Aplicação de MEPS em bioanálise de amostras de tecidos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marques, Alexandre Emanuel Ramos
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.6/5277
Resumo: A unidade curricular Estágio surge no final do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas, dando-me a oportunidade de aplicar, em contexto prático, todos os conhecimentos adquiridos ao longo deste curso, permitindo-me não só tomar contacto com todas as tarefas e responsabilidades que um Farmacêutico possui no contexto da Farmácia Comunitária, como também me proporcionou um contacto com uma realidade distinta, a investigação, preparando-me melhor para as atividades que poderei vir a desenvolver no futuro. Este relatório é composto por dois capítulos, o primeiro referente à componente de investigação laboratorial e o segundo referente ao estágio realizado em Farmácia Comunitária. Os dois capítulos estão estruturados de forma a descrever as atividades realizadas nestes dois campos de atividade de um Farmacêutico. A componente de investigação laboratorial teve como principal objetivo demonstrar a aplicabilidade da microextração em seringa empacotada (MEPS – microextraction by packed sorbent) como técnica de preparação de amostras de tecidos para análise por cromatografia líquida. A preparação de amostra tem como principal objetivo pré-concentrar os analitos e remover os interferentes de matrizes complexas, que dificultam a quantificação destes, para que a sua quantificação e deteção se realize com maior sensibilidade e boa seletividade. A técnica de MEPS foi desenvolvida há cerca de uma década e consiste numa técnica de preparação/extração de amostras que tem sido amplamente utilizada na análise de fármacos ou outros compostos em matrizes líquidas (fluídos biológicos e águas); no entanto, a sua aplicabilidade para bioanálise em amostras de tecidos é quase inexistente. Para demonstrar esta possibilidade, considerou-se como analitos “modelo” a carbamazepina e o seu metabolito ativo (carbamazepina-10,11-epóxido), tendo-se procedido à validação de um método de HPLC-DAD para a quantificação destes dois analitos em amostras de plasma e em homogeneizados de cérebro e fígado de murganho. Adicionalmente, para demonstrar a aplicação do método a amostras reais, realizou-se um estudo in vivo em que se procedeu à administração oral de carbamazepina a murganhos; por fim, procedeu-se à quantificação da carbamazepina e do seu metabolito nas três matrizes, utilizando-se a técnica de MEPS no processo de preparação das amostras. Os resultados obtidos foram ainda sujeitos a uma análise farmacocinética e a qualidade dos parâmetros estimados permite inferir que a técnica de microextração é útil e vantajosa para a bioanálise de amostras biológicas, incluindo tecidos. Relativamente ao estágio realizado em Farmácia Comunitária, este decorreu na Farmácia São Cosme, na Covilhã, entre os dias 26 de janeiro e 5 de junho. Este estágio permitiu-me desenvolver competências em diversas áreas de responsabilidade de um farmacêutico comunitário, nomeadamente no que se refere às instalações, recursos humanos e materiais que uma farmácia deve possuir, aprovisionamento e armazenamento de medicamentos, interação com os utentes, dispensa de medicamentos e outros produtos de saúde, prestação de outros cuidados de saúde, manipulação de medicamentos e tarefas referentes à contabilidade e gestão de uma farmácia.
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Os dois capítulos estão estruturados de forma a descrever as atividades realizadas nestes dois campos de atividade de um Farmacêutico. A componente de investigação laboratorial teve como principal objetivo demonstrar a aplicabilidade da microextração em seringa empacotada (MEPS – microextraction by packed sorbent) como técnica de preparação de amostras de tecidos para análise por cromatografia líquida. A preparação de amostra tem como principal objetivo pré-concentrar os analitos e remover os interferentes de matrizes complexas, que dificultam a quantificação destes, para que a sua quantificação e deteção se realize com maior sensibilidade e boa seletividade. A técnica de MEPS foi desenvolvida há cerca de uma década e consiste numa técnica de preparação/extração de amostras que tem sido amplamente utilizada na análise de fármacos ou outros compostos em matrizes líquidas (fluídos biológicos e águas); no entanto, a sua aplicabilidade para bioanálise em amostras de tecidos é quase inexistente. Para demonstrar esta possibilidade, considerou-se como analitos “modelo” a carbamazepina e o seu metabolito ativo (carbamazepina-10,11-epóxido), tendo-se procedido à validação de um método de HPLC-DAD para a quantificação destes dois analitos em amostras de plasma e em homogeneizados de cérebro e fígado de murganho. Adicionalmente, para demonstrar a aplicação do método a amostras reais, realizou-se um estudo in vivo em que se procedeu à administração oral de carbamazepina a murganhos; por fim, procedeu-se à quantificação da carbamazepina e do seu metabolito nas três matrizes, utilizando-se a técnica de MEPS no processo de preparação das amostras. Os resultados obtidos foram ainda sujeitos a uma análise farmacocinética e a qualidade dos parâmetros estimados permite inferir que a técnica de microextração é útil e vantajosa para a bioanálise de amostras biológicas, incluindo tecidos. Relativamente ao estágio realizado em Farmácia Comunitária, este decorreu na Farmácia São Cosme, na Covilhã, entre os dias 26 de janeiro e 5 de junho. Este estágio permitiu-me desenvolver competências em diversas áreas de responsabilidade de um farmacêutico comunitário, nomeadamente no que se refere às instalações, recursos humanos e materiais que uma farmácia deve possuir, aprovisionamento e armazenamento de medicamentos, interação com os utentes, dispensa de medicamentos e outros produtos de saúde, prestação de outros cuidados de saúde, manipulação de medicamentos e tarefas referentes à contabilidade e gestão de uma farmácia.The curricular traineeship appears at the end of the MSc in Pharmaceutical Sciences, giving me the opportunity to apply in practical context all the knowledge acquired during this course and allowing me not only make contact with all the tasks and responsibilities that a pharmacist has in Community Pharmacy, but also the access to a different reality, the laboratory research, preparing myself better for the activities that will be able to carry out in the future. This report consists of two chapters, the first refers to laboratory research component and the second related to the traineeship in Community Pharmacy. The two chapters are structured in order to describe the activities carried out in these two fields of activity of a Pharmacist. Laboratory research component aimed to demonstrate the applicability of microextraction by packed sorbent (MEPS) as sample preparation technique of tissues for analysis by liquid chromatography. Sample preparation aims to pre-concentrate the analytes and remove the interfering compounds of complex matrices, which make it difficult to quantify the analytes, so that its quantification and detection takes place with greater sensitivity and good selectivity. MEPS was developed nearly a decade ago and it is a sample preparation/extraction technique which has been widely used in the analysis of drugs or other components in liquid matrices (water and biological fluids); however, its applicability in tissues samples is almost absent. To demonstrate this possibility, carbamazepine and its active metabolite (carbamazepine-10,11-epoxide) were considered as “model” analytes and it was carried out the validation of a HPLC-DAD method to quantify these two analytes in samples of plasma, and brain and liver tissue homogenates of mice. In addition, to demonstrate the application of the method to real samples, an in vivo study was performed in which carbamazepine was orally administered to mice; finally, the concentrations of carbamazepine and its active metabolite were determined in the three matrices using MEPS in the sample preparation process. The obtained results were also subjected to a pharmacokinetic analysis and the quality of the estimated parameters allows to conclude that this microextraction technique is useful and advantageous for the bioanalysis of biological samples, including tissues. Regarding the traineeship in Community Pharmacy, this took place in São Cosme Pharmacy in Covilhã, between January 26th and June 5th. This traineeship allowed me to develop skills in several fields of the responsibility of community pharmacist namely facilities, human and material resources that a pharmacy must have, provision and storage of medicines, interaction with the users, dispensing of medicines and other health products, the provision of other health care, handling of medicines and the tasks related to accounting and management of a pharmacy.Alves, Gilberto LourençoRodrigues, Márcio José de Abreu MarquesuBibliorumMarques, Alexandre Emanuel Ramos2018-07-20T15:56:04Z2015-6-222015-07-152015-07-15T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.6/5277TID:201644150porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-12-15T09:42:58Zoai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/5277Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T00:46:13.689513Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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