Trypanosoma brucei effect on leukocyte differentiation and activation

• Autor(a) principal: GUERREIRO, Tatiana Raquel Dias
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/53905
• topic: Ciências biomédicas; Biologia molecular; Tripamossomíases; Doença do sono; Tripanossoma brucei brucei; Exossomas; Macrófagos; Linfócitos T; Células T Reguladoras; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

Tripanossomíase Africana ou doença do sono é uma doença zoonótica causada por Trypanosoma brucei, um protozoário parasita transmitido pela mosca tsetse ou Glossina. A introdução do parasita no hospedeiro vertebrado provoca uma sucessão de eventos que envolvem a imunidade inata e adaptativa. Os macrófagos (MΦ) apresentam um papel fundamental na defesa inata por serem células apresentadoras profissionais de antigénio (APC) e células fagocíticas, importantes na eliminação dos tripanossomas. A imunidade adaptativa é assegurada pelos linfócitos, nomeadamente pelos linfócitos T. Contudo, o papel desempenhado por estas células imunitárias ainda não se encontra completamente clarificado. Assim, este estudo teve como objetivo analisar a atividade dos MΦ na infeção por T. brucei, avaliando os níveis de ureia e óxido nítrico (NO) e a expressão membranar das moléculas de classe I (MHCI) e classe II (MHCII) do complexo principal de histocompatibilidade. A diferenciação das populações linfocitárias, T helper (Th), T citotóxicas (Tc) e T reguladoras foi também avaliada. MΦ de murganho foram expostos a tripomastigotas de T. brucei e estimulados com antigénio total e exossomas de T. brucei. A caracterização da ativação macrofágica através de ensaios colorimétricos demonstrou que ambos os fenótipos M1 e M2 foram expressos e foi evidenciada correlação positiva entre a produção de ureia e de NO. Adicionalmente, os resultados da citometria de fluxo indicaram que o parasita prejudica a diferenciação das subpopulações de MΦMHCI+ e MΦMHCII+ mas induz o aumento de moléculas MHCI. Contrariamente, os exossomas demonstraram estimular as funções APC através das moléculas MHCI e MHCII. Os rácios MHCI/MHCII indicaram que o contacto com o parasita favorece a apresentação antigénica às células TCD4+, enquanto que os exossomas direcionam a apresentação antigénica para as subpopulações de linfócitos TCD4+ e TCD8+. A caraterização das populações linfocitárias através da citometria de fluxo demonstrou que T. brucei causa a diminuição das populações de linfócitos Th e Tc. Contrariamente, a estimulação com o antigénio total ou com os exossomas induziram a expansão de ambas as subpopulações linfocitárias. T. brucei parece promover a expansão das subpopulações linfocitárias CD8-CD25+FoxP3- e CD8+CD25+FoxP3-. A expansão da subpopulação celular CD25-FoxP3+ foi observada na fração celular CD8- após estimulação do antigénio e na fração celular CD8+ estimulada por exossomas. Além disso, os exossomas também promoveram a expansão da subpopulação de linfócitos T CD8+CD25+FoxP3+. Curiosamente, apesar da contração celular T. brucei induziu o aumento das moléculas FoxP3. Em conjunto, os resultados obtidos indicam que o parasita e os exossomas parecem exercer efeitos opostos nas células analisadas. Os parasitas parecem minimizar a apresentação antigénica e evitam induzir a expansão das subpopulações de linfócitos T, facilitando a sua permanência no hospedeiro. Por outro lado, os exossomas segregados por T. brucei parecem estimular a apresentação antigénica e mediar a expansão dos linfócitos Th, possivelmente deslocando o foco da atividade do sistema imunitário dos parasitas para os exossomas. Estes resultados permitiram clarificar alguns dos princípios subjacentes à resposta imunitária inata e adaptativa na fase inicial da infeção. A compreensão destes mecanismos pode vir a contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias de controlo e eliminação da Tripanossomíase Africana.