Estudo de marcadores de diagnóstico e prognóstico em gliomas

• Autor(a) principal: Guedes, Ana Filipa Barata Duarte
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/538
• topic: Glioma; 1p/19q deletion; Chromosome; Isocitrate dehydrogenase 1 and 2; Mutation; O-6-methylguanine-DNA methyltransferase; Hypermethylation; Biomarkers

Os gliomas são os tumores cerebrais primários mais frequentes, representando mais de 80% de todas as neoplasias do Sistema Nervoso Central e são, actualmente, classificados, pela Organização Mundial de Saúde, em astrocitomas, oligodendrogliomas, tumores mistos e ependimomas. O diagnóstico e a classificação destes tumores são baseados nas características histopatológicas que, por vezes, são difíceis de definir. Apesar dos avanços na neurocirurgia, quimioterapia e radioterapia, o prognóstico dos doentes com gliomas é ainda muito reservado. Nos últimos anos, estudos em gliomas têm identificado marcadores de diagnóstico, de prognóstico e preditivos, susceptíveis de ajudarem a definir a classificação histológica. A codelecção 1p/19q em tumores oligodendrogliais, a presença de mutações somáticas em genes que codificam isocitrato desidrogenase 1 e 2 (IDH1 e IDH2) em astrocitomas, oligodendrogliomas e oligoastrocitomas e a hipermetilação da região promotora do gene MGMT em glioblastomas são, actualmente, considerados os três marcadores mais interessantes em gliomas. Estudos prévios sugerem que a codelecção dos braços dos cromossomas 1p e 19q tem provado ser um bom marcador de diagnóstico e prognóstico. A perda combinada de 1p e 19q tem sido associada com a morfologia de oligodendrogliomas e com o aumento da sobrevida nestes tumores. Contudo, em outros tumores, a componente oligodendroglial pode também conferir um melhor prognóstico. Assim, um dos objectivos deste Projecto, foi a avaliação de 1p/19q em relação ao diagnóstico e prognóstico dos doentes. Estudos recentemente publicados sugerem que mutações nos genes IDH1 e IDH2, podem ser marcadores úteis de diagnóstico e prognóstico, no entanto, esta relação nem sempre é consensual. Os doentes com mutação nos genes IDH1 ou IDH2 parecem ter um melhor prognóstico do que os doentes sem mutação Deste modo, pretendeu-se identificar e caracterizar as mutações encontradas para a população em estudo, e correlacionar a sua presença com a sobrevida dos respectivos doentes. Também, foi objectivo de estudo avaliar se a presença de mutações permite distinguir glioblastomas primários (de novo) de glioblastomas secundários (que progridem de gliomas de baixo grau ou anaplásicos). A proteína de reparação de DNA, MGMT, é um factor implicado na quimioresistência em gliomas. O valor preditivo e de prognóstico da hipermetilação da região promotora do gene MGMT permanece, contudo, controverso. Assim, foi também objectivo deste estudo, avaliar a importância da hipermetilação no prognóstico de doentes com glioblastomas. No total, analisaram-se 141 amostras de doentes seguidos nos Hospitais da Universidade de Coimbra, com astrocitomas (n = 111), oligoastrocitomas (n = 18), oligoastrocitomas (n = 8) e ependimomas (n = 4). No estudo realizado a perda alélica 1p/19q foi avaliada por Fluorescence In Situ Hybridization (iFISH) (n = 130), as mutações somáticas nos genes IDH1 e IDH2 foram analisadas por Sequenciação directa (n = 128) e a análise de hipermetilação foi efectuada por Methylation-Specific Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MS-MLPA) (n = 38). Os dados obtidos sugeriram que a codelecção 1p e 19q está associada com a morfologia de oligodendrogliomas (p<0,0001), independentemente do grau do tumor. Contudo, esta alteração não foi associada com a quimiosensibilidade e aumento da sobrevida destes doentes. Mutações IDH1 foram detectadas em 17 dos 128 gliomas estudados, e encontraram-se 3 mutações diferentes no gene IDH1. Este estudo sugeriu que as mutações IDH1 são frequentes em glioblastomas secundários, mas raros em glioblastomas primários (100% vs 1,1%, p<0,0001). Além disso, mutações IDH1 parecem ser também um factor de prognóstico mais favorável. Nenhum dos 128 gliomas analisados era, todavia, portador de mutações IDH2. A região promotora do gene MGMT apresentou-se metilada em 67% dos doentes e não metilada em 33% dos doentes com glioblastomas. Verificou-se que os doentes com a região promotora hipermetilada, quando submetidos a radioterapia ou quimioterapia, apresentaram um aumento de sobrevida relativamente àqueles que também apresentavam metilação, mas que não foram submetidos a qualquer tratamento (p<0,001). Assim, através da realização deste Projecto, a implementação dos três marcadores em estudo reveste-se da maior importância, devido ao seu valor no diagnóstico e à sua utilidade para prever e controlar melhor o prognóstico de alguns destes doentes. Tem ainda, um poder preditivo da resposta ao tipo de tratamento, o qual poderá ser optimizado e ajustado para alguns doentes previamente seleccionados.