Estudo das doenças genéticas humanas na vertente técnica e científica: citogenética convencional e molecular- FISH

• Autor(a) principal: Silva, Tiago José Ferreira da
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/10540
• topic: diagnóstico citogenético; anomalias cromossómicas

A descoberta da estrutura e número correto dos cromossomas humanos permitiu a associação de diversas anomalias cromossómicas como a causa de doenças genéticas, tendo por isso um grande impacto na saúde pública. Esta associação permitiu o desenvolvimento da citogenética clínica, que tem como principal objetivo o diagnóstico das anomalias cromossómicas. Para tal, foram desenvolvidas técnicas de cultura celular e de bandeamento permitindo a análise e identificação dos cromossomas. Porém, estas práticas apresentam limitações, sendo necessário desenvolver técnicas com resoluções superiores de modo a complementar e colmatar dúvidas na interpretação da análise cromossómica. Assim o estudo citogenético inclui a metodologia convencional para a obtenção de um cariotipo, bem como técnicas de citogenética molecular como a Fluorescence in Situ Hybridization (FISH), o Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) e o array Comparative Genomic Hybridization (aCGH), entre outras, que permitem análises mais direcionadas e/ou a deteção de anomalias de menores dimensões. O estudo citogenético pode ser realizado em contexto de diagnóstico pré e pósnatal. Com o aumento da realização de estudos citogenéticos e a utilização de técnicas mais específicas, têm-se descoberto rearranjos cromossómicos complexos de difícil deteção e que apresentam fenótipos com grande variabilidade. Deste modo, é de extrema importância caracterizar eventuais desequilíbrios cromossómicos e determinar a sensibilidade, especificidade e contributo das diferentes técnicas de diagnóstico citogenético na deteção de anomalias cromossómicas. Com este estudo pretendeu-se obter um melhor conhecimento das diferentes anomalias detetadas, no Centro de Genética Médica Jacinto de Magalhães. E efetuar a divulgação dos resultados junto da comunidade científica, assim como avaliar as limitações e vantagens das diferentes técnicas citogenéticas, de modo a poder estabelecer uma melhor correlação entre a anomalia e o fenótipo apresentado e ajudar a estabelecer um diagnóstico mais rápido e eficaz. Durante este estudo foram identificados 10 casos de interesse, que incluem uma duplicação de genes do cromossoma Y, uma duplicação de um gene do cromossoma 5, um isocromossoma X, um derivativo do cromossoma X, um cromossoma marcador supranumerário do cromossoma 15, um derivativo do cromossoma 2, um mosaico 45,X/46,idic(Y), um cromossoma Y dicêntrico, uma deleção subtelomérica do braço curto do cromossoma 3 e uma Síndrome de Cri-du-Chat. As técnicas utilizadas neste trabalho foram fundamentais para o estudo de pacientes com fenótipos particulares e nos casos que apresentam rearranjos mais complexos, a combinação das diferentes técnicas foi essencial para obter o diagnóstico correto. Na maioria dos casos foi estabelecida a correlação genótipo-fenótipo para as anomalias cromossómicas identificadas, todavia, não foi possível estabelecer esta correlação em alguns dos casos reportados, sendo necessário recomendar a realização de estudos posteriores.