Diagnóstico e tratamento da infeção malárica: desenvolvimento de uma nova plataforma de diagnóstico e de um novo composto antimalárico

• Autor(a) principal: FERREIRA, Mónica Eduarda Franco
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/66269
• topic: Microbiologia médica; Biologia molecular; Malária; Diagnóstico; Terapêutica; Mortalidade; Antimaláricos; Doença; Doenças tropicais; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A malária, causada em humanos por cinco Plasmodium spp., provocou cerca de 219 milhões de casos de infeções, mais de 435 mil mortes e a morte de uma criança (com menos de 5 anos) a cada dois minutos no ano de 2017 (WHO, 2018a). Atualmente está a ocorrer uma estagnação do progresso global no combate à malária que somente será contrariada com a inovação no seu controlo, através de três aspetos-chave: diagnóstico rápido, tratamento precoce e a escolha adequada do tratamento antimalárico (WHO, 2018a). Tendo isso em conta, a presente dissertação tem como objetivo o desenvolvimento de uma plataforma de diagnóstico de malária, que disponibilizará um perfil muito completo de características que influenciam a escolha do tratamento, como características do parasita: espécie de Plasmodium, potencial para possíveis resistências a fármacos antimaláricos e evolução para doença grave, assim como características do hospedeiro, tal como deficiência em G6PD. Esta plataforma permitiria um tratamento precoce e específico para cada indivíduo infetado. Devido ao aumento crescente de resistências aos fármacos antimaláricos e à necessidade de novos tratamentos, esta dissertação tem também como objetivo o estudo do Composto E, que possui potencial efeito antimalárico, em P. falciparum (in vitro), através de possíveis alterações no desenvolvimento do parasita, nomeadamente no processo metabólico de degradação de hemoglobina. Deste modo, foram analisadas: densidade parasitária, número de células (RBCs) e quantidade de hemozoína. Para o desenvolvimento da plataforma de diagnóstico, realizou-se a otimização de várias técnicas de amplificação de ácidos nucleicos (nested PCR, multiplex PCR e LAMP) para a identificação de espécies de Plasmodium, a seleção da técnica mais apropriada para diagnóstico de malária, o desenho e adaptação da técnica selecionada a LFD e, por fim, otimização da reação da técnica adaptada a LFD. A técnica selecionada para adaptação a LFD, foi o multiplex PCR, pela sua elevada sensibilidade para deteção de P. falciparum e pela a sua capacidade de amplificar múltiplas sequências alvo numa única reação. Dada a difícil otimização de um dos primers marcados (GEN-FITC), não foi possível alcançar o objetivo final no tempo desejado, no entanto o trabalho de otimização continuará em curso. Relativamente ao estudo do efeito do Composto E, concluiu-se que efetivamente este composto tem efeito antimalárico, com alguma capacidade de retardar o desenvolvimento do parasita e de impedir o processo de biocristalização, levando à morte do parasita. Por fim, foi idealizado um conjunto de perspetivas futuras relativas, essencialmente, à plataforma de diagnóstico, com uma seleção geral de alvos moleculares relacionados com o tratamento, que permitirão compor o tal perfil de características importantes ao tratamento, assim como a oportunidade de monitorização de marcadores de perfis de resistência a fármacos antimaláricos, contribuindo para o controlo global da malária.