Caracterização Genética da Resistência à Eritromicina em Streptococcus agalactia e Degestantes saudáveis

• Autor(a) principal: Pinheiro, Sandra Marisa de Oliveira Sequeira
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/419
• topic: Streptococcus agalactiae; gravidez; antibióticos; eritromicina; genótipos

Streptococcus agalactiae (Grupo B de Lancefield, EGB), um microrganismo comensal do homem, reconhecido em 1920 como o agente etiológico da mastite bovina, tem sido associado a infecções em parturientes e recém-nascidos, sendo o principal agente de septicemia e meningite neonatal. Para evitar a infecção perinatal recomenda-se a pesquisa da bactéria na região vagino-perianal durante o terceiro semestre de gravidez, indicando o tratamento antibiótico durante o parto das gestantes colonizadas. O objectivo deste estudo foi verificar a ocorrência de colonização por Streptococcus agalactiae em gestantes saudáveis, avaliar a associação da colonização com variáveis maternas demográficas e clínicas, avaliar a susceptibilidade dos isolados aos antibióticos e determinar os fenótipos de resistência à eritromicina e à clindamicina e os mecanismos genéticos nelas implicados, com utilidade clínica na recomendação da profilaxia e terapêutica empírica. Realizou-se um estudo envolvendo 520 gestantes em acompanhamento pré-natal, atendidas no Centro Hospitalar de Trás-os-Montes e Alto Douro, durante o período de Janeiro a Junho de 2008. Durante o atendimento foram colhidas amostras vaginal e anorrectal para rastrear a presença de colonização por S. agalactiae. As gestantes colonizadas por EGB foram caracterizadas por variáveis demográficas (idade e número de gestações) e clínicas (ocorrência de abortos anteriores e presença ou ausência de diabetes mellitus). As colheitas foram efectuadas com zaragatoas estéreis e colocadas em meio selectivo de Todd Hewitt. Procederam-se às provas presuntivas de identificação de EGB (coloração pelo método de Gram, observação microscópica, prova da catalase), e provas confirmatórias (CAMP e aglutinação em látex). Realizou-se o estudo da resistência aos antibióticos eritromicina, clindamicina, penicilina, cefotaxima, vancomicina, quinupristina-dalfopristina, cloranfenicol, ofloxacina e meropenem. O E-teste para o cálculo das concentrações mínimas inibitórias (mg/l) foi aplicado, adicionalmente, para a eritromicina e clindamicina. Os fenótipos de resistência MLSB induzida e constitutiva (cMLSB e iMLSB, respectivamente), bem como o fenótipo de resistência M da eritromicina e clindamicina foram determinados pelo teste de disco duplo. A presença dos genes que conferem resistência aos macrólidos como ermA, ermB, ermC, ermTR, msrA e mef(A/E) foram estudados através de PCR, com o uso de primers específicos e posterior sequenciação. A prevalência de colonização materna por este microrganismo foi de 18% na população estudada. Todos os 93 isolados mostraram susceptibilidade à penicillina, cefotaxima, vancomicina, quinupristina-dalfopristina, cloranfenicol, ofloxacina e meropenem. A resistência à eritromicina e clindamicina foi detectada em 15% e 9,6% dos isolados, respectivamente. Os fenótipos de resistência detectados entre os 14 isolados resistentes à eritromicina foram os seguintes (número de isolados): cMLSB (9), iMLSB (3), e de M (2). As CMI (mg/l) para a eritromicina e clindamicina foram: isolados cMLSB (128-B (16-mg/l) e isolados M (2-8 e 1 mg/l). A seguinte combinação de genes foi detectada entre os isolados com fenótipos cMLSB ou iMLSB: ermB (6 isolados), ermA + ermTR (3), ermA + ermB + ermTR (1) e nenhum destes genes (2). Os dois isolados com fenótipo M possuíam o gene mef(A/E) e o gene msrA também foi encontrado num dos isolados de S. agalactiae com fenótipo M.