Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Vera Lúcia Viana, 1988-
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10451/7553
Resumo: Tese de mestrado. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012
id RCAP_85f949d0b5f38e9ac4c74ccd26dfc45b
oai_identifier_str oai:repositorio.ul.pt:10451/7553
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia graveMetabolismo do ferroHemocromatose hereditáriaBiologia molecularTeses de mestrado - 2012Tese de mestrado. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012O ferro desempenha um papel biológico muito importante nos organismos vivos. No entanto, tanto o seu excesso como a sua deficiência no organismo humano estão associados a consequências negativas para a saúde. A Hemocromatose Hereditária (HH) é dos distúrbios genéticos mais comuns em indivíduos de ascendência Norte-Europeia. Caracteriza-se por uma absorção excessiva de ferro a nível intestinal e sua consequente acumulação em vários órgãos. As complicações mais frequentes da doença são cirrose hepática, carcinoma hepatocelular, cardiomiopatias, diabetes, problemas endócrinos, artrite e hiperpigmentação da pele. O gene HFE é o principal associado à patologia (HH clássica, tipo I). Os genótipos mais comuns são a mutação C282Y em homozigotia e a heterozigotia composta desta com a mutação H63D. Têm surgido evidências de que mutações noutros genes possam estar envolvidas nesta patologia. Entre estes encontra-se o gene do Receptor 2 da Transferrina (TfR2) sendo a HH resultante (Hemocromatose do tipo III) caracterizada por sintomas clínicos idênticos aos da forma clássica. A Hemocromatose do tipo II, ou Hemocromatose Juvenil, é a forma mais grave da doença devido ao facto da sobrecarga de ferro ocorrer a um ritmo mais acelerado levando a problemas em idades jovens. Este tipo de HH ocorre devido a mutações no gene da Hemojuvelina, HJV (HH do tipo 2A) ou no da Hepcidina (HAMP) (HH do tipo 2B). O objectivo principal deste estudo consistiu na pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro (HFE, TfR2, HJV, HAMP, BMP-6), em 11 indivíduos com hiperferritinemia muito grave (ferritina sérica > 2500 μg/L), cujos fenótipos não eram justificáveis pelos genótipos HFE apresentados. As sequências génicas foram amplificadas por metodologias de PCR e a análise mutacional dos fragmentos amplificados foi efectuada recorrendo à sequenciação automática. Nesta análise foram detectadas 9 alterações, sendo que 3 delas são identificadas pela primeira vez neste estudo (a P124L no gene HJV, a c.1281-197 T→C e a c.1542+4 G→A no gene BMP-6). Posteriormente foram realizados estudos in silico às sequências proteicas de modo a identificar possíveis alterações a nível estrutural recorrendo ao programa bioinformática PolyPhen-2 e aos modelos HumDiv e HumVar. Para além disso, também se procedeu à análise do impacto das alterações nucleotídicas a nível do splicing utilizando para esse fim o software Human Splicing Finder. Foi possível através desta pesquisa justificar a sobrecarga em ferro em 2 dos indivíduos em estudo. Num dos casos, colocamos a hipótese de que a conjugação da homozigotia para a mutação C282Y em HFE e da alteração R752H em heterozigotia no gene TfR2 seja o motivo da sobrecarga em ferro verificada. No outro caso, encontrou-se a alteração P124L em heterozigotia no gene HJV, que em co-herança com a homozigotia para a alteração C282Y, também poderá estar na origem da hiperferritinemia grave. A HH não clássica é caracterizada por uma grande heterogeneidade genética, que traduz mecanismos fisiológicos complexos inerentes à homeostase do ferro, ainda não completamente conhecidos. Com este estudo contribuímos para aumentar o conhecimento sobre a fisiopatologia deste tipo de Hemocromatose e esclarecemos as relações genótipo/fenótipo nalguns dos casos estudados.Iron plays a very important role in biological organisms. However, its excess and deficiency in the human body are both associated with negative health consequences. Hereditary Haemochromatosis (HH) is an autossomal recessive disorder commonly found in Caucasians of Northern European ancestry. It is characterized by an increased intestinal iron absorption and subsequent accumulation on several organs, resulting in tissue damage. Hepatic cirrhosis, hepatocellular carcinoma, cardiomyopathy, diabetes, endocrine abnormalities, arthritis and skin hyperpigmentation are some examples of the most frequent clinical manifestations. HFE gene is the main gene associated to the disease (HH type I). The most common genotypes found in HH patients are the homozygosity for the C282Y mutation or its compound heterozigosity with the H63D mutation. Some studies have shown that there are HH cases without mutations in the HFE gene, where other iron metabolism related genes are involved. Among these, is the Transferrin Receptor 2 gene (TfR2) which is associated with HH type III, characterized by clinical symptoms similar to the ones observed with the classical HH. On other hand, HH type II, also named juvenile haemochromatosis is a severe form of the disease, where iron overload occurs faster and the patients present cardiomyopathy and/or endocrine abnormalities at young age. This type of HH is the result of mutations in the hemojuveline (HJV) (HH type 2A) or hepcidin (HAMP) (HH type 2B) genes. The main aim of this study was to perform a mutational screening in 5 genes related with iron metabolism (HFE, TfR2, HJV, HAMP, BMP-6) in 11 individuals presenting severe hyperferritinemia (serum ferritin level > 2500 μg/L), whose phenotypes were not justified by HFE genotypes. It was also intended the characterization of the mutations newly found. Gene sequences were amplified by PCR methodologies and mutational analysis of amplified fragments was performed by automated sequencing. In this analysis we detected 9 DNA alterations, 3 of them reported for the first time in this study (P124L in the HJV gene, c.1281-197 T→C and c.1542+4 G→A in BMP-6 gene). In silico studies were performed in order to identify possible changes at protein structural level using the bioinformatics program PolyPhen-2 and HumDiv e HumVar models. Furthermore, the impact of nucleotide changes at the splicing level was also explored using the Human Splicing Finder software. Through this study was possible to justify the iron overload in 2 of the individuals analyzed. In one case, we put the hypothesis that the combination of homozygosity for the mutation C282Y in HFE and the heterozygosity for the R752H in TfR2 gene is the reason for the observed iron overload. In another case, we found one change in heterozygosity, P124L in HJV gene that co-inheritance with homozygosity for the C282Y in HFE, can also be the cause of severe hyperferritinemia. The nonclassical HH is characterized by a large genetic heterogeneity, which translates into complex physiological mechanisms involved in iron homeostasis, some of them still unclear. This study was intended to contribute to increase knowledge of the pathophysiology of this type of haemochromatosis.Gonçalves, Maria Paula Duarte FaustinoCrespo, Ana Maria ViegasRepositório da Universidade de LisboaSantos, Vera Lúcia Viana, 1988-2013-01-22T17:44:55Z20122012-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/7553porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-11-08T15:50:51Zoai:repositorio.ul.pt:10451/7553Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:32:20.676318Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
title Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
spellingShingle Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
Santos, Vera Lúcia Viana, 1988-
Metabolismo do ferro
Hemocromatose hereditária
Biologia molecular
Teses de mestrado - 2012
title_short Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
title_full Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
title_fullStr Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
title_full_unstemmed Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
title_sort Pesquisa e caracterização de mutações em genes relacionados com o metabolismo do ferro em indíviduos com hiperferritinemia grave
author Santos, Vera Lúcia Viana, 1988-
author_facet Santos, Vera Lúcia Viana, 1988-
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Gonçalves, Maria Paula Duarte Faustino
Crespo, Ana Maria Viegas
Repositório da Universidade de Lisboa
dc.contributor.author.fl_str_mv Santos, Vera Lúcia Viana, 1988-
dc.subject.por.fl_str_mv Metabolismo do ferro
Hemocromatose hereditária
Biologia molecular
Teses de mestrado - 2012
topic Metabolismo do ferro
Hemocromatose hereditária
Biologia molecular
Teses de mestrado - 2012
description Tese de mestrado. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012
publishDate 2012
dc.date.none.fl_str_mv 2012
2012-01-01T00:00:00Z
2013-01-22T17:44:55Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10451/7553
url http://hdl.handle.net/10451/7553
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799134215407665152

Registros relacionados