo otimizar as condições de transfeção de uma linha celular de cancro do pulmão A549 e avaliar o efeito do microRNA-29 no crescimento desta linha celular. As condições de transfeção e avaliação do crescimento celular foram validadas com sucesso com siRNA. Contudo, o crescimento celular das células tratadas com o miRNA-29 foi muito semelhante ao controlo de células não tratadas. Deste modo, e dado que na literatura há indicadores da diminuição da viabilidade e proliferação da linha celular A549 após transfeção com microRNA-29, será importante verificar os níveis de expressão de mRNA das DNA metiltransferases por transcrição reversa seguido de PCR quantitativo em tempo real. Apesar dos vários desafios com a utilização dos miRNAs no cancro, os avanços nestes estudos são de extrema importância, uma vez que é essencial descobrir estratégias terapêuticas inovadoras que possibilitem o tratamento desta patologia. O segundo capítulo diz respeito ao estágio curricular em Farmácia Hospitalar, realizado no Hospital Amato Lusitano, em Castelo Branco, o qual teve início a 7 de fevereiro e término a 25 de março de 2022, sob orientação da Dra. Sandra Queimado. O foco deste capítulo são as várias vertentes de uma Farmácia Hospitalar bem como as várias atividades realizadas no quotidiano de um farmacêutico hospitalar. Este foi um período de aprendizagem, onde foi possível vivenciar uma área de ação do farmacêutico com a qual tinha tido pouco contacto e que se revelou extremamente interessante. O terceiro capítulo remete para o estágio curricular em Farmácia Comunitária, realizado na Farmácia Correia, em Mesão Frio, com início a 28 de março e fim a dia 17 de junho de 2022, sob orientação do Dr. Nuno Reis. Neste capítulo são abordadas várias experiências, atividades e conhecimentos adquiridos durante a minha integração na equipa. Esta oportunidade permitiu presenciar e participar no quotidiano de um farmacêutico comunitário, vivenciando o seu impacto na comunidade, e desenvolver a minha capacidade de interação com os utentes.
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O trabalho realizado teve como principal objetivo otimizar as condições de transfeção de uma linha celular de cancro do pulmão A549 e avaliar o efeito do microRNA-29 no crescimento desta linha celular. As condições de transfeção e avaliação do crescimento celular foram validadas com sucesso com siRNA. Contudo, o crescimento celular das células tratadas com o miRNA-29 foi muito semelhante ao controlo de células não tratadas. Deste modo, e dado que na literatura há indicadores da diminuição da viabilidade e proliferação da linha celular A549 após transfeção com microRNA-29, será importante verificar os níveis de expressão de mRNA das DNA metiltransferases por transcrição reversa seguido de PCR quantitativo em tempo real. Apesar dos vários desafios com a utilização dos miRNAs no cancro, os avanços nestes estudos são de extrema importância, uma vez que é essencial descobrir estratégias terapêuticas inovadoras que possibilitem o tratamento desta patologia. O segundo capítulo diz respeito ao estágio curricular em Farmácia Hospitalar, realizado no Hospital Amato Lusitano, em Castelo Branco, o qual teve início a 7 de fevereiro e término a 25 de março de 2022, sob orientação da Dra. Sandra Queimado. O foco deste capítulo são as várias vertentes de uma Farmácia Hospitalar bem como as várias atividades realizadas no quotidiano de um farmacêutico hospitalar. Este foi um período de aprendizagem, onde foi possível vivenciar uma área de ação do farmacêutico com a qual tinha tido pouco contacto e que se revelou extremamente interessante. O terceiro capítulo remete para o estágio curricular em Farmácia Comunitária, realizado na Farmácia Correia, em Mesão Frio, com início a 28 de março e fim a dia 17 de junho de 2022, sob orientação do Dr. Nuno Reis. Neste capítulo são abordadas várias experiências, atividades e conhecimentos adquiridos durante a minha integração na equipa. Esta oportunidade permitiu presenciar e participar no quotidiano de um farmacêutico comunitário, vivenciando o seu impacto na comunidade, e desenvolver a minha capacidade de interação com os utentes.This dissertation, resulting of three chapters, brings together three experiences part of the “Internship” curricular unit of the Integrated Master's course in Pharmaceutical Sciences. The first chapter, corresponding to the research component, describes the development of an test for the in vitro evaluation of microRNA-29 delivery in lung cancer cells. Since cancer is one of the main causes of death worldwide, over the years studies have been carried out to understand the mechanism involved in cancer tumorigenesis with the aim of finding innovative therapeutic strategies for the treatment of this pathology. The main objective of this work was to optimize the transfection conditions of an A549 lung cancer cell line and to evaluate the effect of microRNA-29 on the growth of this cell line. The transfection conditions and evaluation of cell growth were successfully validated with siRNA. However, cell growth of cells treated with miRNA-29 was very similar to control untreated cells. Thus, and given that in the literature there are indicators of the decrease in viability and perspectives of the A549 cell line after transfection with microRNA-29, it will be important to verify the mRNA expression levels of DNA methyltransferases by reverse transcription followed by quantitative real-time PCR. Despite the various challenges with the use of miRNAs in cancer, advances in these studies are extremely important, since it is essential to discover innovative therapeutic strategies that allow the treatment of this pathology. The second chapter involves the curricular internship in Hospital Pharmacy, at Hospital Amato Lusitano, in Castelo Branco, starting on February 7 and ended on March 25, 2022, under the guidance of Dra. Sandra Queimado. The focus of this chapter are the various aspects of a Hospital Pharmacy as well as the various activities carried out in the daily life of a hospital pharmacist. This was a learning period, where it was possible to experience an area of action of the pharmacist with which I had little contact and which proved to be extremely interesting. The third chapter refers to the curricular internship in Community Pharmacy, at Farmácia Correia, in Mesão Frio, starting on March 28 and ending on June 17, 2022, under the guidance of Dr. Nuno Reis. This chapter covers various experiences, activities and knowledge transmitted during my integration into the team are discussed. This opportunity allowed me to witness and participate in the daily life of a community pharmacist, experiencing their impact on the community, and developing my ability to interact with the patients.O trabalho laboratorial foi desenvolvido no Centro de Investigação em Ciências da Saúde (CICS-UBI) e fui benificiária de uma bolsa de iniciação à investigação com a duração de 1 mês através do projeto MERCI (“Programa de Verão com Ciência”) financiada pela “Fundação para a Ciência e a Tecnologia”.Santos, Adriana Oliveira dosSousa, Fani Pereira deBaptista, Bruno Miguel CameirauBibliorumMarques, Maria Carolina Martins2023-11-23T11:09:12Z2023-02-232023-01-302023-02-23T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.6/13714TID:203389573porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-12-15T09:57:24Zoai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/13714Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T00:53:05.615180Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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