Development of a new in vitro assay for screening malaria transmission blocking compounds

• Autor(a) principal: AZEVEDO, Raquel Alves de
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/20057
• topic: Malaria; Plasmodium berghei; Parasitologia; Bloqueio de transmissão; Anopheles stephensi; Ciclo esporogónico; Mosquito

A malária é uma doença parasitária que afecta 214 milhões de pessoas no mundo inteiro. Uma das maiores dificuldades na luta contra este parasita reside no combate aos seus estadios esporogónicos. São necessários novos compostos que bloqueiem a transmissão do parasita entre seres humanos e o mosquito vector da doença. A redução natural decorrente da transição de gametócitos maduros no hospedeiro humano através de fertilização na refeição sanguínea do mosquito até ao oocisto no mosquito representa um potencial alvo de intervenção. Nesta tese, foi desenvolvido e optimizado um ensaio in vitro que permite determinar a actividade de compostos nos diversos estadios de desenvolvimento do ciclo esporogónico de P. berghei. Este processo inclui a formação de oocinetos e oocistos e maturação de oocistos. Um total de dez compostos, atovaquona, azitromicina, ciclohexamida, cloroquina, dihidroartemisinina, lumefantrina, halofantrina, pirimetamina, pironaridina e thiostrepton foram testados in vitro em termos da sua actividade sobre gametócitos, oocinetos e oocistos. A actividade dos compostos e a validade do ensaio no desenvolvimento de oocistos foi confirmada in vivo em mosquitos Anopheles stephensi. Foram identificados a atovaquona, ciclohexamida e o thiostrepton como sendo altamente potentes na redução da transformação de gametócitos para oócinetos e no desenvolvimento de oocistos. No geral, este ensaio inovador é rápido, relativamente fácil e pouco dispendioso, permitindo fazer um rastreio de uma biblioteca abrangente de moléculas para determinar o seu efeito nas fases de desenvolvimento de Plasmodium no mosquito, minimizando a necessidade de um modelo in vivo. É urgente desenvolver e validar ensaios de elevada produtividade permitindo que novas bibliotecas de compostos sejam testadas não só para P. berghei mas também para P. falciparum e P. vivax. Estes ensaios podem identificar compostos para estudos pré-clinicos permitindo encontrar drogas com actividade que bloqueia a transmissão quer em campo quer numa situação clínica. No futuro, novas combinações de fármacos devem ter atividade não só contra a fase sanguínea dos parasitas, mas também destinar-se a bloquear a transmissão.