Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ferreira, Ana Rita da Silva
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1822/47204
Resumo: Dissertação de mestrado em Ciências da Saúde
id RCAP_8ffe773b37f4fbed111f507b4121dc4e
oai_identifier_str oai:repositorium.sdum.uminho.pt:1822/47204
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspectiveAvaliação dos determinantes imunes associados à resistência/susceptibilidade a Paracoccidioides brasiliensis: uma perspectiva do modelo de ratinhoCiências Médicas::Ciências da SaúdeDissertação de mestrado em Ciências da SaúdeParacoccidioides brasiliensis is the etiological agent of paracoccidioidomycosis, one of the most prevalent systemic mycosis in Latin America. Infection by this fungus is thought to be initiated by the inhalation of conidia produced by the saprophytic phase of the fungus. Although many aspects of the host immune response against this pathogen are still unknown, several studies have suggested that macrophages play a key role in the defence against P. brasiliensis. Therefore, our aim is to characterize the macrophage response against strains of P. brasiliensis with different degrees of virulence in order to define the mechanisms required to control infection. To this end, we have established an in vitro model of bone marrow-derived macrophages (BMDM) infection. These cells were infected with P. brasiliensis 18, a highly virulent strain, or P. brasiliensis ATCC60855, a low virulent strain. Here, we show that P. brasiliensis morphology, assessed by scanning electron microscopy, has an important impact in the ability of BMDM to internalize P. brasiliensis. Indeed, while P. brasiliensis ATCC60855, a small strain with a reduced bud number, is easily internalized by BMDM, P. brasiliensis 18, a larger strain with multiple bud cells, is not efficiently internalized. To determine the ability of macrophages to control infection, we assessed the ability of BMDM to control P. brasiliensis growth. We found that, after infection, stimulation of BMDM with interferon (IFN)-γ was not sufficient to activate the production of nitric oxide (NO), a key antimicrobial mediator, and to control P. brasiliensis growth. To define the mechanisms underlying this deficient activation in response to this pathogen, we measured the levels of several cytokines known to activate macrophages and we found that there was a reduced production of tumour necrosis factor (TNF), which was more evident after P. brasiliensis 18 infection. Indeed, it was only after stimulation of BMDM with both IFN-γ and lipopolysaccharide (LPS), a potent inducer of TNF, that these cells were able to produce large amounts of nitric oxide and to control infection. Therefore, our data suggest that P. brasiliensis modulates the signalling pathway that leads to the production of TNF to inhibit the activation of the macrophages fungicidal mechanisms. We also found that the reduced production of TNF by BMDMs is not mediated by interleukin (IL)-10, as both P. brasiliensis strains induced the same levels of IL-10. However, in vivo studies suggest that high levels of IL-10 during infection can be detrimental to the host by modulating the dynamics of the inflammatory response, stressing the importance of the regulation of this cytokine in the balance between protection and pathology during P. brasiliensis infection. Altogether, our data support a model whereby the different induction of TNF by P. brasiliensis strains with different degrees of virulence may underlie the different forms or severity of the disease.Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da paracoccidioidomicose, uma das micoses sistémicas mais prevalentes na América Latina. Pensa-se que a infecção por este fungo é iniciada aquando da inalação de conídios produzidos pela fase saprófita do fungo. Embora vários aspectos relacionados com a resposta imune do hospedeiro ainda sejam desconhecidos, estudos sugerem que os macrófagos têm um papel essencial na defesa contra P. brasiliensis. O nosso objectivo é caracterizar a resposta dos macrófagos contra estirpes de P. brasiliensis com diferentes graus de virulência de forma a definir os mecanismos necessários para controlar a infeção. Para isso, estabelecemos um modelo in vitro de infecção de macrófagos derivados da medula-óssea (BMDM). Estas células foram infectadas com P. brasiliensis 18, uma estirpe altamente virulenta, ou com P. brasiliensis ATCC60855, uma estirpe considerada menos virulenta. Através de uma análise por microscopia eletrónica de varrimento, observámos que a morfologia de P. brasiliensis tem um grande impacto na internalização deste fungo pelos BMDM. De fato, enquanto que P. brasiliensis ATCC60855, uma estirpe com células de dimensão reduzida e rodeadas por poucas células-filha, é mais facilmente internalizada, a estirpe P. brasiliensis 18, que é caracterizada por células de maiores dimensões e rodeadas numerosas células-filhas, dificilmente é internalizada. Para determinar a capacidade dos macrófagos para controlar a infecção, avaliamos a capacidade dos BMDM para controlar o crescimento de P. brasiliensis. Descobrimos que, após a infeção, a estimulação destes macrófagos com interferão (IFN)-γ não foi suficiente para activar a produção de óxido nítrico, um mediador chave na resposta microbicida dos macrófagos, nem para controlar o crescimento de P. brasiliensis. Para definir os mecanismos subjacentes a esta activação deficiente, medimos várias citoquinas que são produzidas em resposta â activação de macrófagos e observamos uma diminuição na produção de fator de necrose tumoral (TNF) que foi mais evidente após a infecção com P. brasiliensis 18. Assim, só depois da estimulação dos BMDM com IFN-γ e LPS, um potente indutor de TNF, é que estas células foram capazes de produzir grandes quantidades de óxido nítrico e de controlar a infecção. Desta forma, os nossos dados sugerem que P. brasiliensis modula a via de sinalização que leva à produção de TNF de forma a inibir a activação dos mecanismos fungicidas dos macrófagos. Também observamos que a produção de TNF não é mediada pela interleuquina (IL)-10, já que ambas as estirpes produzem as mesmas quantidades de IL-10 Contudo, estudos in vivo mostram que a IL-10 tem um impacto negativo na dinâmica da resposta inflamatória, o que demonstra a importância da regulação desta citoquina no balanço entre a inflamação e a patologia. Estes dados suportam um modelo no qual a indução de TNF por estirpes de P. brasiliensis com diferente virulência pode ser a base das diferentes formas ou severidade da doença.Torrado, EgídioRodrigues, Fernando José dos SantosUniversidade do MinhoFerreira, Ana Rita da Silva20152015-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/1822/47204eng201482908info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-07-21T12:26:22Zoai:repositorium.sdum.uminho.pt:1822/47204Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T19:20:47.594368Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
Avaliação dos determinantes imunes associados à resistência/susceptibilidade a Paracoccidioides brasiliensis: uma perspectiva do modelo de ratinho
title Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
spellingShingle Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
Ferreira, Ana Rita da Silva
Ciências Médicas::Ciências da Saúde
title_short Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
title_full Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
title_fullStr Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
title_full_unstemmed Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
title_sort Evaluation of immune-determinants associated with resistance-susceptibility to Paracoccidioides brasiliensis: a mouse model perspective
author Ferreira, Ana Rita da Silva
author_facet Ferreira, Ana Rita da Silva
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Torrado, Egídio
Rodrigues, Fernando José dos Santos
Universidade do Minho
dc.contributor.author.fl_str_mv Ferreira, Ana Rita da Silva
dc.subject.por.fl_str_mv Ciências Médicas::Ciências da Saúde
topic Ciências Médicas::Ciências da Saúde
description Dissertação de mestrado em Ciências da Saúde
publishDate 2015
dc.date.none.fl_str_mv 2015
2015-01-01T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/1822/47204
url http://hdl.handle.net/1822/47204
dc.language.iso.fl_str_mv eng
language eng
dc.relation.none.fl_str_mv 201482908
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799132671803129856

Registros relacionados